作者:潘学武; 董妍玲; 康恒 期刊:《生物学通报》 2013年第01期
作为高附加值重组蛋白生产平台,由于在成本和安全性方面的优势,植物已成为继微生物、哺乳动物等表达系统之后,获得广泛认同的极具潜力的蛋白表达系统。植物表达系统主要包括转基因植株,叶绿体转化植物,瞬时表达系统,细胞悬浮培养。综述了这些表达系统生产重组蛋白的产量和质量,尤其是各种表达系统的优缺点。
作者:岳涵; 覃瑞; 龚汉雨; 宋雪杨; 熊海容; 刘虹; 余光辉 期刊:《生物资源》 2018年第01期
辣木富含多种营养成分,在食品和药物开发方面有巨大的潜在开发价值。本文提供了一种可行的辣木细胞悬浮培养技术。由辣木的根诱导形成愈伤组织和叶诱导形成愈伤组织的合适细胞悬浮培养条件分别为MS培养基(MS)+1.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+1.0mg/L激动素(KT)和MS+0.5mg/L 2,4-D+0.5mg/L KT,摇床转速均为50~100r/min,将愈伤组织添加到液体悬浮培养基中20d左右可得到大量悬浮细胞。本研究为辣木细胞水平的培养和研究提...
作者:林龙云; 周以飞; 潘大仁 期刊:《热带亚热带植物学报》 2005年第06期
以太子参的幼叶为外植体,诱导培养获得太子参愈伤组织,并通过细胞悬浮培养获取皂苷.结果表明:用MS+BA 0.2 mg L-1+2,4-D 1.0 mg L-1+KT 1.0 mgL-1液体培养基可获得大量繁殖速度快、生长均匀一致的悬浮细胞.由细胞悬浮培养获得的太子参皂苷的HPLC色谱峰值与常规种植及组培苗的相同,但纯度较好.细胞悬浮培养约30 d时,每克干重细胞的培养液内可提取总皂苷量为2.13-2.92 mg,略低于大田常规种植所收获的每克干重太子参块根内的总皂苷含...
现代分子生物学技术及实验技巧 本书系统介绍了现代分子生物实验技术。第1~6章包括质粒的提取和目的基因的获得、基因的克隆和重要分子的筛选以及目的基因的表达和检测;第7~14章涉及近年来发展起来的一些新技术,包括报告基因分析、差异基因表达谱分析、蛋白质-核酸相互作用技术、蛋白质-蛋白质相互作用技术、细菌体内同源重组技术、转基因动物、基因打靶技术和流式细胞术;第15~17章介绍了一些新的分子生物学研究技术,包括干细...
根据金宇保灵生物药品有限公司《关于启动口蹄疫灭活疫苗悬浮培养生产线的请示》,农业部兽药GMP办公室为了解该公司在口蹄疫O型、亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗转瓶生产线进行细胞悬浮培养技术改造的情况,全面把握疫苗生产质量状况,根据有关规定,组织GMP检查组对该企业实施了飞行检查。检查组按照预定的检查方案,对该企业厂房设施、设备工艺验证、管理制度制定、人员培训以及实际运行情况等实施了现场检查。综合认为该公司改造后的口蹄疫灭...
作者:李俊; 彭正松 期刊:《广西植物》 2005年第04期
对刺激剂对植物细胞悬浮培养的影响及如何提高刺激剂的诱导率进行了综述.刺激剂对细胞悬浮培养的影响主要表现为酶活化、蛋白质含量改变、氧进发、细胞程序性死亡、pH值改变、次生代谢产物积累等防御反应.提高刺激剂对悬浮培养细胞的诱导效率必须优化刺激剂的种类,刺激剂的浓度和加入时间,创建更好的诱导模式.
作者:王玲; 李琰; 代伟娜; 严静; 张朝红 期刊:《生物技术通报》 2018年第08期
为了利用葡萄愈伤组织建立快速稳定的葡萄细胞悬浮体系,以无核白和黑比诺葡萄无菌幼苗的茎段、叶片以及叶柄为外植体,通过基本培养基、不同植物生长调节剂配比及其浓度、PVP等优化疏松型愈伤组织的诱导方法并建立稳定的细胞悬浮培养体系。结果表明,以无核白和黑比诺葡萄茎段为外植体,在添加2.0mg/LNAA和0.3mg/L6-BA的MS培养基上适合疏松型愈伤组织的诱导。以B5为基本培养基添加1.0113lg/L2,4-D和0.5mg/L,6-BA以及0-2...
作者:许耀祖; 王晓军; 赵民安; 韦彦余; 赵海清; 林侃 期刊:《中国细胞生物学学报》 2005年第06期
采用正交设计方法对影响薰衣草悬浮细胞生长的因素进行了优化研究,筛选了最有利于薰衣草悬浮细胞生长的培养条件:含有0.025 mg/L 2,4-D、0.5 mg/L 6-BA、40 g/L蔗糖的B5培养基和120 r/min的转速,在此条件下培养15天,悬浮活细胞密度可达到4.4×105个/ml;经过3个月的培养,悬浮细胞的分化率可达到90%以上.通过分析薰衣草细胞对残糖的消耗规律,探讨了蔗糖浓度影响活细胞密度的原因.
作者:徐亮胜; 薛晓锋; 付春祥; 金治平; 陈毓荃; 赵德修 期刊:《生物工程学报》 2005年第03期
向肉苁蓉悬浮细胞培养系中添加茉莉酸甲酯(MJ)和水杨酸(SA),分别考察了这两种诱导子的添加浓度及添加时间对肉苁蓉悬浮细胞系中苯乙醇甙含量的影响.研究结果表明:MJ和SA能够促进肉苁蓉悬浮细胞系中苯乙醇甙(PeG)和松果菊甙(Echinacoside)的合成,但两者的适用的浓度范围和最佳添加时间存在差异.与未经诱导子处理的细胞培养结果相比,MJ在对数生长初期(培养14d),添加浓度为5μmol/L条件下,可使肉苁蓉悬浮细胞系中PeG含量提高2.59倍,Ech...
作者:付羚; 张訸; 罗旭璐; 尚俊可; 唐军荣; 赵平 期刊:《西部林业科学》 2019年第05期
以樟叶越桔组培苗幼嫩叶片为外植体,研究了植物生长调节剂对其愈伤组织诱导和增殖的影响,建立樟叶越桔的细胞悬浮培养体系。结果表明,樟叶越桔的愈伤组织诱导的适宜培养基为WPM+2.0mg/L6-BA+0.05mg/LNAA+2.0mg/L2,4-D+30%蔗糖。樟叶越桔愈伤组织增殖的最佳植物生长调节剂组合为2.0mg/LZT+0.4mg/LNAA,得到的蓬松愈伤组织适宜进行其悬浮培养。WPM3/5有机为适宜的改良培养基,通过细胞悬浮生长曲线的测定,确定樟叶越桔细胞悬浮培养较适...
作者:罗成科; 彭正松 期刊:《西华师范大学学报·哲学社会科学版》 2005年第01期
获得生长快速,疏松型愈伤组织是植物细胞悬浮培养的前提.用半夏叶片作外植体,采用单因子法,在添加不同浓度的2,4-D和BA的MS固体培养基上诱导半夏愈伤组织,比较愈伤组织的诱导率、性状和长势,其中当MS+3.0mg/L 2,4-D+0.5mg/L BA时,愈伤组织诱导率和长势最好,为疏松愈伤组织系.结果表明:相同激素,不同浓度配比对愈伤组织诱导率、长势和发生的性状有明显的影响.
作者:郑媛; 肖娅苹 期刊:《亚热带植物科学》 2005年第01期
以烟草叶片为外植体,以2/3Ms+BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L为愈伤组织诱导培养基,继代培养3次后,转入添加3332.48mg/L Ca(NO3)2的该培养基上继代,可获得脆散型愈伤组织,并由此建立细胞悬浮培养系统.
作者:闫静辉; 张小兵; 李亚璞; 李春生; 吴萌; 陈英珠; 程华; 籍宝霞; 陈瑞琴 期刊:《河北省科学院学报》 2005年第04期
通过对西洋参根外植体愈伤组织诱导和培养,筛选出了质地疏松、生长快的愈伤组织无性系;将该愈伤组织接种在液体培养基中进行振荡培养,经多次传代、筛选获得了分散程度好的高产西洋参悬浮细胞系12-1.在此基础上,建立并优化了西洋参悬浮细胞培养工艺体系:温度(24±1)℃,pH值6.0,生长周期是25d,培养4d后再换液继代一次,培养20d后补料.细胞悬浮培养结束后,细胞的生长量及人参皂甙含量分别达到23.65g/L和677.25mg/L.
作者:刘俊斌; 朱寅彪; 潘杰; 朱国强; 吴红霞; 王鹏志; 孙宝华; 李玉和; 范娟 期刊:《黑龙江畜牧兽医》 2017年第12期
猪圆环病毒2型(Porcinecir covims type2,PCV-2)是近年来发现的一种较难控制的传染病。该疾病主要侵害哺乳仔猪、育肥猪及怀孕母猪,其特征性临床症状为患猪体质不良、皮肤苍白,引起的疫病包括仔猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)、增生性坏死性肺炎(PNP)、猪皮炎与肾病综合征(PDNS)、猪呼吸系统疾病综合征(PRDC)、繁殖障碍、先天性震颤及肠炎等。
作者:张洁; 葛会波; 张学英; 郑丽锦; 时翠平 期刊:《河北农业大学学报》 2005年第01期
以不同基因型草莓花药为试材,建立草莓细胞悬浮系,研究结果表明:悬浮培养初期的褐化程度和褐化恢复的快慢可作为判别建成稳定悬浮细胞系的一个重要指标,并采用分步培养法获得了明旭的植株再生.
从麻黄离体培养的器官再生、愈伤组织的诱导和分化、细胞悬浮培养、麻黄雌配子体离体培养单倍体植株的建立、麻黄愈伤组织再分化的发育解剖学、愈伤组织培养及其碱含量的变化等方面阐述了麻黄组织培养和麻黄分子生物学研究进展,认为应在扩大麻黄繁殖系数研究的同时,注重对从试管苗到大田移栽的中间环节研究,进而实现麻黄工厂化育苗,达到解决大规模人工栽培种源匮乏的问题.进行系统的分子生物学研究,为麻黄的优良基因导入、表达及高...
作者:刘瑞; 胡焕焕; 石晓卫; 丰慧根 期刊:《食品工业科技》 2019年第15期
以高异黄酮含量的龙野01-491大豆为材料,以下胚轴为外植体诱导愈伤组织,建立大豆细胞悬浮培养体系;并研究了前体(L-phe和NaAc)、真菌诱导子(青霉和黑曲霉诱导子)对大豆悬浮细胞异黄酮积累的影响。结果表明,在细胞培养9 d加入100μmol/L的L-phe,异黄酮产量达(12.52±0.51) mg/flask,是对照组的3.23倍;在0 d加入80μmol/L NaAc,产量达(5.55±0.36) mg/flask,是对照的1.43倍;在9 d加入0.5 mL青霉诱导子,异黄酮产量达(10.20±0.17) mg/flask...
作者:张泽宏; 何义发; 李文; 周吉源; 刘树楠 期刊:《湖北民族学院学报·哲学社会科学版》 2005年第04期
以丹参幼嫩叶片为材料诱导和筛选愈伤组织,进行细胞悬浮培养.初步探讨了在光照和黑暗条件下,悬浮培养的丹参细胞生长和生理生化特性.结果表明:不同光照条件下,丹参悬浮培养细胞的生长周期均为30 d,细胞增殖率曲线呈"S"形;可溶性蛋白质含量、POD活性、SOD活性均在不同时间出现两个峰值,其变化趋势与细胞的生长势呈正相关.光照有利于丹参细胞悬浮培养,最佳继代培养时间为18 d到21 d,最佳收获期可延迟一周.
作者:李冬杰; 魏景芳; 张进献; 李世杰; 刘颖 期刊:《中草药》 2004年第07期
利用红豆杉细胞培养技术直接分离得到紫杉醇是解决紫杉醇供需矛盾的最佳途径之一.如何减轻和控制细胞培养过程中发生的褐变问题,又成为细胞培养法成败的关键因素.现就近几年来红豆杉细胞培养法生产紫杉醇过程中有关抗褐变剂方面的研究,从愈伤组织诱导、继代及细胞悬浮培养3个环节分别进行了简要论述.
作者:秦卫东; 高明侠; 苗敬芝; 吕兆启 期刊:《食品与发酵工业》 2005年第07期
采用银杏果实为原料诱导得到颗粒状愈伤组织,在MS培养液中筛选克隆细胞,单细胞在MS+3.0mg/L NAA+1.0 mg/L KT中培养.细胞悬浮液与3%的海藻酸钠混合后滴入2%CaCl2 MS,制成小球凝胶.固定化细胞在MS+3.0 mg/L NAA+1.0 mg/L KT+10 mg/L肌醇的培养基中悬浮培养25 d,黄酮生物合成量为85.63 mg/L,克隆细胞增长速度提高24.45倍.