作者:杨世锋; 孙超; 李昭君; 王玉佩; 张红 期刊:《中国生物化学与分子生物学报》 2018年第12期
线粒体移植( mitochondrial transplantation)是从患者正常组织分离线粒体然后注入线粒体损伤或缺失的部位,使损伤细胞获得救治、器官功能得以恢复的全新干预技术。本研究重点探讨线粒体移植对人神经胶质瘤细胞(U87)辐射敏感性的影响。提取人星形胶质细胞(human astrocytes, HA)的线粒体,用荧光探针Mito-Tracker Red进行标记后再与U87细胞共培养,激光共聚焦显微镜观察发现,Mito-Tracker Red的红色荧光大量出现在U87细胞内;随后对进...
作者:李传芬; 荆文; 向冬生; 李涛; 焦淑欣; 杨翠玲; 马志红; 王敏 期刊:《解剖学报》 2018年第05期
目的探讨microRNA-613(miR-613)在人胶质瘤中的表达及其对增殖与转移的影响。方法采用Real-time PCR法对30例人胶质瘤患者瘤组织和30例非胶质瘤患者的脑组织的miR-613表达水平进行检测,并分析其与胶质瘤临床病理特征及预后的关系;采用Lipofectamine TM2000将miR-613模拟物(miR-613 mimics)和无关序列对照(miR-613 con)转入U87细胞中,Real-time PCR检测两组细胞miR-613的表达水平,CCK8法检测细胞增殖变化,Transwell实验检测细...
作者:王艳华; 楚建杰; 李子敏; 胡娜平; 李会会; 郑建民; 张彩勤; 师长宏; 杨志福; 奚苗苗; 文爱东; 翁琰 期刊:《中国药理学通报》 2018年第05期
目的应用不同数量U87-MG细胞接种裸鼠脑内,建立裸鼠脑胶质瘤模型,观察其生长特性。方法采用立体定向技术,分别将3.0×1010·L-1、4.0×1010·L-1、5.0×1010·L-1浓度的人脑胶质瘤细胞U87-MG单细胞悬液,接种于18只♂裸鼠的右侧尾状核区,每只接种体积为5μL,另取6只裸鼠作为对照,接种同体积Hanks液。观察不同接种量实验鼠的生存状态、成瘤情况及脏器转移灶、带瘤生存期,测量肿瘤的最大径,计算肿瘤体积,将获取的全脑标本制作病理切片,行HE染...
作者:雷舒婷; 赵静静; 郑岩; 李修岭; 韩双印 期刊:《中国实用医刊》 2018年第07期
目的构建稳定表达表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的胶质瘤U87细胞株。方法首先EGFRvⅢcDNA(2832bp)克隆入pCDH-CMV-MCS-EF1-puro的XbaⅠ和NotⅠ位点,引物中添加His6标签,测序鉴定;用磷酸钙沉淀法将含目的基因的质粒pCDH-CMV-EGFRvⅢ-EF1-puro与慢病毒包装质粒pCMV-dR8.9和包膜蛋白质粒pVSV-G三质粒共转染293T细胞。过滤、浓缩包装好病毒后,利用稀释计数法测定病毒滴度。制备好的慢病毒感染U87细胞,经嘌呤霉素筛选、...
作者:康鹏; 张鹏; 王宇 期刊:《遵义医学院学报》 2017年第03期
目的 检测Calumenin在成人脑胶质母细胞瘤中的表达,并研究其对胶质瘤细胞系(U87细胞株)的细胞生物学作用。方法 收集成人脑胶质母细胞瘤手术切除标本(肿瘤组)和非脑部疾病死亡的人脑组织标本(对照组),RT-q PCR检测Calumenin mRNA水平,免疫组化染色检测Calumenin表达;利用RNAi技术在U87细胞中特异性沉默Calumenin,观察细胞增殖及迁移变化。结果 Calumenin在人脑胶质母细胞瘤中mRNA表达量明显高于对照组,其免疫组化染色显示Cal...
作者:王济舟; 曾宇; 宋烨; 漆松涛 期刊:《分子影像学》 2017年第02期
目的 探索不同传代次数对人胶质瘤U87细胞系生物学特性的影响及其分子机制。方法 以两种不同传代次数的U87(I)、U87(II)为研究对象,使用MTT细胞增殖实验、Transwell小室迁移实验及Boyden小室侵袭实验分别检测U87细胞的增殖、迁移和侵袭能力;使用Western Blot技术检测U87(Ⅰ)及U87(Ⅱ)的CTHRC1,FOXM1,PLOD2,MMP9,TGF-β,E-cadherin,Slug,Snail,Vimentin,PI3K,p-PI3K,Akt,p-Akt的表达量差异。结果 U87(Ⅰ)较U87(Ⅱ)更容易形成网状结构...
作者:金明卫; 玄承敏; 安琪; 王磊 期刊:《中国当代儿科》 2016年第08期
目的了解磷酸肌醇4磷酸(PI4P)对人脑胶质瘤细胞侵袭迁移的影响,探索PI4P在人脑胶质瘤发生过程中的作用机制。方法包装慢病毒,构建U87-GFP(过表达PI4P细胞系对照组)、U87-GFP-PI4P(过表达PI4P细胞系实验组)、U87-Scramble(沉默PI4P细胞系对照组)、U87-sh PI4P(沉默PI4P细胞系实验组)细胞系。应用Werston blot检测各组PI4P的表达水平,应用细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果免疫印迹实验检测出U87-G...
作者:向伟; 漆松涛; 刘亚伟; 李和珍; ; 易国仲; 陈子阳; 严乐 期刊:《南方医科大学学报》 2016年第06期
目的探讨小干扰RNA(si RNA)干扰降低PC4和SFRS1相互作用蛋白1(PSIP1)的表达对人胶质瘤U87细胞侵袭和迁移的影响并初步探讨其机制。方法采用化学合成靶向PSIP1的si RNA,脂质体法转染U87细胞,用Real-time PCR检测RNA干扰效率;Transwell侵袭实验测细胞侵袭能力;划痕实验检测其迁移能力;干扰PSIP1表达后,Western blot检测间质细胞来源的N-cadherin、β-catenin蛋白和转录因子Slug的表达。结果 PSIP1-si RNA转染胶质瘤U87细胞后,PSIP...
作者:梁朝辉 焦保华 卢圣奎 郭二坤 张广宇 期刊:《中国神经肿瘤》 2011年第01期
背景与目的:近年来,相继发现Wip1在多种肿瘤中高表达,并能通过p38MAPK/p53信号通路对p53起负反馈调控,导致p53表达下降及诱导p53突变,与患者预后密切相关。本研究探讨野生型p53-诱导的蛋白磷酸酶1(the wild-type p53-induced phosphatase 1,Wip1)在人多形性胶质母细胞瘤及U87、U251细胞中表达及其临床意义。方法:应用免疫组织(细胞)化学、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot检测31例多形性胶质母细胞瘤及U87、U25...
作者:张萍 陈菲 卞维鹏 肖洋炯 覃文新 期刊:《肿瘤》 2009年第08期
目的:探讨环孢素A(cyclosporine A,CsA)联合三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对脑胶质瘤细胞U87-MG自噬性死亡的影响。方法:CsA联合ATO作用U87-MG细胞后,应用MTT法检测细胞的存活率及ATO半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC50),FCM法检测细胞周期的改变,荧光显微镜下观察及FCM法定量分析经吖啶橙(acridine orange,AO)活体染色后细胞质内酸性自噬泡(acidic vesicular organelles,AVO)的形成情况;Western印...
作者:赵林涛 陈俊颖 赵海兴 王双运 郑沅 期刊:《现代生物医学进展》 2011年第11期
目的:进一步证明胶质瘤干细胞是广泛存在的,并寻找一种简洁的方法从不同胶质瘤细胞系中提取肿瘤干细胞。方法:将胶质瘤细胞以合适的密度接种于96孔板中,获取胶质瘤干细胞,并通过检测其自我更新能力、多向分化能力、成瘤能力及胶质瘤干细胞标记物的表达情况对其进行鉴定。结果:多种细胞系中均成功获取了胶质瘤干细胞。并且这细胞球表达神经干细胞的标志物,不袁达神经细胞分化标志物,同时又有多向分化的能力,仅5000个细胞就...
目的研究神经调节因子Neuregulin-1(Nrgl)对人胶质母细胞瘤U87-MG细胞中细胞黏附分子L1表达及细胞迁移的影响。方法给予U87-MG细胞重组Nrgl仅(rNrg1α,2.5nmo/l,)24和48h,RT-PCR观察L1 mRNA表达;给予细胞rNrg1α或rNrg1β(2.5nmol/L)48h,Western blot检测L1蛋白水平。用Nrg1 siRNA处理细胞,Western blot观察L1蛋白水平,用细胞划伤实验观察细胞迁移。结果Nrgld可促进L1mRNA表达;与0mmo/L组相比,Nrg1α及Nrg1β(2.5nm...
作者:南一楠 李娇 李澎涛 华茜 期刊:《中国中医急症》 2014年第05期
目的研究20(S)-原人参二醇(aPPD)诱导人胶质瘤细胞U87凋亡的分子生物学机制。方法采用MTS法检测不同浓度aPPD对U87细胞的抑制作用,并用免疫印迹法研究caspase3的激活情况。结果不同浓度的aPPD对U87细胞均有杀伤或抑制作用,免疫印迹结果显示pro—caspase3在aPPD作用时减少,cas—pase3底物PARP发现被切割,说明caspase3被激活。结论aPPD能通过激活caspase3的方式诱导U87细胞凋亡。
作者:刘彦彤 成凡 付慧 陈鹏 茹晓荣 期刊:《现代肿瘤医学》 2014年第10期
目的:研究银杏叶提取物EGB761对U87胶质瘤细胞的促凋亡作用。方法:EGB761干预U87胶质瘤细胞后,CCK-8观察50、100和200mg/L不同浓度EGB761作用下U87细胞的增殖状况,流式细胞仪分析用AnnexinV-FITC和PI双染检测不同浓度EGB761对U87胶质瘤细胞凋亡的影响。结果:EGB761可抑制U87胶质瘤细胞的增殖,呈浓度和时间依赖性反应;EGB761100mg/L、200mg/L干预U87胶质瘤细胞后,流式细胞仪检测显示细胞凋亡率明显升高( P〈0.05)。结论:...
作者:魏小于 杨美 任旭霞 李辉 陈玉琴 孙善全 期刊:《解剖学》 2015年第02期
目的:观察氧糖剥夺(OGD)后神经胶质瘤细胞U87中单羧酸转运蛋白(MCT)1、4的表达变化,探讨神经胶质瘤增殖、生长的分子机制.方法:体外培养的U87细胞随机分为对照组和模型组(OGD组),模型组每组干预1、3和6h.运用免疫荧光和免疫印迹观察MCT1、4的表达变化.结果:与对照组相比,模型组中MCT1、4的表达均增高,并随氧糖剥夺时间增长其表达逐渐增强.结论:U87中MCT1、4在氧糖剥夺后表达增强,提示MCT1、4可能参与神经胶质瘤微环境中...
作者:杨克凡 范丽霞 彭悦霞 王琴 陶亮 期刊:《中国药理学通报》 2015年第03期
目的:体外观察漆黄素对顺铂细胞毒性作用影响及其机制。方法 CCK-8法观察不同浓度漆黄素对人胶质瘤U87细胞的毒性;用细胞接种荧光示踪法测定不同浓度漆黄素对U87细胞缝隙连接( GJ )功能的影响;标准细胞集落形成分析法观察顺铂的毒性及漆黄素对顺铂毒性的影响;用Western blot法研究漆黄素在影响GJIC( GJ intercellular com-munication)功能浓度范围内对 Cx43表达的影响。结果CCK-8法显示漆黄素在小于1μmol·L-1的浓度范围内...
作者:李培栋 王新军 单峤 吴跃辉 王振 期刊:《中国免疫学》 2015年第06期
目的:本研究运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术特异性抑制肌动蛋白结合的细胞骨架蛋白Fascin1的表达,并探讨其对胶质瘤细胞U87 MG的侵袭和转移能力的影响及相关分子机制。方法:将针对Fascin1的小干扰RNA(Fascin1-si RNA)和阴性对照si RNA(Negative-si RNA)转染至人胶质瘤细胞株U87 MG中。实验分为3组:空白对照组(未转染的细胞)、阴性对照组(转染neg-si RNA的细胞)、实验组(转染Fascin1-si RNA的细胞)。用tran...