20湖北省八校高三第二次联考题的一道选择题中涉及到了生物学实验和研究中常用的两种技术方法——同位素标记法和荧光标记法。高中生物教材中对同位素标记法的介绍较为简略,荧光标记法仅仅是给出了相应的实验结果。通过归纳、整理教材中的相关内容,并对这两种方法的概念和基本原理进行拓展,以期许为教师讲评和学生备考提供理论依据和参考。
作者:刘特立; 刘辰; 夏雷; 郭晓轶; 蒋金泉; 朱华; 李囡; 王铁; 杨志 期刊:《中华核医学与分子影像》 2019年第12期
目的优化靶向前列腺特异膜抗原(PSMA)分子探针Al18F-PSMA-BCH(北京肿瘤医院)的标记方法,研究该探针进行临床试验及临床转化的可行性。方法将无载体的18F-加入到含有标记前体PSMA-BCH、AlCl3和邻苯二甲酸氢钾溶液的反应瓶中,震荡摇匀后110℃加热15 min,经Sep-Pak Light C18柱纯化和0.22μm微孔无菌滤膜过滤,制得Al18F-PSMA-BCH。测定其放化纯和体外稳定性;研究Al18F-PSMA-BCH在5名健康志愿者[年龄:(68±7)岁]体内的生物分布并估算吸收...
作者:徐仲杰; 涂亚辉; 邓晓军; 孙雯; 古淑青; 白少飞; 赵超敏; 罗勇 期刊:《化学试剂》 2019年第10期
以廉价易得的邻二甲苯-D10为标记前体,经过氧化、氯化、酯化3步反应,合成得到标题化合物。通过单因素方法对实验关键步骤进行优化,得到了较优的合成工艺,以消耗的标记试剂邻二甲苯-D10计算,标题化合物的总收率为75. 2%。采用高效液相色谱(HPLC)、质谱(MS)、核磁共振(NMR)进行了结构确认,色谱纯度>99. 0%,同位素丰度>99. 0%atom D。标题化合物可应用于食品中塑化剂残留的检测、人体中塑化剂代谢示踪、环境中塑化剂降解机理研究等领...
作者:潘世伟; 胡盛寿; 许建屏; 王巍; 王雪梅; 柳枫; 冯钧; 何卓祥; 苏文君 期刊:《中华胸心血管外科》 2010年第04期
目的 探讨采用首次通过法核素肺灌注显像、通过放射性时间-计数曲线方法了解瓣膜性心脏病合并有肺动脉高压(PH)手术前、后肺动脉压力的变化规律的价值.方法 115例二尖瓣病变为主的瓣膜性心脏病病人均行瓣膜置换或成形术治疗.所有病人在手术前,手术后7天行核素肺灌注显像检查,33例在术后3个月进行第3次复查.另选10名健康者,测其肺循环平均时间(LET)作为正常对照组.结果 与术前相比,术后7天LET明显降低(P〈0.001).33例术后3个...
作者:眭维国; 汤冬娥; 邹贵勉; 陈洁晶; 欧明林; 戴勇 期刊:《临床肾脏病》 2012年第07期
目的应用定量蛋白质组学技术对狼疮肾炎(LN)V型肾组织中的“全组”蛋白进行鉴定和定量分析,获得LNV型的蛋白质组差异表达图谱。方法对LNV型肾组织及对照组进行相对和绝对定量的同位素(isobaric tags for relative and absolute quantitation, iTRAQ)标记和ESI-OJTOF质谱仪鉴定。结果共鉴定490个蛋白质,其中差异倍数1.0以上的蛋白数113个,差异倍数1.2以上的蛋白数58个,差异倍数1.5以上的蛋白数18个,表达上调和下调的蛋...
作者:王阳梦; 何聪芬; 董银卯 期刊:《生物技术通报》 2005年第05期
随着后基因组时代的到来,蛋白质组研究日益受到密切关注.蛋白质组学的发展需要有先进的技术平台作支撑.除了蛋白质组研究中的三大核心技术-双向电泳、质谱和生物信息学技术,近几年又不断涌现出许多新技术.本文对同位素标记亲和标签、酵母双杂交、多维色谱-质谱联用等新技术作一概述.
作者:王菲; 胡春辉; 于浩 期刊:《中国生物工程》 2019年第07期
恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)KT2440中的6-羟基烟酸(6HNA)3-单加氧酶(NicC)是烟酸代谢过程中的关键酶。NicC通过在吡啶环上加羟基对吡啶环进行活化,从而使吡啶环可在双加氧酶催化下开环,最终被完全降解。通过去除NicC的N端稀有密码子增加了NicC的表达量,进一步利用Ni-Sepharose重力柱对NicC进行了纯化。通过实验发现,NicC的最适反应温度为30~40℃,最适反应pH为8.0。Cd2+对NicC的酶活有明显的抑制作用。当NADH的浓度为0.25mmol...
作者:应天翼; 王恒樑; 黄留玉; 黄翠芬 期刊:《生物技术通讯》 2005年第01期
蛋白质组学经历了近10年的发展,现在已经初具规模.但是由于它是动态地观察生物体不断变化的所有蛋白质,所以技术难度非常之大.为使研究简化并更具针对性,人们着重进行比较蛋白质组学的研究.为了具体量化这些蛋白质的变化产生了定量蛋白质组学,近几年各种标记技术的进步使得该学科得以迅猛发展.
作者:马欣; 魏亮; 唐美玲; 徐福利; 祝贞科; 葛体达; 吴金水 期刊:《环境科学》 2018年第12期
通过室内模拟培养实验,结合14C同位素标记技术,研究了不施肥(CK)、单施化肥(NPK)、秸秆还田+化肥(ST)这3种施肥处理下稻田耕层土壤有机碳矿化特征及其对添加外源葡萄糖的响应特征.结果表明,56 d培养实验结束时,CK处理土壤累积矿化率(土壤原有有机碳累积矿化量/土壤总有机碳含量)达到1. 64%,而NPK和ST处理较CK处理显著降低了0. 34%和0. 39%(P 〈0. 05),表明长期施肥对土壤碳有一定的固持作用.长期不同施肥处理土壤对添加...
在细胞分裂学习中,常以同位素标记法研究细胞的分裂过程,考查学生对细胞分裂过程的深层次理解,学生对此感到茫然,笔者在教学中用动态模型,呈现思维过程,使得思维过程显性化,化难为易。
作者:卜婷; 张川; 臧士明; 邵国强; 艾书跃; 高晓洁; 徐磊; 钱鑫宇; 杨魏巍; 邱樊; 俞飞; 张露露; 王峰 期刊:《中华核医学与分子影像》 2019年第02期
目的 探讨177Lu-前列腺特异膜抗原(PSMA)-617治疗转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)的安全性和有效性。 方法 前瞻性研究2017年8月至2018年9月在本院接受177Lu-PSMA-617治疗的11例mCRPC患者(平均年龄70.6岁),所有患者治疗前行68Ga-PSMA-11 PET/CT检查,以评估肿瘤放射性摄取。分别记录患者治疗前后血常规、肾功能和血清前列腺特异抗原(PSA)等指标。通过血常规及肾功能的变化评估治疗的安全性,通过治疗前后PSA水平的变化和68Ga-PSMA-1...
作者:刘辰; 刘特立; 杨志; 张宁; 杜鹏; 杨勇; 刘毅强; 王静; 严昆; 杨兴; 朱华; 李囡 期刊:《中华核医学与分子影像》 2019年第02期
作者:朱艳; 张伟; 张莉; 陈跃 期刊:《中华核医学与分子影像》 2019年第01期
作者:秦露平; 吕杰; 李名钊; 李建芳; 谢良骏; 查悦明; 蒋永泺; 程木华 期刊:《中华核医学与分子影像》 2019年第02期
作者:张露露; 邱樊; 张朋俊; 徐志宏; 卜婷; 臧士明; 艾书跃; 王峰 期刊:《中华核医学与分子影像》 2019年第11期
作者:哈斯来提阿依·买买提; 胡昕; 齐曼古力·吾守尔 期刊:《结核病与肺部健康》 2018年第03期
近几年,随着生物技术的发展,结核病诊断的研究重点逐渐转向能及时反映机体状态的血清蛋白质组学研究,并通过蛋白质组学技术发现结核病患者血清中的差异蛋白,为疾病早期诊断及鉴别诊断提供重要的理论依据。同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)结合二维液相色谱-串联质谱(2DL&MS/MS)技术因分离能力强、分析范围广、敏感度高、特异度高、检测限低等诸多优点,受研究人员关注并广泛使用。作者对基于iTRAQ-2DLC-MS/MS技术的结核...
作者:兰晓莉 期刊:《国际放射医学核医学》 2005年第01期
99Tcm在标记蛋白、核酸、多肽和抗体时,常采用双功能螯合剂作为偶联剂的间接标记法,以避免直接标记所带来的损伤.研究表明,近年来常用的两种螯合剂NHS-MAG3及HYNIC合成路线清晰,偶联及标记方法成熟,标记率、放化纯及比活度较高,为核素分子显像提供了必要的基础条件和广阔的临床应用前景.
作者:王喆; 汪静; 程时武; 李国权 期刊:《医学争鸣》 2004年第24期
目的: 研究一种125I直接标记RC-160的简便高效的方法,并观察125I-RC-160在正常小鼠体内的生物学分布特征.方法: 采用N-溴代琥珀酸亚胺(NBS)作为氧化剂,在RC-160定量的反应体系中加入不同量的125I 与NBS,探索标记的最佳反应比例;纯化后产物进行正常小鼠体内生物学分布检测.结果: 反应体系最佳比例为RC-160 ∶125I ∶NBS=10 μg ∶7.4 MBq ∶30 μg,标记率可达到76.9﹪,经Sep-Pak C18反相色谱柱纯化,放化纯达到95.7﹪;标记产物在血液...
作者:李亚梅; 关晏星; 陈学忠; 张青; 张庆; 章梦芝 期刊:《核技术》 2017年第12期
人类表皮生长因子受体2(Human Epidermal Growth Factor Receptor 2,HER-2)是乳腺癌最重要的致病基因。本文探讨131I标记的HER-2特异结合小分子模拟肽B2-S22-AFA对乳腺癌细胞的特异性杀伤作用。采用溴代琥珀酰亚胺法(N-Bromide Succinimide,NBS)进行131I标记B2-S22-AFA,测定标记率、放化纯度、稳定性及免疫活性。用Western Blot法和免疫组化法测定人乳腺癌SKBR3及MDA-MB-231Her-2细胞HER-2表达,观察不同浓度表皮生长因子(Epid...
作者:郑仁锦; 华永有; 林守二; 郑宓; 杨艳 期刊:《现代医药卫生》 2019年第16期
目的建立同位素标记-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定血清25-羟基维生素D 3的方法。方法样品经乙腈提取,饱和硫酸锌沉淀蛋白,然后用正己烷萃取,氮气吹干后85%甲醇定容上样,以0.1%甲醇水-0.1%甲酸水为流动相,经ACQUITY BEH C 18(1.7μm,2.1 mm×100 mm)色谱柱分离,采用多重反应监测正离子模式进行检测。结果该方法在1~100 ng/L内线性关系良好;检出限0.3ng/kg;3个水平加标回收率为92.9%~98.9%,日内相对标准偏差为3.2%~4.2%,日间相对...