作者:卢晶; 李奇; 朱晓蓉; 谢荣荣; 杨金奎 期刊:《首都医科大学学报》 2020年第01期
目的构建KCNH6基因肝脏细胞特异性敲除小鼠,并监测其肝脏血脂变化。方法运用Cas9技术构建KCNH6 flox/flox转基因小鼠,将其与肝脏细胞特异性表达Cre重组酶工具鼠(Alb-cre)进行杂交,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法鉴定基因型。监测基因敲除小鼠和同窝对照小鼠的体质量和进食量。分别检测8周和20周雌雄各两组小鼠的三酰甘油、胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇。结果成功构建KCNH6基因肝脏细胞...
作者:陈博雅; 张聪聪; 李玉琳; 王绿娅; 杜杰 期刊:《心肺血管病》 2018年第05期
目的:构建成纤维细胞特异敲除转录因子ATF3基因的小鼠模型。方法:利用胚胎显微注射法构建在ATF3基因携带loxP位点的小鼠(ATF3^fl/fl),以成纤维细胞细胞特异性表达的Col1a2-Cre介导ATF3条件性敲除,筛选出成纤维细胞条件性敲除ATF3的小鼠(Col1a2-ERCre:ATF3^fl/fl);取鼠尾DNA进行PCR鉴定基因型,腹腔注射他莫昔芬诱导该基因敲除;12只敲除小鼠和12只同窝野生型小鼠各分为心脏缺血再灌注(I/R)组和假手术(sham)组,术后2h取心...
作者:王德华; 陈米娜; 崔义元 期刊:《华西医学》 2008年第03期
目的:构建Shank3条件性敲除载体,最终用于构建Shank3条件性敲除小鼠。方法:用重组工程技术来快速高效地构建条件敲除载体。结果:成功构建得到Shank3条件性敲除载体。结论:重组工程技术是一个用于构建条件性敲除载体成熟而高效的方法。
作者:苏楠; 宋维威; 王建民; 宋瑞华; 刘志君; 苟元彬; 杜晓兰; 陈林 期刊:《医学分子生物学》 2005年第05期
目的构建成纤维细胞生长因子3型受体(fibroblast growth factor receptor-3,FGFR3)基因敲除载体,并对中靶ES细胞进行筛选与鉴定,为最终建立FGFR3条件性敲除小鼠模型或FGFR3功能减低小鼠,研究FGFR3在小鼠骨骼等器官发育、损伤修复过程中的作用打下基础.方法在分析小鼠fgfr3基因组DNA序列结构的基础上,设计并构建了针对小鼠fgfr3外显子9、10的条件性基因敲除载体,采用电穿孔法转染ES细胞,用G418与Gancyclovir对电转的ES细胞进行正负...
作者:王帅; 赖姨梅; 林艳; 李晓曦; 赵子建 期刊:《现代生物医学进展》 2017年第26期
目的:构建FKBP38(FK506 Binding Protein 38)基因肝脏特异敲除小鼠。方法:利用胚胎注射法构建在FKBP38上携带lox P位点的转基因小鼠。在FKBP38基因位置携带lox P位点的小鼠的基础上,以肝脏实质细胞特异性表达的Alb-Cre介导FKBP38条件性敲除,以获得FKBP38基因肝脏特异敲除小鼠模型Alb-Cre:FKBP38^fl/fl。同时对FKBP38特异性敲除鼠进行鉴定。结果:①FKBP38肝脏特异敲除小鼠FKBP38^-/-肝脏中FKBP38基因的m RNA水平相对于同年龄...
作者:潘耀谦 潘博 刘兴友 李瑞珍 岳军明 期刊:《生物化学与生物物理进展》 2014年第12期
为了研究Dicer及其所产生的miRNAs在血管平滑肌细胞 (VSMC)中的作用,本研究采用条件性基因打靶法敲除了小鼠VSMC中的Dicer外显子23,通过采用连续性剖检妊娠小鼠法、病理组织学、免疫荧光、PCR、Western blot和实时PCR等技术对条件性敲除Dicer(Dicer cKO)胚胎的血管病变和VSMC中的Dicer、miRNAs和信号转导通路蛋白变化进行了详细研究.结果发现,在培育条件性敲除Dicer小鼠的过程可产生三种不同基因型小鼠,即野生型、杂合型...