作者:刘媛; 张凤慧; 赵宏宇; 蔡禄 期刊:《江苏农业科学》 2017年第14期
基于影响核小体定位的DNA序列TA 10-bp周期性和R5Y5序列模体,设计6条对组蛋白亲和性不同的DNA序列,将其克隆到重组质粒中,分别命名为CS1-CS6。通过PCR扩增的方法,在引物上标记Cy3荧光信号分子,获得大量标有Cy3的目的序列;同时,从大肠杆菌中表达纯化了H2A、H2B、H3、H4共4种组蛋白,经复性装配成组蛋白八聚体,利用盐透析法将目的 DNA序列与组蛋白八聚体组装成核小体结构;经荧光信号检测,分析6条目的序列形成核小体的能力。结果发现,C...
作者:李梦芸 李光锋 杨华 黎子云 吴小平 饶力群 期刊:《湖南农业科学》 2015年第08期
为了研究DNA与DNA结合蛋白的相互作用,以及无细胞的染色质体外组装过程,从金柑叶片中提取总DNA,利用微晶纤维素得到DNA-纤维素层析配体,经DNA-纤维素层析分离得到DNA结合蛋白,再将纯化的DNA和DNA结合蛋白在低盐条件下按一定比例混合,并进行电镜观察。结表表明,该混合物产生絮状沉淀,电镜观察发现念珠状的小黑圆点,因此推测DNA和DNA结合蛋白发生互作,可能形成核小体引起染色质体外组装。