作者:郑剑锋; 杨峻; 李金平; 杨小洁; 邵文华; 秘思思 期刊:《实验与检验医学》 2020年第01期
目的检测肝细胞癌组织及肝癌细胞株中PAIP1的表达水平,并分析其表达水平与肝细胞癌的临床病理特征参数的关系。方法采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)、WB技术检测新鲜手术标本和肝癌细胞株的PAIP1的表达水平,采用免疫组化方法检测肝癌组织芯片PAIP1蛋白表达水平,比较肝癌组织和癌旁组织PAIP1的表达水平差异,在线工具分析肝癌数据库PAIP1的表达水平与病人临床病理参数的关联性。结果与癌旁组织相比,新鲜标本中癌组织PAIP1 mRNA的表达水...
作者:鲁莎; 席丽艳; 胡永轩 期刊:《皮肤性病诊疗学》 2014年第03期
目的:建立一种快速、稳定、灵敏且可定量的检测马尔尼菲青霉病的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法。方法:根据马尔尼菲青霉ITS序列,设计并合成引物,通过常规PCR扩增目标序列后,将鉴定正确的目的基因片段克隆入pGEM-T载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR标准曲线和溶解曲线,得出拷贝数与循环阈值之间的线性关系曲线表达式,并做灵敏性、特异性试验。...
作者:袁锦莹; 孙万成; 罗毅皓; 谢凤莲 期刊:《中国牛业科学》 2019年第01期
作者:王茜; 刘文秀; 高菲; 王兰 期刊:《水生生物学报》 2020年第01期
为研究苯酚胁迫下多刺裸腹溞(Moina macrocopa)相关基因的表达情况,筛选用于实时定量PCR分析的最佳内参基因。利用内参基因表达的cycle threshold(Ct值)非参数检验、GeNorm、NormFinder和Best-Keeper四种方法对β-actin、16S rRNA和12S rRNA进行分析,筛选出苯酚胁迫下多刺裸腹溞表达相对稳定的内参基因。结果显示,从Ct值初步判定不同浓度苯酚胁迫后,多刺裸腹溞体内β-actin、16S rRNA和12S rRNA均可稳定表达,且稳定性顺序为:16S rRNA...
作者:陈亨德; 褚武英; 李玉珑; 许友卿; 丁兆坤; 钟艺文; 王利香; 安晓玲 期刊:《江苏农业科学》 2019年第21期
作者:陈思; 李扬秋; 陈少华; 杨力建; 吴秀丽; 岑东芝 期刊:《广州医科大学学报》 2006年第04期
分析T细胞信号传导分子TCRξ链基因在B细胞-急性淋巴细胞白血病(B—ALL)病人外周血中的表达水平。方法:采用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR和相对定量检测15例初发B—ALIL、5例完全缓解期(CR)患者和30例正常人外周血的单个核细胞的TCRξ链表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,根据相对定量公式(2^△△Ct)分别计算B—ALL初发患者、CR期患者与正常人TCRξ链表达差异倍数等。结果:根据相对定量公式分析显示:与正常人相比,B...
作者:陈艳琳; 王颖芳 期刊:《广东药科大学学报》 2016年第05期
MicroRNA(miRNA)是一类由18-24 nt核酸构成的非编码内源性小分子RNA,主要参与真核生物的细胞分化、增殖与凋亡等转录后水平的基因表达调控。研究发现,miRNA与肿瘤、代谢调控、疾病发生及诊断等方面有密切的联系,因此准确且灵敏地进行miRNA的定量检测是深入研究miRNA功能的前提。目前,miRNA定量检测原理主要基于核酸杂交或扩增,包括Northern印迹、微阵列芯片、实时定量PCR、滚环扩增等。本文通过对传统miRNA检测方法、高灵敏度新...
作者:王思宁; 孙化雨; 徐浩; 杨意宏; 赵韩生; 高志民 期刊:《热带亚热带植物学报》 2018年第03期
为探究毛竹(Phyllostachys edulis)油菜素内酯(brassinolide,BL)受体激酶基因的分子特征和表达模式,采用生物信息学方法对毛竹中BL受体激酶基因进行了分析,并应用实时定量PCR技术对基因的表达模式进行了研究。结果表明,在毛竹基因组中共获得8条BL受体激酶基因同源序列(PeBRLs),分别属于4个亚家族。8个PeBRLs编码858-1 224氨基酸,分子量为92-130 kDa。PeBRLs结构相对保守,激酶区均具有BL受体激酶特有的3个保守结构域;除PeBRL1...
据《每日科学》网报道,瑞典和芬兰的研究人员建立了一种新型食品检测方式,可快速、精确地对食物携带的病菌进行探查.这将为食品安全的监督提供有效帮助。相关在近期出版的《应用与环境微生物学》期刊上。研究人员利用TaqMan探针实时定量PCR(聚合酶链反应)法对食物中的小肠结肠炎耶尔森氏菌进行探查.并通过多种方式对探测结果进行检验.如利用此法对人工培植的含有相关病菌的牛奶、碎肉、冷熏肉、鱼和胡萝卜等样本进行检测....
作者:崔会婷; 王珍; 张铁军; 蒋旭; 龙瑞才; 杨青川; 康俊梅 期刊:《中国草地学报》 2018年第05期
分析了豆科模式植物蒺藜苜蓿中MtCYP450的表达特性和对胁迫处理的反应。该基因编码508个氨基酸,蛋白分子量为58.31kDa,等电点为6.85。序列比对发现MtCYP450与狭叶羽扇豆和大豆中的2个CYP450家族94亚家族蛋白同源性较高,因此,MtCYP450属于细胞色素P450的CYP94亚家族。荧光定量PCR结果显示MtCYP450在叶中表达最高,茎中次之,根中最少。在胁迫处理(200mM NaCl、5%PEG、100μM ABA和100μM MeJA)8~12h后,叶片中MtCYP450基因表达量显著上...
作者:任金海; 罗建民; 杨敬慈; 杜行严; 姚丽; 尚银涛; 刘小军 期刊:《中华血液学》 2007年第12期
SHIP(SH2 domain containing inositol 5’-phosphatase)基因位于人类染色体2q36-37.1,广泛表达于造血细胞。SHIP基因敲除小鼠可表现出骨髓细胞的高度增生。SHIP可特异地清除磷脂酰肌醇3激酶(P13K)代谢产物P1P3,从而抑制其下游信号分子AKT的磷酸化。这些研究表明,SHIP可能作为潜在的肿瘤抑制基因对造血细胞的发生、发展及功能起着关键的负调控作用。我们应用实时定量PCR的方法检测T、B及髓系白血病细胞中SHIP基因的表达,...
作者:王治平; 赵建江; 韩久松; 邱小玲; 盘杰; 陈军 期刊:《口腔疾病防治》 2012年第04期
目的观察叉状头转录因子P3(forkhead box P3 transcription factor,Foxp3)基因在4-亚基硝氧喹啉(4-ni-troquinoline-1-oxid,4NQO)诱发大鼠舌黏膜癌变过程中转录水平的动态变化,探讨其在大鼠舌黏膜癌变中的作用。方法应用本课题组前期实验获得的4NQO诱发的大鼠舌黏膜癌变标本24例,包括正常黏膜组织(正常对照组)、异常增生组织(异常增生组)、鳞状细胞癌组织(鳞癌组)各8例,采用实时荧光定量PCR技术检测Foxp3mRNA表达水平,并...
作者:殷继明; 严艳; 李卓; 张华; 牛京勤; 闫妙娥; 柳馨 期刊:《中国妇幼保健》 2012年第01期
目的:检测乙肝病毒血清学标志物阳性产妇血清、乳汁及其新生儿脐带血中HBV DNA含量,指导哺乳,减少母婴传播。方法:用荧光定量PCR法检测产妇血清、乳汁和新生儿脐带血中HBV DNA含量。结果:血清高病毒血症组(≥10^8copies/ml)产妇初乳和新生儿脐血HBV DNA阳性率明显高于其他组。同时与血清HBeAg存在显著相关,血清HBeAg阳性组中产妇自身HBV DNA阳性率明显高于HBeAg阴性组,在初乳和脐血中的HBV DNA也有差异。结论:乙肝病毒...
作者:徐可树; 钟少平; 邹丽; 李秀娟(编校) 期刊:《中国妇幼保健》 2006年第08期
目的:研究不同浓度leptin对人早孕期滋养细胞表达CXCR4、MMP9及VEGF的影响。方法:分离、培养早孕期滋养细胞,并添加不同浓度的leptin,培养24h后,RT-PCR法检测滋养细胞中CXCR4、MMP9及VEGF mRNA表达水平的变化。结果:添加了Leptin的滋养细胞表达CXCR4、MMP9及VEGF mRNA的量较空白对照组明显增加(P〈0.01),其中,当Leptin剂量达到500ng/ml时,CXCR4 mRNA2倍增加、MMP9及VEGF mRNA均5倍增加。结论:Leptin能增强滋养细胞分...
作者:原丽; 郭小姝; 解瑞; 刘晓杰; 李清山; 刘燕; 张翠英 期刊:《中外医疗》 2014年第29期
目的比较不同浓度染料木黄酮Genistein对痴呆模型大鼠认知功能的影响,并探讨可能的分子机制。方法 50只SD大鼠随机分为对照组、DMSO组、Aβ1-40模型组、2.0 mg/kg和20.0 mg/kg Genistein治疗组。对照组,DMSO组侧脑室注射0.9%生理盐水,其余3组侧脑室注射Aβ1-42制备阿尔茨海默病(AD)痴呆模型大鼠,1周后,不同剂量Genistein治疗组分别用2.0 mg/kg和20.0 mg/kg Genistein灌胃,DMSO组则用0.5%DMSO溶剂灌胃,对照组与Aβ1-40组分别用0.5%生...
作者:陈向军; 余滋中; 李国义 期刊:《中国现代医生》 2008年第35期
目的分析血浆EB病毒DNA定量测定对鼻咽癌的诊断价值。方法收集2007年2月-2008年5月在本院确诊的初诊鼻咽癌患者45例以及健康对照者45例,分别采集血浆标本,应用Real—timePCR方法检测EB病毒DNA含量,比较健康者和初诊鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA拷贝含量水平的差异。结果鼻咽癌患者血浆EBV—DNA阳性率和复制量均高于健康对照者。两组阳性率和中位浓度的比较均有统计学差异。结论血浆EB病毒DNA定量检测是一种敏感而可靠的实验方法,对...
在植物基因表达分析上,反转录实时定量PCR被广泛应用于基因综合表达分析、基因家族表达分析、基因差异表达分析、转基因表达分析等领域。
作者:张梦竹; 于磊; 王睿; 李元志 期刊:《环境工程学报》 2019年第09期
针对实际污水处理厂提标改造过程中运行参数变化对运行效果产生影响机制不明确的问题,选取以Orbal氧化沟为核心工艺的某实际污水处理厂,设置2种运行模式,采用PCR-DGGE分析、实时荧光定量PCR分析、酶活性分析等方法研究了不同运行模式下活性污泥中微生物种群结构、功能微生物含量、关键酶活性的特征;分析了微生物种群、关键酶活性与污染物去除率之间的关系;探讨了Orbal氧化沟工艺中运行参数变化对运行效果产生影响的机制。结果表明:...
作者:王艳秋; 张紫璇; 高旭; 李卓昕; 王关琪; 刘晋宇; 鲁承; 梁晚枫; 于龙政; 王妍 期刊:《中国兽医学报》 2018年第06期
为了建立一种能定量检测鹅细小病毒(GPV)的荧光定量PCR方法,根据GenBank已收录GPVVP3基因保守区设计1对特异引物和TaqMan探针,经反应条件优化、标准曲线建立,以及敏感性、特异性和重复性试验。结果显示,该方法在10^7~10^2拷贝/μL具有良好的线性关系(R^2=0.999);灵敏度是普通PCR方法的100倍;对其他3种常见禽病毒无特异性扩增,具有较好的特异性;组内与组间的变异系数均小于2%,具有良好的重复性。对临床20份疑似GPV感...
作者:董婧; 刘永胜; 唐维 期刊:《应用与环境生物学报》 2018年第02期
为了解中华猕猴桃(Actinidia chinensis Planch)不同品种果实挥发性香气成分差异及其相关生物合成基因的表达模式,采用顶空-固相微萃取结合气相色谱-质谱仪(Head Space-Solid Phase Micro Extraction/Gas Chromatography-Mass Spectrometry,HS-SPME/GC-MS)方法,分析6个品种(‘翠玉’、‘金桃’、‘金艳’、‘楚红’、‘东红’、‘西选2号’)成熟果实的挥发性香气成分组成,并通过实时定量PCR(RT-qPCR)检测醇酰基转移酶...