作者:冯永巍; 于丽洪; 杨成 期刊:《食品安全质量检测学报》 2019年第23期
目的开发一种基于纳米金粒子快速比色的猪源性成分快速检测方法。方法选取猪线粒体基因中特异性DN段为靶点,利用互补单链DNA与纳米金粒子偶联为探针,提取检测目标DNA后在盐溶液中进行检测。结果探针上DNA结合检测目标后,纳米金粒子失去单链DNA的保护,发生聚集,由红色变为蓝色,实现裸眼可视检测。核酸偶联的最佳用量为0.1mmol/L的核酸添加30μL,方法的检出限为5%。结论这种比色检测可以在不使用复杂仪器的条件下将猪肉与其牛肉类产品...
作者:李盈诺; 王艳双; 苑广信; 孙丽媛; 艾金霞; 冯源; 李明成; 张丽华 期刊:《食品工业科技》 2019年第24期
目的:基于动物线粒体cytb基因的多态性位点,建立一种特异性多重PCR体系检测牛肉、猪肉和鸡肉的方法。方法:提取肉类的基因组DNA,利用不同物种mtDNA cytb基因序列的SNP位点的差异,设计特异性引物。进行多重PCR扩增,利用扩增产物片段大小不同,检测牛肉中常见的掺假动物源性成分。通过灵敏性试验,确定最低检测量。结果:实验设计的引物特异性良好,在同一反应体系中,在同一退火温度52℃条件下,牛肉DNA扩增后产生149 bp的特异性条带,猪肉...
作者:李志娟; 苗丽; 王珊 期刊:《肉类工业》 2015年第06期
根据甲鱼线粒体细胞色素 b 基因中的保守区域设计甲鱼特异性引物及 TaqMan 探针,建立一种用于定性检测甲鱼的实时荧光 PCR 方法。结果表明,所建立的方法与其他肉源性成分均无交叉反应,证明本研究所设计的引物与探针对甲鱼成分特异性检测良好,最低检出浓度为0.005ng/μL。应用本方法对市售含有甲鱼成分的商品进行检测,发现假冒甲鱼肉的商品确实存在。结论:本研究所建立的方法特异性强,灵敏度高,可用于对肉制品中甲鱼成分的...
作者:曲超; 牛琳茹; 陶翠 期刊:《中国农村科技》 2019年第06期
当前,我国肉类食品安全风险仍然存在,以科技创新驱动食品安全水平提升已成为各方共识。我国对肉类食品安全问题高度重视,不断强化食品安全保障工作,不懈构建肉类食品从餐桌到牧场的溯源技术体系,加大在肉类食品加工、生产、储运以及分销过程中的科技投入,在溯源技术体系建设、检测方法开发等方面成绩显著。从餐桌到牧场溯源技术体系不断完善.
作者:石盼盼; 李旭; 魏法山; 谢文佳 期刊:《食品与生物技术学报》 2017年第07期
针对GeneBank中公布的牛羊猪鸡鸭线粒体细胞色素氧化酶亚基基因的特异性序列设计引物,建立了肉样的5种常见牛羊猪鸡鸭动物源性成分检测的PCR电泳法体系。采用大连宝生物的猪源牛源羊源鸡源性成分检测试剂盒和广州迪奥生物的鸭源性成分检测试剂盒,利用实时荧光PCR检测体系对河南省范围内几个大型超市的118批次牛肉样品的5种即猪牛羊鸡鸭动物源性成分进行了检测。结果显示:牛源性成分检出117批次检出率99.15%,猪源性成分检出10批次检...
作者:薛晨玉; 宋丽萍; 路勇; 赵琳娜; 王丹; 杨红莲; 郭淼; 杨昕霆; 胡智恺 期刊:《食品工业科技》 2014年第17期
为实现羊肉中鸡源性成分的量化检测,本文利用实时荧光PCR技术,通过在单拷贝基因上设计引物,DNA标准曲线绘制以及确定羊肉,鸡肉质量与DNA数学换算参数等方法,对四种不同掺混比例的鸡肉、猪肉混合样本掺混的质量百分比进行分析。结果显示,检测百分比与理论混合百分比间的绝对误差控制在5%以内,量化研究结果准确,该法为食品安全检测工作提供了技术支撑。
作者:陈晨; 张岩; 李永波; 李鹏; 李永艳; 张涛; 张薇; 周巍; 张志胜 期刊:《现代食品科技》 2018年第01期
为了实现肉制品中羊肉和猪肉的量化研究,本文应用微滴式数字PCR对肉制品进行定量检测。通过在看家基因上设计单拷贝特异性引物,能更好的鉴别是人为因素的掺假还是在加工过程中无意的带入。根据dd PCR的结果显示,在一定范围肉质量和DNA的浓度,DNA浓度和DNA拷贝数(C)成现一定的线性关系。通过人为掺假及市售样品检测以验证此方法。以DNA浓度作为中间换算值,得到肉质量和DNA拷贝数之间的换算关系M_羊=0.12C-10.6 M_猪=0.07C+4。通...
作者:任秀; 仝伟建; 骆海朋; 谢冠东; 陈怡文; 刘娜; 李佳铱; 余文; 崔生辉 期刊:《食品安全质量检测学报》 2017年第07期
目的建立生鲜肉中猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分的DNA测序鉴别方法,并对采集自北京各地区生鲜肉品进行检测验证。方法合成动物线粒体上12S rRNA、cytochrome b、cytochrome c oxidase基因引物,建立猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分的DNA测序鉴别方法,并对50份猪、牛、羊、鸡、鸭肉品进行检测。结果使用线粒体上12S rRNA、cytochrome b、cytochrome c oxidase基因引物对猪、牛、羊、鸡、鸭肉品进行扩增,分别获得456、400和710 bp大小的DN段...
作者:李家鹏; 周彤; 李金春; 乔晓玲; 黄鑫; 陈曦; 杨君娜; 郭雅 期刊:《食品科学》 2017年第12期
为实现肉及肉制品掺假快速鉴别,分别以猪、牛线粒体DNA的COXⅠ,绵羊、山羊、狗、狐狸、貉线粒体DNA的16SrRNA及鸡、鸭线粒体DNA的12SrRNA基因为靶位点,设计扩增产物熔解温度(Tm值)具有显著性差异的特异性引物,建立一种用于快速鉴别肉或肉制品中猪、牛、绵羊、山羊、鸡、鸭、狗、狐、貉9种源性成分的5重实时荧光聚合酶链式反应熔解曲线分析方法,通过特异性、灵敏度及市售样品的检测,对该方法进行检验和评价。结果表明:方法...
作者:王守云; 袁明美; 封聪; 冯雪松; 姜泓 期刊:《肉类研究》 2017年第04期
随着现代分析检测技术的发展,肉类掺假鉴别技术也得到了长足的发展,主要包括感官鉴定技术、酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)技术、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术及生物质谱技术等。在这些技术中,感官鉴定技术操作简单,但准确度还有待改进。ELISA技术已有商品化试剂盒,由于受蛋白活性的影响,使其应用范围受到限制。PCR技术具有检测灵敏度高、结果重复性好等优势,但操作繁琐耗时。...
作者:王琳; 王雪; 宋云飞 期刊:《科技资讯》 2015年第33期
目的建立检测肉类食品安全的快速检测方法。方法使用快速检测试纸检测肉类掺假,以及肉类中残留的盐酸克伦特罗、莱克多巴胺与沙丁胺醇。结果使用猪肉检测快速检测试纸,检测羊肉中掺加的猪肉,掺加猪肉的比例为0.75%~25%,可以检出。使用胶体金检测仪结合快速检测试纸,检测肉类中添加的盐酸克伦特罗、莱克多巴胺与沙丁胺醇,盐酸克伦特罗的平均添加回收率在110%左右,莱克多巴胺的平均添加回收率为90%~120%,沙丁胺醇的平均添加回收率在1...
作者:周彤 李家鹏 田寒友 杨君娜 邹昊 乔晓玲 期刊:《肉类研究》 2013年第12期
为了建立一种基于实时荧光聚合酶链式反应的肉及肉制品猪源性成分含量测定方法,分别以猪线粒体DNA的NADH4基因和16S rRNA基因为靶位点设计猪特异性引物、探针和通用引物、探针,建立猪源性成分含量测定方法,通过特异性、灵敏性、线性、准确度及市售肉制品检测,对该方法体系进行检验和评价.结果表明:建立的猪源性成分含量实时荧光聚合酶链式反应测定方法体系具有良好的特异性及灵敏性,最低可检测到0.4pg/μL纯猪肉DNA;无论是猪特异性...
作者:张驰 邱皓璞 张筠 期刊:《食品科学》 2013年第18期
根据鸭线粒体基因组细胞色素b基因中的保守序列设计鸭特异性引物和TaqMan探针,建立肉制品中鸭源性成分定性和定量检测的荧光定量PCR技术。结果表明,引物与探针对于鸭源性成分的特异性良好,检测灵敏度达到1.78pg/反应,该方法可对鸭肌肉组织DNA进行准确定量。使用该技术对市售肉制品进行检测,发现大量使用鸭肉假冒的牛羊肉制品。本研究建立的鸭源性成分荧光定量PCR检测方法,为肉制品质量控制提供了有效的技术手段。
作者:李宗梦 赵良娟 王永芳 张宏伟 期刊:《食品安全质量检测学报》 2015年第02期
2013年初随着欧洲"马肉丑闻"这一食品安全事件的发生,食品掺假这一全球性问题引发了公众对食品安全的担忧以及各国政府的关注。用于食品真伪鉴别的分子生物学技术包括经典的普通PCR技术、实时定量PCR技术,以及近年来逐步发展起来的分子指纹技术等。此外,基因芯片技术、多重PCR技术等可提高检测通量的新型技术近年来也得到了长足发展。随着分子生物学技术向着高灵敏度、高通量的方向发展的同时,用于样品初筛的具有较高灵敏度和准确...