作者:王霓; 邵林楠; 周世航; 张力; 于卫建; 梁晓华 期刊:《中国输血》 2019年第08期
目的对大连地区152例RhD阴性血孕妇的RHD基因进行分型,并分析不同RHD基因型的Rh C、c、E和e表型分布特征。方法用PCR-SSP法对孕妇的RHD基因进行分型;分别应用单克隆抗-C、抗-c、抗-E和抗-e鉴定孕妇的Rh表型。结果共发现105例RHD全缺失型,以ccee表型(85.7%)为主;19例RHD 1227A纯合型,以Ccee表型(78.9%)为主;14例RHD-CE(2-9)-D2型,均为Ccee表型;6例弱D15型,均有c和E抗原;4例RHD 1227A杂合型,均有C和e抗原;4例用此PCR-SSP法无法判断分...
作者:吴丽娜; 解金辉; 安仕萍; 李双玉 期刊:《山东医药》 2019年第36期
目的对20例份血清学弱D表型(SWDP)抗凝血液标本进行RHD基因型检测。方法20例份受检抗凝血液标本,均经盐水介质法、间接抗球蛋白法鉴定为SWDP。采用SSP-PCR法进行RHD基因型检测,如不能确定基因型则采用DNA序列分析技术(SBT)进行基因测序。结果20例份SWDP抗凝血液标本中,弱D15型RHD等位基因12例份、部分D型RHD等位基因6例份[DⅥⅢ型5例份、DVA(Hus)型1例份]、DEL型RHD等位基因1例份(1227 G>A),1例份未能确定基因型。未能确定基因型的...
作者:周一炎; 秦建江 期刊:《中国现代医学》 2005年第07期
目的采用序列特异性引物PCR技术(PCR-SSP)进行RHD基因定型.方法采用新近报道的PCR-SSP RHD定型方法检测10例RhD阳性个体,包括2例哈萨克族人、2例蒙古族人、2例藏族人和4例维吾尔族人,以及11例RhD阴性个体(汉族10例、维吾尔族人1例),并通过测序和内含子检测分析1例汉族个体的RHD基因型.结果全部样品的PCR-SSP检测结果与血清学表型相符,1例汉族RhD阴性个体鉴定为D放散型,携带RHD1227A等位基因,1例个体的检测结果提示携带融合RHD基因....
作者:谢敬文; 阮丽芬; 蓝文莉; 马伟文 期刊:《检验医学与临床》 2019年第15期
目的对番禺地区RhD阴性的孕妇进行RHD基因分型以及产后追踪,为临床制订科学、合理的预防策略提供科学依据。方法收集2016年1月至2018年6月番禺地区RhD阴性孕产妇标本40例,用间接抗人球蛋白试管法进行RhD阴性确认,用吸收放散试验进行放散D筛查,用PCR-SSP方法进行RHD基因分型。结果经鉴定40例均为RhD阴性,吸收放散试验鉴定9例为放散D表型(Del),占比22.5%。对40例标本进行基因分型检测,24例为RHD基因全缺失型,占比60.0%;9例为RHD1227A...
作者:王霓; 周世航; 邵林楠; 于卫建; 张开立; 刘铭 期刊:《中国输血》 2018年第09期
目的建立用于RHD 1227G〉A基因分型的熔解曲线分析法。方法设计合成RHD 1227G〉A等位基因特异性引物和公共引物,并在2条等位基因特异性引物5'端加上不同长度的GC序列。在实时PCR反应后,进行熔解曲线分析,依据PCR产物熔解温度的差异,对RHD 1227G〉A基因分型。将建立的熔解曲线分析法与常规的PCRSSP法比较。对于2种方法检测结果不符的标本,进行RHD基因第9外显子测序,确定该标本为RHD 1227G〉A基因型。结果应用熔解曲线分析法对84例...
作者:苗燕平; 周小英; 熊莉; 何华庆; 李国良; 孙瑜 期刊:《实验与检验医学》 2019年第01期
目的调查江西地区RhD表型确认为阴性者的RhCcEe表型与RHD基因型间的关系,确认RHD基因的外显子模式对RhCcEe抗原表达的影响。方法血清学直接凝集法检测D、C、c、E、e抗原,间接抗人球蛋白试验(IAT)确认RhD阴性血型,对IAT确认为RhD抗原阴性的样本,随机抽取111例,使用PCR-SSP法行RHD基因分型。结果464例标本中,确认为RhD阴性者451例(97.1983%),RhD变异性13例(2.8017%),111例确认RhD阴性的标本中,共检出六种RHD基因型,包括RHD(-)5例,RHD...
作者:姜侠; 韩梅宁; 徐华; 季延红 期刊:《中国输血》 2017年第10期
目的检测Del型RHD基因启动子区是否存在多态性。方法对32例Del型样本RHD基因编码区10个外显子扩增并测序;对样本RHD基因启动子区-1--1 246 bp内的4个多态性位点进行检测;对RHD基因启动子区+3--1138扩增并测序。结果 32例Del型样本均携带完整的RHD基因,并且均为RHD基因1227位点G〉A的突变;所有样本均检测到4个多态性位点;RHD基因启动子区+3--1138测序未发现突变位点。结论 Del型RHD基因启动子区序列与正常基因一致,未发现新的突变...
作者:韦喜敢; 周建月; 周吉成 期刊:《中国实验诊断学》 2010年第08期
目的观察中国人RhD和RhCE基因,研究RhD阴性的基因机制。方法采用PCR—SSP技术,检测了100例血清学试验RhD阳性,15例RhD阴性者的D外显子和RhCE基因。结果RhD阳性者D基因无缺失,RhD阴性者D基因有完全缺失,部分缺失和无缺失3种类型。结论中国人R11血型基因有多态性,在临床中具重要意义。
我们对RhD(-)个体采用PCR技术检测RHD基因8个外显子及1个内含子,将RhD(-)者分成三类:RHD基因完全缺失型,RHD基因部分缺失型及RHD基因正常存在型.目的对中国汉族RhD(-)者RHD基因多态性,以及Del(弱D)的形成、Du(D变异型)进行研究.据不完全统计,国内对RhD(-)、Del表型、Du型和RHD基因检测有7篇[1-7]报道.现将中国汉族RhD(-)个体的D基因结构情况综述如下.
作者:邵超鹏; 熊文; 周一炎; 安万新; 刘辉; 李雪梅 期刊:《中国输血》 2004年第05期
目的探讨RHD基因转录后是否存在因替代拼接形成不同形式的mRNA.方法采用逆转录PCR(RT-PCR)技术检测4名不同Rh表型(CcDDEe、CCDDee、CcDDee和ccDdee)个体的RhD mRNA,然后进行cDNA测序分析.结果不同Rh表型的个体有相同的和复杂的RhD mRNA形式,均存在正常形式的RhD mRNA,以及缺失第7、第9、第7和9、第7~9外显子共5种形式的RHD转录子,这些缺失外显子的转录子的其余序列与正常RhD mRNA完全一致,显示RHD基因转录后存在替代剪切机制,且发...
作者:叶健忠; 杨向萍; 蔡于旭; 唐秋萍 期刊:《中国输血》 2005年第02期
目的探讨海南汉族Rh阴性献血者的RHD基因结构,为建立适合本群体的正确的RHD基因定型方法提供依据.方法采用常规盐水法和抗球蛋白法筛选RhD阴性献血者,通过吸收放散试验确定其中RhDel,并采用PCR-SSP技术分析其RHD基因存在情况,对存在全部外显子的个体进一步检测RHD内含子2、10和RHDψ假基因.结果筛选获得的106名RhD阴性个体中,31例(29.25%)为RhDel,存在完整RHD基因;剩下75例中,67例(63.21%)完全缺失RHD基因,8例缺失部分RHD基因;存在...
作者:邵超鹏; 何春辉 期刊:《中国实验血液学》 2005年第02期
RHD基因下游包括3'-端非编码区、下游Rh盒子和SMP1基因等,3'-端非编码区的具体序列目前尚不清楚.本研究目的旨在测定3'非编码区序列.根据最近的文献报道和EMBL/GenBank/DDBJ记录的基因序列,设计1对引物,建立聚合酶链式反应(PCR)方法,特异性扩增10名Rh阳性表型和10名D放散型(Del)表型个体的DNA样品的RHD基因3'-端非编码区全长序列,PCR产物纯化后进行直接测序.结果表明:10份Rh阳性和10份Del DNA样品的测定结果完全一样,显示RHD基因终...
作者:严力行; 许先国; 朱发明; 何吉 期刊:《中国实验血液学》 2005年第03期
本研究目的在于克隆人类红细胞RHD基因,构建RhD表达载体,观察其在K562细胞中的表达.从脐血网织红细胞中提取总RNA,采用逆转录聚合酶链反应扩增RHD/CE基因,扩增产物通过TA连接克隆到pGEM-T质粒,采用测序方法筛选多个克隆获得RHD基因.将获得的RHD基因进一步亚克隆构建p cDNA3.1(-)表达载体,重组表达载体通过superfect试剂盒转染K562细胞,最后观察K562细胞中RHD基因的转录和表达.结果表明:成功分离克隆到RHD基因,构建的p cDNA3.1(-)重...
作者:梁延连; 张印则; 苏宇清; 吴凡; 李大成; 徐华; 周华友 期刊:《中国输血》 2016年第08期
目的探讨建立的RhDmRNA剪接体多态性检测技术的有效性与实用性。方法采用设计的两对引物扩增全长RhDmRNA外显子,完全避开RHCE基因的干扰,特异性扩增并分析了随机选取的非血缘关系50例标本的RhDmRNA剪接情况。结果两对引物能扩增RhDmRNA剪接体的全长外显子基因并分析出RHD基因剪接体的多态性,扩增出4种剪接体的特异性:exon-1-3扩增产物:415bp;exon-3-10扩增产物均由3种不同组合构成:产物一:约880bp,产物二:约750bp;产物...
Rh血型是输血医学重要的血型系统,中国人中绝大多数为Rh阳性,Rh阴性人约占人口0.4%,属稀有血型,在临床应急用血时,常不能满足需要,随着医学科学的发展,Rh阴性用血量也逐年增加,为了满足临床用血需要和深入研究Rh血型的基因结构,管理好Rh阴性献血员是血站的一项重要工作。
作者:周华友; 白旭华; 张印则; 王从容; 曹琼; 兰炯采 期刊:《中华医学遗传学》 2006年第02期
目的对比研究中国汉族和新疆维吾尔族随机非血缘关系RhD阴性个体RHD基因结构。方法采用序列特异性引物.聚合酶链反应方法检测RHD基因的上、下游和杂交的Rhesus盒,以及RHD基因的10个外显子。结果RhD阴性个体RHD基因型检测结果显示,新疆维吾尔族人与同组汉族人RHD^-/RHD^-基因型组差异有统计学意义(94.44%vs61.40%,P〈0.01),两者与RHD^+/RHD^-基因型组(该组代表RHD单基因组)比较差异有统计学意义(2.78%vs34.21...
作者:王学东(综述); 王保龙(审校) 期刊:《国际输血及血液学》 2007年第06期
Rh血型系统在临床输血、新生儿溶血病和自身免疫性溶血性贫血中具有重要意义。本文就Rh血型基因结构、表型、基因分型及Rh血型系统在临床输血和新生儿溶血病中的应用等最新研究进展作一综述。
作者:兰炯采; 周华友; 吴穗元; 白旭华; 王晓珠 期刊:《现代免疫学》 2007年第03期
研究中国人RHD基因相关结构区的特征.采用PCR-SSP技术对随机非血缘关系RhD阳性样本100例,RhD阴性样本228例和Del样本42例的RHD基因的Rhesus盒、启动子区、第4内含子、Ψ假基因、第9外显子1227G>A突变点研究.结果:存在RHD基因序列的样本(RHD^+/RHD^+,RHD^+/RHD^-)可测出启动子区3个多态性位点,有第4外显子者均有第4内含子,所有样本都检查不到RHDΨ,34/42例Del样本可检测到1227G>A突变点.中国人RHD基因相关结构区有丰富的遗传...
作者:孙国栋; 段现民; 尹志柱; 张彦平; 牛小利; 赵有良; 牛海江; 刘冀华; 刘芳兰; 赵凤萍; 王晓平 期刊:《中国输血》 2007年第02期
目的探讨汉族人群非血缘关系Rh(D)抗原弱阳性个体的血清学表型及分子遗传机制。方法采用常规血清学技术从非血缘关系随机献血者中筛检Rh(D)抗原弱阳性个体(包括弱D型、部分D型),对其进行Rh D、C、c、E、e抗原表型的检测;采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法同时检测其RHD基因和RHCE基因;测序分析RHD基因全长编码区序列;同时通过特异性PCR技术测定其RHD合子型。结果血清学试验证实为D抗原弱阳性表型的有32例个体,...
作者:王芳; 吴俊杰; 朱发明; 严力行 期刊:《中国输血》 2006年第06期
目的了解浙江汉族人群RHD基因合子型多态性情况。方法采用PCR-SSP方法检测438例RhD阳性、弱D表现型、RhD阴性表型个体的RHD基因上、下游盒和杂交盒,根据个体盒子的检测结果推测其合子型。结果198例RhD阳性样本中12例(6.06%)为RHD^+/RHD^-型.其余186例(93.94%)为RHD^+/RHD^+型;32例弱D表现型样本中29例(90.63%)为RHD^+/RHD^-型,3例(9.37%)为RHD^+/RHD^+型;208例RhD阴性样本中53例(25.48CA)为RHD^...