作者:邵鸣杰; 傅红兴; 贾光伟; 徐艳艳; 邱凯燕; 吴正洁 期刊:《当代化工研究》 2015年第06期
目的介绍一种大鼠胰腺微血管铸型的方法,并对其形态进行了扫描电镜等方法考察。方法取成年SD大鼠,采用逆行腹主动脉灌注聚甲基甲酸甲酯溶液铸型,并用SDS溶液去除胰腺细胞和氢氧化钠溶液去除被膜和血管壁等组织,冷冻干燥后喷金进行扫描电镜观察胰腺的微血管形态。结果扫描电镜结果显示大鼠胰腺内血管在铸型后显露清晰,血管网密集,胰腺内毛细血管通常由一动脉形成多个分支和多个出芽,毛细血管网相互交通,直径3-5μm。结论本方...
作者:崔彬; 刘迎龙; 谢宁; 于存涛; 宋来凤 期刊:《中华胸心血管外科》 2004年第03期
目的构建去细胞组织工程同种心脏瓣膜,对比研究同种心脏瓣膜去细胞前后的生物学特征.方法取液氮保存的人同种主动脉带瓣管道,采用低渗液-去污剂(1% DOA)-核酸酶去细胞法,测定去细胞前后组织学、组织厚度、组织含水量、热皱缩温度、组织基因组DNA 含量、胶原蛋白含量.结果同种心脏瓣膜、管壁及肌肉组织中去除所有细胞成分,保留了完整的细胞外基质.与去细胞前相比,管壁组织的含水量[(75.44±1.84)%对(82.05±0.71)%,P<0.05]明显增加,...
作者:许扬滨; 胡军; 江长青; 杨光诗; 朱家恺; 刘小林 期刊:《中华显微外科》 2005年第02期
目的评价用自体源骨髓间充质干细胞(MSCs)或许旺细胞(SCs)作种子细胞,与去细胞同种异体神经构建的组织工程化外周神经修复猕猴尺神经4 cm缺损的实验效果,为临床研究提供资料.方法分别用4种移植物桥接猕猴4 cm尺神经缺损.A组:种植自体MSCs的去细胞同种异体神经;B组:种植自体SCs的去细胞同种异体神经;C组:去细胞同种异体神经;D组:自体神经移植.通过功能学、神经电生理学及组织学指标评价各组修复神经缺损的效果.结果 A、B组术后6个月...
作者:杨光诗; 许扬滨; 朱家恺; 刘小林; 朱庆棠 期刊:《中华显微外科》 2005年第01期
目的探讨猕猴骨髓间充质干细胞作为种子细胞与去细胞同种异体神经作为支架,体外构建人工神经的研究. 方法采用密度梯度离心的方法分离并培养猕猴骨髓间充质干细胞,利用相差显微镜观察细胞生长情况并描绘其生长曲线;取猕猴3段4 cm的周围神经,其中2段用4%triton -X -100及4%脱氧胆酸钠液分别萃取1次和2次,在新鲜神经和萃取神经中段取材,组织学检测及电镜学观察萃取前后的形态学变化;采用显微注射的方法把猕猴骨髓间充质干细胞种植到...
作者:董念国; 叶晓峰; 史嘉玮; 宋强; 孙宗全 期刊:《中华实验外科》 2005年第03期
组织工程心脏瓣膜(TEHV)是瓣膜外科的发展方向[1,2].天然支架因解剖结构接近人体瓣膜,血流动力学良好,被越来越多地用于构建TEHV.低温、胰蛋白酶、去污剂等方法常用于制备天然支架,本实验旨在探讨天然支架较理想的制备方法.
作者:刘维永; 金振晓; 顾春虎; 赵东锷; 谭红梅 期刊:《中华医学》 2005年第05期
目的研究猪主动脉瓣(猪瓣)去细胞方法,观察埋藏前后猪瓣内源性逆转录病毒(PERV)和瓣膜支架变化.方法①采用去垢剂、核酸酶和改变溶液渗透压方法制备去细胞猪瓣支架.②应用聚合酶链式反应(PCR)和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)等方法检测去细胞前后新鲜猪瓣和去细胞猪瓣以及供体和受体外周血PERV.③去细胞瓣叶埋藏家兔皮下4、6、8、10周后分别取材,应用苏木素-伊红和免疫组织化学染色,Instron 1122型万能强力仪、分光光度计、光镜和...
作者:吴国伟; 龚光甫; 陈晓凤 期刊:《温州医科大学学报》 2004年第06期
目的:找到一种牛心包材料细胞成分清除率高,而对其力学性能影响小的理想去细胞方法.方法:取新鲜牛心包,用新洁尔灭-核酸酶-脱氧胆酸法去细胞处理;新鲜牛心包作对照组.用Lowry法测定牛心包可溶性蛋白含量;牛心包片用作HE染色及WT+VG染色,作光镜检测并计算去细胞百分率,电镜观察组织超微结构;分别测定牛心包的组织含水量、厚度、抗拉强度、断裂伸长率及热皱缩温度.结果:牛心包去细胞处理后可溶性蛋白去除彻底,显著少于对照组(P<0.01...
作者:李芹; 夏翠萍; 吴昊; 龚德军; 刘晓红; 陆方林 期刊:《国际心血管病》 2019年第01期
作者:刘洋; 刘维永 期刊:《中国胸心血管外科临床》 2005年第01期
组织工程心脏瓣膜的研究是心脏外科领域的研究热点之一,近年来这方面的研究正在不断拓展.在去细胞同种、异种瓣膜支架的基础上构建的组织工程瓣膜,具有低免疫原性、无细胞毒性、植入体内后宿主细胞再细胞化程度高、有较好的仿生性、耐久性和机械强度等多方面的优势,而成为未来组织工程心脏瓣膜研究发展的一个重要方向.现将去细胞组织工程瓣近年来的研究进展进行综述.
作者:王新旺; 周乐斌; 梅劲; 张德明; 刘丹; 杜奥玲; 陈胜华 期刊:《中国临床解剖学》 2018年第02期
目的灌注制备家猪、新西兰白兔、SD大鼠肾去细胞生物支架,探究三种肾支架对共培养种子细胞HEK的影响。方法取健康成年家猪10头、新西兰白兔28只、SD大鼠28只,分别将取出的肾脏随机均等分为正常组和支架组,支架组由肾动脉依次灌入肝素、1%Triton X-100和1%SDS溶液完成去细胞化。两组肾分别作组织形态学鉴定并检测机械力学性质。去细胞支架作组织爬片与人胚肾上皮细胞共培养,观察细胞在支架爬片上的生长状况,免疫荧光检测人胚肾上皮...
作者:秦雨萌; 周涛; 张璐; 刘裕; 王新旺; 王志斌; 梅劲; 陈胜华 期刊:《解剖学报》 2017年第04期
目的通过灌注法制备大鼠单叶肝去细胞生物支架,并对其进行鉴定。方法健康成年SD大鼠20只,随机分为去细胞组和正常对照组,每组10只。去细胞组经门静脉灌胃针插管,恒温37℃依次灌注肝素化PBS溶液,1%Triton X-100(p H 7.5~8.0)及PBS溶液。HE、Masson染色及扫描电子显微镜观察组织学及超微结构改变;免疫荧光结合4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)观察2组胶原蛋白Ⅳ和Ⅰ、层黏连蛋白和纤维连接蛋白观察细胞外基质的主要成分;DNA定性和...
作者:兰莉; 王严; 付养华; 刘帅良; 黎婷; 王志斌; 习海涛; 杨运俊; 梅劲 期刊:《温州医科大学学报》 2017年第03期
目的:通过浸泡加震荡法制备猪部分卵巢组织去细胞生物支架,并对其进行鉴定。方法:健康未成年猪卵巢30个,横切成厚为6mm的切片,室温条件下,1%SDS溶液浸泡,同时平板震荡器震荡,最后用去离子水清洗其内残留SDS及DNA碎片。获得去细胞卵巢生物支架后,对其进行组织化学染色、DNA残留量定量测定、扫描电镜检查及免疫荧光染色,观察细胞去除情况、支架的三维结构以及细胞外基质中胶原与蛋白质的保留情况。结果:DNA定量分析得出仅...
作者:赵宏伟; 戴传云; 金讯 期刊:《科技资讯》 2006年第20期
测定“去细胞”羊膜基质(human acellular amniotic membrane,HAAM)与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endotholica lcell,HUVEC)的相容性,为提高内皮细胞在血管支架上的粘附率提供新的途径。
作者:杨立信; 徐志云; 黄盛东; 刘延玲; 张宝仁 期刊:《第二军医大学学报》 2007年第01期
目的:评价不同去细胞方法制备的猪主动脉瓣支架的组织学、生物力学特性及组织相容性,寻找更合适的去细胞心脏瓣膜支架制备方法。方法:分别采用3种不同的去细胞方法对新鲜猪主动脉瓣叶及带瓣主动脉管道进行脱细胞处理:0.01%胰蛋白酶+1%Triton+核酸酶组用含有0.01%胰蛋白酶-1%Triton和核酸酶的去细胞溶液37℃持续震荡24h;0.01%胰蛋白酶8h+1%脱氧胆酸(DCA)+核酸酶组先用0.01%胰蛋白酶37℃持续震荡消化处理8h,...
作者:顾春虎; 王云雅; 周华松; 邬晓成; 刘洋; 刘维永; 赵金超; 易定华 期刊:《临床心血管病》 2007年第10期
目的:研究环氧氯丙烷对猪主动脉瓣膜去细胞基质体外降解的影响。方法:按实验干预不同,将90个去细胞猪瓣叶随机分为:胶原酶和弹性蛋白酶组(A组),环氧氯丙烷组(B组),水解对照组(C组)。A组将猪主动脉瓣膜去细胞基质,采用0.5%胶原酶和弹性蛋白酶降解;B组采用0.2%环氧氯丙烷预处理后48h,再应用0.5%胶原酶Ⅰ和弹性蛋白酶体外降解猪主动脉瓣膜去细胞基质;C组加入蒸馏水处理;于处理后第3、6、9、15和30天观察各组降...
作者:王圣; 李温斌 期刊:《中国医疗器械信息》 2009年第02期
当前临床应用的所有生物瓣,包括无支架生物瓣共同致命弱点是易钙化、衰败,不具有生长活性。而随着组织工程技术的发展,组织工程心脏瓣膜的研究逐渐成为心脏外科领域的研究热点之一。在去细胞同种、异种瓣膜支架的基础上构建的组织工程瓣膜,以其具有低免疫原性、无细胞毒性、植入体内后宿主细胞再细胞化程度高、较好的仿生性、耐久性和机械强度,尤其具有生长功能等多方面的优势,而成为未来组织工程心脏瓣膜研究发展的一个重要...
作者:马洪斌; 张荣明 期刊:《中国组织工程研究》 2013年第18期
背景:有研究表明化学去细胞法处理的同种异体神经修复面神经缺损可以取得较好的修复效果。目的:在化学去细胞法处理同种异体神经的基础上探索一种修复面神经缺损更有效的修复方式。方法:将新西兰大白兔随机分为2组,实验组制备面神经颊支缺损动物模型,采用经化学去细胞的同种异体腓肠神经进行移植,且与伴行静脉行外膜缝合;对照组在同样位置的远近端分别切断面神经,但不破坏被切断神经与周围组织的正常解剖关系,再切断处行...
作者:曹荣龙; 李长宇; 张相彤 期刊:《中国组织工程研究》 2012年第08期
背景:目前周围神经去细胞的方法较多,应用较多的是化学萃取法和液氮冻融法,但是化学萃取法耗时较长,而液氮冻融法则去除细胞不彻底。作者在查阅大量文献和多次实践的基础上,最终确定了冻融+化学萃取+机械振荡的优化法对坐骨神经进行脱细胞处理。目的:对优化法制备的去细胞坐骨神经天然支架进行形态学分析,并对其成分进行鉴定。方法:取Wistar大鼠双侧坐骨神经,随机分为2组,对照组不做特殊处理,实验组用冻融+化学萃取+机械振...
作者:兰学文 期刊:《中国组织工程研究》 2010年第51期
背景:前期的研究中分别探讨了使用复合酶消化法及差速贴壁法对许旺细胞培养的影响以及聚氧乙烯辛烷基酚(Triton X-100)制备同种异体神经支架。目的:通过化学萃取法制备同种异体神经支架,并将培养的许旺细胞与支架进行体外结合培养。方法:取Wistar大鼠双侧坐骨神经,运用30g/L三硝基甲苯和40g/L脱氧胆酸钠分别萃取1,2和3次,在萃取神经和未萃取神经的中段取材,行苏木精-伊红染色,S-100及Laminin免疫组织化学染色及透射电镜检测。...
作者:赵丽娜; 余雅玲; 林刻智; 邵营宽; 王志斌; 陈加俊; 梅劲; 唐茂林 期刊:《解剖学报》 2014年第02期
目的通过在体灌注TritonX-100、SDS溶液法制备大鼠全肾去细胞生物支架,并对支架制备过程中的关键步骤进行程序性检测、分析,为制备科学合理的实验用大鼠全肾去细胞生物支架提供基础。方法SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只。肝素化后直接切取肾脏作为对照组(control组);肝素PBS灌注组(H组);肝素PBS、TritonX-100灌注组(HT组);肝素PBS、TritonX-100、十二烷基硫酸钠(SDS)溶液灌注组(HTS组)。HE、Masson、PAS染色及...