真核细胞的显著特点之一是具有膜包裹着的细胞核,其主要功能是将基因的转录和信使核糖核酸指导合成蛋白质这2个过程在空间上分隔开。最初为蛋白质编码的RNA序列可能是被不为蛋白质编码的RNA序列所隔断的.这些非编码区后来成为DNA分子中基因里的内含子。原核细胞为了节省资源,已基本清除了基因中的内含子。而真核细胞则利用内含子,用同一个基因合成多种蛋白质。这就需要细胞核阻止含有内含子的mRNA与合成蛋白质的核糖体接触。
一种玻璃配合料的窑外热分解和热态粒化工艺,其特征是:首先将玻璃配合料在玻璃熔窑外进行预热分解,在一定的温度下,使石英完成多晶转变或形成低温共熔物,并以熔化了的氢氧化钠或低温共熔物为粘合剂.
作者:查向东; 周立志; 黄河胜; 刘兢; 徐康森 期刊:《中国生物化学与分子生物学报》 2004年第06期
为研究蛇毒C型凝集素类蛋白的快速进化机制和结构功能关系,使用PCR技术扩增了若干编码C型凝集素类蛋白β链的cDNA分子以及agkisasinβ的基因组DNA,并将这些扩增产物进行克隆和测序.对测序结果与试验过程中的具体条件进行了因果关系分析,并且进行点阵图比较和多序列比对.结果表明,可能存在“转录后同源重组”等转录后的事件,在蛇毒C型凝集素类蛋白的多样性上起着重要的作用.对于解释基因数目与蛋白质数目的差异这一后基因组时...
作者:韩荣兰; 郝刚; 张奠湘 期刊:《热带亚热带植物学报》 2004年第05期
应用叶绿体DNAtrnL内含子序列分析檀香目科间的系统发育关系。取样研究的檀香目个体的trnL内含子序列长度在科间呈现较大差异(从291bp到587bp)。最大简约性分析产生的严格一致树与以前已发表的基于其它基因的檀香目的分子系统学研究结果大体一致。香芙木属(铁青树科)是最早分支出的类群:桑寄生科、槲寄生科分别表现为单系类群,檀香科为并系;桑寄生科和槲寄生科并不具密切亲缘关系,槲寄生科从檀香科内衍生出来。本研究表明,具...
作者:齐伟宏; 姜涛; 张小为 期刊:《中华老年医学》 2005年第03期
目的探讨胆固醇酯转运蛋白(CETP)在绝经后妇女中的基因多态性表达及其和血脂代谢的关系. 方法采用聚合酶链反应(PCR)方法检测59例绝经后妇女、40例月经正常的健康志愿者CETP基因第1内含子174位点TaqI B的基因型. 结果 2种等位基因和3种基因型在两组之间的分布比例差异无统计学意义(P<0.05),B2B2基因型的血高密度脂蛋白胆固醇的浓度显著高于B1B1及B1B2基因型,分别为(1.46±0.20)、(0.90±0.21)和(1.25±0.22)mmol/L,各基因型比较差异...
作者:王文斌; 王鸿利; 王学锋; 傅启华; 周荣富; 谢爽; 胡翊群; 王振义 期刊:《中华血液学》 2004年第09期
目的:探讨1个遗传性凝血因子Χ(FΧ)缺陷症家系的分子发病机制。方法:测定活化部分凝血活酶时间、凝血酶原时间、FΧ促凝活性以及FΧ抗原进行表型诊断;用PCR方法对先证者的FΧ基因8个外显子及其侧翼序列和5′端非翻译区(5′UTR)序列进行扩增,产物纯化后直接测序检测其基因突变。应用等位基因特异性PCR验证测序所发现的突变。结果:先证者表型诊断为FΧ缺陷症(Ⅱ型);FΧ基因分析发现2个杂合突变:第1内含子5′端剪接位点供位GT→AT(IVS...
作者:徐修才; 周荣富; 吴竞生; 方怡; 王学锋; 翟志敏; 王鸿利 期刊:《中华血液学》 2005年第03期
目的检测1例遗传性无纤维蛋白原血症患者家系纤维蛋白原(Fg)基因突变.方法检测先证者及其家系成员血浆Fg:C及Fg的水平,从外周血单个核细胞中提取基因组DNA,PCR扩增Fg基因的所有外显子及侧翼内含子序列,检测其基因突变.结果发现先证者Fg基因共2处突变,FGB基因7972碱基处缺失G以及FGG基因2543碱基处的纯合T→A.结论FGG基因2543碱基处为多态位点,形成γ144位氨基酸的I/K多态性.FGB基因7972碱基处缺失G,导致β链419位氨基酸之后的移码突...
作者:陈聪; 江昌俊; 叶爱华; 谭振; 童鑫 期刊:《安徽农学通报》 2009年第11期
利用GenBank中公布的茶树花粉壁蛋白基因(PCP)序列设计引物,采用PCR法扩增并测定茶树花粉壁蛋白基因内含子序列。在该基因中发现一个内含子,共207bp,A+T碱基占67.63%,G+C碱基占32.37%。经分析发现该内含子具有类似启动子的序列存在,可能对茶树花粉壁蛋白的特异表达有调控作用。
作者:徐闯; 夏成; 刘国文; 王哲; 李家奎; 张乃生; 王兴龙; 欧阳红生; 张永亮 期刊:《中国兽医学报》 2005年第04期
根据牛肝细胞内PC(丙酮酸羧化酶)基因组与PCcDNA相比多含有一个内含子序列,在其中再插入一外源DNA序列,从而使最终构建的突变体片段的长度大于PCcDNA的长度,成功构建了PCcDNA的竞争DNA模板,然后应用竞争PCR方法研究了丙酸盐对体外培养新生牛单层肝细胞PCmRNA水平的影响.使单层肝细胞培养液中丙酸钠浓度分别为0、1.5、2.5、3.5、4.5、8.5、11.5 mmol/L,处理24 h,提取总RNA、逆转录,在同一体系中用相同引物扩增目的带和竞争模板带.结...
作者:毛琼国; 白云 期刊:《中国生物工程》 2004年第10期
随着转基因技术在各个应用领域的深入和发展,转基因沉默现象已引起越来越多人的关注.在介绍转基因沉默的概念、分子机理的基础上,着重对提高转基因表达的方法、策略及其研究进展进行综述.分别阐述内含子、组织特异性启动子、增强子、定点整合、DNA大片段、反式作用因子以及基因组调控元件核基质附着区对转基因表达的影响.为克服转基因失活、提高转基因的表达效率提供理论依据.
作者:吴静; 闫艳春 期刊:《生物技术通讯》 2004年第05期
根据已发表的植酸酶phyA基因序列设计并合成1对引物,应用PCR技术,以黑曲霉N-2总DNA为模板,扩增出不包含假定信号肽序列的phyA基因,将其克隆到pMD18-T载体中,测定其核苷酸序列,并推导其氨基酸序列。该基因全长为1350bp,与已发表的黑曲霉NRRL3135的phyA基因的同源性为92.4%(不计内含子),编码1个含449个氨基酸残基的蛋白质,推导的氨基酸序列同源性为95.1%。将该基因与分泌型载体pPIC9K连接,构建了植酸酶基因的重组酵母...
近日,美国麻省理工学院研究人员针对内含子对酿酒酵母生长的调节作用进行了研究。通过对已知内含子进行删除,研究内含子缺失对酵母生长的影响,为真核单细胞生物内含子的生物学功能研究提供新视角。内含子是真核生物体内普遍存在的非编码RNA,它在新生mRNA中被剪接去除以产隹功能性蛋白质,但其生物学功能至今仍未被阐释清楚。
作者:温绍君; 王佐广; 陈光慧; 刘雅; 刘洁琳; 罗毅; 汤健 期刊:《中华预防医学》 2005年第01期
目的通过研究不同人群中新发现的增殖抑制基因HSG基因多态性,揭示增殖抑制基因多态性与高血压的关系.方法 2002年4月至2003年9月选取原发性高血压患者51例,男27例,女24例,平均年龄(57±8)岁;有高血压家族史的患者20例,女11例,男9例,平均年龄(38±22).74名健康对照,男38例,女36例,平均年龄(54±8)岁.取外周静脉血并提取DNA,设计相应的引物,PCR扩增法获得相应的产物,应用DNA测序法直接得到PCR产物的核苷酸序列后比较不同人群相同片段的...
作者:程涵蓉; 何少茹; 吴本清 期刊:《中国组织工程研究》 2017年第36期
背景:环状RNA(circRNA)是一种新型的RNA,与线性RNA不同,它形成共价闭合的连续环,并且在真核转录组中高度表达。它的生物学功能被忽视多年。最近的研究已经在哺乳动物细胞中发现了数千种内源性circRNA。目的:综述circRNA的形成、性质、功能,以及在疾病中的潜在意义。方法:第一作者应用计算机检索2000年1月至2016年12月PubMed数据库、中国期刊全文数据库关于circRNA的文章,英文检索词“CircRNA,miRNA,function,mechanisio...
作者:蔺亚晖; 韩志富; 李会良; 张玲; 王恒 期刊:《寄生虫与医学昆虫学报》 2004年第04期
本研究测定并分析鼠约氏疟原虫(Plasmodium yoelii yoelii)动力素蛋白基因(Pydyn)3'端内含子序列,比较约氏疟原虫yoelii虫株的Pydyn基因与约氏疟原虫17X NL虫株基因组序列内含子间序列的多态性.方法:应用PCR技术扩增约氏疟原虫动力素蛋白基因(Pydyn)基因组3'端序列,将其克隆人pGEM-T Easy载体.阳性克隆经酶切和PCR鉴定正确后测序,并用分子生物学WINSTAR软件进行基因结构和同源性分析.结果:用PCR方法成功扩增出约800bp的Pydyn基因特...
作者:冯凯; 周钢桥; 翟芸; 朱佩芳; 王正国; 贺福初; 蒋建新 期刊:《中华医学遗传学》 2004年第04期
目的检测中国人白细胞介素-1 Ⅰ型受体基因(interleukin-1 receptor type Ⅰ,IL-1)调控区和编码区的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs),并初步探讨其可能对中国人IL-1R1的功能影响.方法采用直接测序的方法检测基因的5'区、编码区、部分内含子区和3'区,以确定中国人群中 IL-1R1基因SNP的位置和类型,用生物信息学方法对编码区SNP的功能进行了预测.结果在9643 bp的测序长度中,共发现了16个SNP,包括5'区4个,内含子...
作者:冯凯; 周钢桥; 翟芸; 朱佩芳; 王正国; 贺福初; 蒋建新 期刊:《中华医学遗传学》 2005年第01期
目的检测中国人Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)基因调控区和编码区的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs),寻找 TLR4基因的遗传标记.方法采用直接测序的方法检测基因的5'区、编码区、部分内含子区和3'区,以确定中国人群中 TLR4基因SNP的位置和类型,并用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性对重庆汉族样本进行了抽样调查.结果在4.98kb的测序范围内,发现5个新的SNP,3个位于5'区,2个位于3'非翻译区.在重庆...
作者:吕峻峰; 麻宏伟; 姜俊; 牛国辉; 刘晓梅 期刊:《中华医学遗传学》 2004年第04期
目的研究X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良(X-linked spondyloepiphyseal dysplasia tarda, SEDL)的发病机理.方法应用聚合酶链反应-单链构象多态及变性聚丙烯酰胺测序凝胶电泳技术,并结合DNA序列分析方法,对5例SEDL 患者及30名正常对照SEDL基因的全部编码外显子及其邻近序列进行突变分析.结果在1例SEDL患者中发现了致病突变,并经DNA序列分析证实,SEDL基因第5内含子剪接受体处IVS5-2-1delAG紧接第6外显子322-332delTTTTCAATGAA共13个...
作者:张炜; 张思仲; 肖翠英; 杨元; 马用信; 程丽; 阿周存; 何国平; 施佳军 期刊:《中华医学遗传学》 2005年第01期
目的对 FKBP6基因第3、4外显子进行突变和多态性筛查,研究第3外显子278C/A位点及第2内含子C/T位点(rs7797242)在无精症患者和正常男性中的多态性,初步探讨与原发无精症的相关性.方法采用变性高效液相色谱和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,对第3、4外显子进行突变和多态性筛查,对177例无精症患者和231名正常男性的278C/A和C/T(rs7797242)多态性进行基因分型.结果 278C和278A等位基因频率符合Hardy-Weinberg平衡.无精症患者2...