作者:王志力; 梁红宝; 伍久林; 陈立; 张其清 期刊:《中国医药导报》 2011年第35期
目的:探讨石决明药效成分的抗氧化活性。方法:用CM-Sephadex C-25离子交换色谱(ion exchange chromatog-raphy,IEC)梯度层析分离石决明酸溶性提取物,得到各分离组分280 nm处光吸收曲线,SDS-PAGE方法分析各组分蛋白成分,最后测定了各组分的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH.)清除活性。结果:IEC梯度层析得到双峰洗脱曲线,具有较高OD280nm值的组分均显示出明显的SDS-PAGE蛋白电泳条带,DPPH.自由基清除能力实验结果表明,多...
作者:蔡亚岐; 刘京生; 牟世芬 期刊:《分析化学》 2005年第04期
将高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培直接检测法应用于鱼粉和玉米粉水解液中的氨基酸的分析测定.该方法使用Dionex AminoPac PA10阴离子交换柱为分析柱,控制柱温为35℃,以NaOH和NaAc的强碱性溶液为淋洗液,在合适的梯度条件下,可以实现对17种常见氨基酸的高效分离.在强碱性条件下,获得良好分离的各个氨基酸可在配有金工作电极的电化学检测器上以积分脉冲安培法获得高灵敏度的检测.在优化的测定条件下,该方法对这17种氨基酸的检出限在...
作者:陈婷; 贠强; 闭静秀; 马光辉; 苏志国 期刊:《生物工程学报》 2005年第02期
建立了两步连续离子交换制备色谱分离、纯化聚乙二醇与重组人粒细胞集落刺激因子(Recombinant human granulocytestimulating factor,rhG-CSF)偶联物的方法.首先用阳离子交换色谱将偶联蛋白质和非偶联蛋白质分开,然后使用阴离子交换色谱去除过量的游离聚乙二醇杂质,并分离纯化偶联蛋白异构体分别得到单聚乙二醇化、双聚乙二醇化和三聚乙二醇化的rhG-CSF.它们经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析均为单带.采用基质辅...
作者:张建新; 姜标; 刘长亮 期刊:《中国生化药物》 2005年第01期
目的建立高纯度胰激肽原酶的纯化工艺.方法通过离子交换色谱法一步纯化胰激肽原酶粗品.结果纯化得到的胰激肽原酶效价(活力)达到237~268 U/mg,比活在300U/mg蛋白质以上,活性回收率在75%以上.结论该纯化方法简单、高效.
作者:李菁华; 赵伟 期刊:《中国生化药物》 2005年第05期
目的从赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)中分离纯化出一种相对分子质量(Mr)较小的纤维蛋白溶解组分--蚯蚓纤溶酶(EFE),为其注射剂的研制开发打下基础.方法采用盐析、透析、凝胶过滤色谱、离子交换色谱等方法分离纯化EFE,用SDS-PAGE对纯化的活性组分进行Mr测定,用酶谱分析方法初步探讨蚯蚓中存在的其它纤溶酶活性组分.结果分离纯化得到了EFE单一组分,经SDS-PAGE EFE呈单一条带,Mr约为25 000.经酶谱分析发现纤溶酶活性组分Mr分布在25000...
作者:黄亚渝; 童卫; 郭立安; 耿信笃 期刊:《医学争鸣》 2005年第15期
目的:研究还原变性的核糖核酸酶(RNase)在高效疏水作用色谱(HPHIC)及高效离子交换色谱(HPIEC)上的复性及影响因素.方法:在二硫苏糖醇(DTT)存在的条件下用盐酸胍(GuHCl)和尿素(Urea)将RNase变性还原,先在溶液中加入氧化型谷胱苷肽(GSSG)进行氧化,然后在流动相中有低浓度变性剂存在的条件下,用HPHIC,HPIEC及稀释法对其进行复性并测定其生物活性及回收率.结果:HPHIC和HPIEC对RNase的复性效率均高于稀释法,两者的色谱固定相对RNase的复...
作者:陈蕴; 赵慧; 詹晓北; 张丽敏 期刊:《分析测试学报》 2005年第02期
建立了高效液相色谱法测定唾液酸单体的方法,色谱柱为ZORBAX SB C18柱,流动相为pH 3的硫酸水溶液,流速1.0mL/min,进样量5.0μL,在波长210 nm处检测,唾液酸单体质量浓度与峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.999 9.在唾液酸单体的纯化过程中用此方法进行检测;与质谱分析相结合,确立了聚唾液酸水解液中唾液酸二聚体的存在.
作者:范巧; 陈青如; 徐志刚; 陈江; 吴勇强 期刊:《精细与专用化学品》 2004年第07期
本文描述了一种电子纯盐酸的制备方法,包括氯化氢的蒸发、气体净化、高纯水吸收以及最终提纯等步骤,并对按此工艺生产的盐酸产品采用ICP-MS和离子交换色谱进行了分析,实验证明此工艺能够有效去除工业盐酸中Fe、Cu、Pb、As等杂质离子.
作者:张轶华; 杨更亮; 张小乐; 赵菊敏; 蔡丽萍; 陈义 期刊:《色谱》 2005年第03期
分别用乙二胺、二乙胺、三乙胺将自制的以甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂的整体柱修饰为弱、强阴离子交换整体柱.考察了该整体柱的性能,选择出分离蛋白质(牛血清白蛋白、溶菌酶和谷胱甘肽)的最佳实验条件,并在最佳分离条件下考察了这些蛋白质在整体柱上的色谱行为和该整体柱对纤维素降解酶的分离纯化情况.实验结果表明,该整体柱性能良好,可以实现对纤维素降解酶的快速分离与纯化.同时,实验...
作者:张洋; 温腾; 林娟; 谢智; 刘树滔; 饶平凡 期刊:《色谱》 2005年第04期
采用离子交换色谱法对世界上分布最广、危害最重且最难防治的植物致病菌青枯菌进行了色谱表征.在以0.02 mol/L哌嗪-盐酸缓冲液(pH 8.0)为流动相、梯度洗脱条件下,青枯菌在SuperQ-650 C色谱柱(200 mm×4.6 mm i.d.)上被分离为3个不同的色谱峰.根据这3个组分的形态和生理生化性质,确定青枯菌原液和分离得到的3个组分都属于青枯菌的生化型Ⅲ型.通过2,3,4-三苯基氯化四氮唑(TTC)平板鉴定两个洗脱峰菌体的致病性及电镜观察二者的运动性,...
作者:王应红; 陈武勇; 辜海彬; 陈继平 期刊:《中国皮革》 2006年第05期
通过离子交换色谱对新配不浸酸铬鞣液和存放6h不浸酸铬鞣液进行电荷及光谱分析,试验结果表明:铬鞣液在存放初期主要为中性或阴性配合物,在存放过程中,阳铬配合物增多,但仍只是简单的单点配聚,鞣性较小。不浸酸铬鞣液新配或存放6h,其R值不同,分别为0.862和0.891。根据鞣液的电荷性质及光谱特征,推测了鞣液可能的组分和结构。
作者:于璐; 周光明; 沈洁; 余艳丽 期刊:《食品工业科技》 2016年第22期
建立了高效阴离子交换-脉冲安培检测(High performance anion exchange—pulsed amperometric detection,HPAE—PAD)测定火龙果、莲雾、牛油果等10种热带水果中葡萄糖、蔗糖和果糖的检测方法。热带水果申的多糖经超声萃取后,用METROSEP CARB1(150mm×4.0mm)色谱柱进行分离,以30.0mmol/LNaOH为流动相,等度洗脱,用安培检测器检测,18rain可完成对样品多糖的分离和定量分析。经测定,葡萄糖和蔗糖的检出限分别为0.1209μg...
作者:孔保华; 刁新平; 郑冬梅 期刊:《东北农业大学学报》 2004年第04期
试验通过离子交换色谱法对肌肉中钙激活酶(Calpain)进行定量分析研究,确定了Calpain粗提液制备工艺.对Calpain粗提液进行全波长紫外扫描说明276~280 nm处有一个吸收高峰.应用DEAE离子交换层析对Calpain进行纯化,用0~500mmol·L-1NaCl Tris-HCl进行离子强度线性梯度洗脱,在280 nm波长下测定洗脱液的光吸收值,洗脱得3个蛋白峰,μ-Calpain和m-Calpain分别在NaCl为130~180 mmol·L-1和260~300mmol·L-1时洗脱下来,钙激活酶抑制蛋白(Cal...
作者:谭燕; 冯芳; 仝新勇 期刊:《中国药学》 2005年第21期
目的介绍整体柱在分离分析生物大分子上的应用.方法综述近年来国内外有关文献.结果整体柱可应用于液相色谱(包括反相高效液相色谱,亲和色谱,离子交换色谱和微柱液相色谱)和毛细管电色谱,在生物大分子分离分析上具有广阔的应用前景.结论整体柱是不需要填料,用原位聚合法制备的连续柱体,其制备方法简单,内部结构均匀、重现性好、具有较高的柱效和很好的通透性.特有的孔结构在生物大分子分析上显出极大的优势.
作者:罗天乐; 丁虹; 李京京; 苏志国 期刊:《过程工程学报》 2005年第02期
以反相色谱分析为主要手段,结合活性测定,研究了以包含体形式表达的重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)的稀释复性和离子交换色谱复性.建立了L-精氨酸离子交换复性蛋白质的方法,将变性、还原的rhG-CSF吸附到高浓度变性剂平衡的离子交换色谱柱上,用L-精氨酸作洗脱剂进行梯度洗脱并同时脱除变性剂,实现了rhG-CSF的复性.与稀释复性相比,色谱复性的rhG-CSF处于一种中间状态,呈现快速而不同步的动力学特点,这与色谱复性的梯度洗脱及固定...
作者:杨仁智; 张劲松; 唐庆九; 潘迎捷 期刊:《中国食用菌》 2005年第05期
本文采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测器(HAPEC-PAD),建立了一种测定多糖中单糖比例的方法.以NaOH为淋洗液,CarboPacTMA20预处理柱,CarboPacTMPA20分离柱,金工作电极,Ag/AgCl参比电极,8种自然界中常见单糖标准品做混合标样,探索方法可行性.在淋洗液浓度为2.5 mmol/L时,各种单糖组分得到有效分离,其线性和重现性均良好.并在此基础上测定了毛头鬼伞多糖中单糖比例;与传统的方法相比,此方法具有前处理简单、灵敏度高、节省时间和...
作者:刘晓兰; 陈丽; 邓永平; 郑喜群; 艾瑞波; 任凭 期刊:《饲料研究》 2013年第10期
摘要离子交换色谱法是生物工业下游技术领域常用的分离纯化目的产物的手段。从色谱填料、色谱柱的选择和样品处理等方面对离子交换色谱在蛋白质分离纯化中的分离策略进行总结,并列举成功的分离案例。
作者:陈捷敏; 郑欣桐; 周芳; 马红霞; 林军 期刊:《中国生物制品学》 2017年第08期
目的 对抗程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)单克隆抗体的电荷异质体进行结构鉴别及生物学功能分析。方法 通过检测抗PD-1单克隆抗体经专一性蛋白酶(唾液酸酶及羧肽酶)酶切前后的变化,初步确认电荷异质体的种类。采用阳离子交换色谱对电荷异质体进行分离和收集,经联用液相色谱-质谱(LC-MS)法分析电荷异质体各组分的组成;通过抑制抗原与配体相互作用影响NFAT荧光素酶报告基因表达的方法确定电荷异质体的生物学功能。结果 ...
作者:王建山; 夏红军; 万广平; 刘家玮; 白泉 期刊:《色谱》 2016年第12期
以硅胶为基质、氨基己酸为配基制备了一种新型弱阳离子交换/疏水(WCX/HIC)双功能混合模式色谱固定相。该固定相配基具有一定的疏水性且含有羧基,在高盐浓度下表现为HIC的性质,可作为HIC固定相使用;在低盐浓度条件下表现为离子交换的性质,可作为WCX固定相使用。分别考察了该介质在WCX和HIC两种模式下对标准蛋白质的分离性能,并与商品柱进行比较。结果表明,所合成的WCX/HIC双功能固定相在WCX和HIC两种模式下对蛋白质均有较高的分离...