作者:于泓; 李尧华; 冯秀丽; 吴燕川; 周虹; 陈彪 期刊:《中国生物化学与分子生物学报》 2004年第01期
MES 23.5细胞作为研究神经变性疾病的工具,是一种杂交瘤性多巴胺能神经元细胞系,由大鼠胚胎中脑细胞与小鼠神经母细胞瘤-胶质瘤细胞系N18TG2杂交而成,其酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的动物种属来源不清楚,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法从MES 23.5细胞系中克隆了编码TH的cDNA;结构分析表明,其cDNA编码区由1497碱基构成,共编码498个氨基酸,与大鼠和小鼠TH的同源程度分别为93%和100%.该杂交瘤细胞系表达...
作者:杨柳; 欧册华 期刊:《西南医科大学学报》 2014年第05期
神经退行性疾病是一类与年龄密切相关的由细胞凋亡过度引起的神经系统疾病,共同的病理特征是特定细胞群的进行性丢失,但不同的类型病理改变不同。P53基因家族由P53、P63和P73组成,均参与细胞周期和凋亡途径的调控。P53家族蛋白均能激活P53调节的启动子,从而诱导细胞凋亡[1]。P53的主要功能是调控细胞周期、诱导细胞凋亡和DNA损伤修复。
作者:刘美英; 刘亚萍; 王晓舟; 高殿帅 期刊:《徐州医科大学学报》 2012年第03期
目的 探索神经型钙黏蛋白(N-cadherin)在多巴胺能神经元慢性损伤中的可能作用.方法 采用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)腹腔注射建立小鼠黑质多巴胺能神经元慢性损伤模型,采用免疫荧光染色和Western blot方法检测小鼠从实验第1周到第6周黑质酪氨酸羟化酶(TH)和N-cadherin的表达情况.结果 免疫荧光染色结果显示:对照组和MPTP组小鼠黑质的TH免疫阳性神经细胞在各时间点都同时表达N-cadherin.Western blot结果显示:①M...
作者:叶钦勇; 徐评议; 刘焯霖; 徐浩文; 朱蔚文; 谢安木; 杨海华 期刊:《中华老年医学》 2005年第07期
目的探讨脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞(Mic)激活规律与黑质多巴胺(DA)能神经元变性的关系.方法分别于LPS注入大鼠脑黑质后7 d、14 d、30 d观察大鼠行为学改变,并采用免疫组织化学及原位杂交等方法观察Mic的激活情况以及酪氨酸羟化酶(TH)神经元的表达.结果行为学改变表现为7 d仅引起轻度的旋转行为[(85±13)圈/30min],至14 d时旋转次数增多[(121±17)圈/30 min],30 d时达高峰[(295±21)圈/30min];7 d Mie部分激活,14 d时大部分激活,30 d...
作者:孙波; 赵艳晖; 祝贺; 关淇予 期刊:《中国妇幼保健》 2007年第23期
目的:探讨酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺β羟化酶(DβH)、儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)基因多态性与子痫前期的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)技术,分别检测77例子痫前期患者(子痫前期组)及80例年龄及孕周皆相匹配的正常晚期妊娠妇女(对照组)TH基因2606G/A、DβH基因589G/A、COMT基因1947G/A多态性位点频率。结果:①TH、DβH、COMT基因型GG(野生型)、GA(突变杂合子)、AA(突变纯合子)...
作者:师亮; 王彤; 景雅; 张宇新 期刊:《中国医药导报》 2007年第12X期
目的:观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)特异性抑制剂氨基胍(AG)对帕金森病模型小鼠黑质内多巴胺(DA)能神经元的影响。方法:采用Lau法制作PD小鼠模型,通过行为学观察和免疫印迹法,观察PD小鼠模型的行为学表现,及腹侧中脑(包括VTA和SN)iNOS、酪氨酸羟化酶(TH)表达水平的变化。并观察给予iNOS抑制剂AG后对上述变化的影响。结果:与对照小鼠相比,PD小鼠出现PD典型的行为学表现,腹侧中脑TH含量下降约77%,同时i-NOS含量大幅度升...
作者:邱建华; 乔莉; 刘顺利 期刊:《听力学及言语疾病》 2004年第02期
目的研究酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH) 和钙基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在蜗轴螺旋动脉(spiral modiolar artery, SMA)的定位及共存.方法解剖显微镜下分离豚鼠SMA及其分支.采用TH及CGRP抗体及免疫组织化学ABC法和双标免疫荧光共聚焦定位技术.结果 TH、CGRP阳性的神经纤维分布于SMA的全长及其分支,两者均呈神经纤维网包绕SMA.标记的神经纤维有明显的分支和交叉,含明显的膨体,直径差异较大.纤维的密...
作者:王丹丹; 宋俊杰; 慎晓飞; 洪道先; 韩峰; 李会芳; 王莹 期刊:《中国病理生理》 2018年第09期
作者:李良; 赵焕英; 徐群渊 期刊:《中国组织工程研究》 2005年第09期
目的:多巴胺神经元的发育是人们较为关注的问题,目前发现的蛋白可能在其发育机制中起着重要作用,研究内源性Nurrl基因表达变化对体外培养大鼠胚胎神经前体细胞分化的诱导作用。方法:实验于2003-05/2004-08在首都医科大学北京神经科学研究所完成;分离13.5d大鼠胚胎中脑及前脑神经前体细胞并进行体外培养,培养基中加入视黄酸及毛喉素诱导3d,采用RT-PCR,Western Blot及免疫荧光染色的方法观察Nurrl表达的变化及细胞分化;同...
作者:叶钦勇; 徐评议; 刘焯霖; 徐浩文; 朱蔚文; 谢安木; 杨海华 期刊:《中国组织工程研究》 2005年第17期
目的:探讨脂多糖诱导帕金森病大鼠模型过程中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、诱导型一氧化氮合酶等细胞毒性因子的作用.方法:实验于2003-07/2004-07在中山大学附属第一医院神经科实验室进行,取35只雄性SD大鼠随机分为4组:7,14,30 d组,每组10只,对照组5只.对照组不做任何处理,3个不同时间点组立体定位注射脂多糖(20μg,质量浓度5 g/L)人大鼠黑质.于注射后不同时间点观察大鼠行为学改变,并采用免疫组织化学及原位杂交等方法动态观察酪...
作者:陈晴; 段德义; 杨慧; 孙成三; 陈立南; 徐群渊 期刊:《解剖学报》 2005年第01期
目的为提高体外转基因(ex vivo)治疗帕金森病大鼠模型的疗效,本实验拟比较两种基因表达载体介导的外源基因在两种不同运载细胞的瞬时表达效率. 方法分别将酪氨酸羟化酶(TH)基因的重组表达质粒和重组逆转录病毒导入原代培养的大鼠成纤维细胞和脑胶质细胞,用免疫组织化学检测TH的表达效率;Western blot法检测样品中TH特异性条带并转换成A值,以比较其在不同细胞中表达的相对含量. 结果免疫组织化学检测表明,表达质粒的转染率为5%~7%,...
作者:龚红华; 忽俊; 凌志红; 刘坤; 万谨; 王芳; 佘振珏; 肖虹蕾; 赵淑民; 胡宝洋; 周晓东; 褚仁远; 周国民 期刊:《中国组织化学与细胞化学》 2005年第05期
作者:刘洪梅; 刘美英; 刘庆飞; 王海燕; 杨雨静; 刘鑫峰 期刊:《解剖学》 2019年第01期
目的:探讨神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)在老年中脑黑质内表达变化,是否与黑质多巴胺(DA)能神经元退行性变有关。方法:实验分正常对照组、帕金森病(PD)假手术组、PD模型组、老年组。动物被快速断头取脑,行免疫印迹检测,检测酪氨酸羟化酶(TH)及N-cadherin表达量;动物被麻醉、灌注、固定、冷冻切片,行TH及N-cadherin免疫组织化学显色。结果:PD模型组与对照组相比,中脑黑质TH表达量降低,黑质致密部TH阳性细胞数减少;相反,N-cadherin表...
作者:陈宏; 李红戈; 梅元武; 曹非; 王芳 期刊:《卒中与神经疾病》 2008年第04期
目的研究重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)预处理对帕金森病模型中黑质多巴胺神经元的影响及其作用的机制。方法6-羟多巴胺浸泡大鼠黑质脑片建立离体帕金森病模型,用不同浓度rhEPO在不同时间点预处理黑质多巴胺神经元,观察黑质中酪氨酸羟化酶及氧化应激指标-丙二醛、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的变化。结果rhEPO预处理能抑制6-羟多巴胺导致的黑质酪氨酸羟化酶阳性细胞数减少...
作者:邢红霞; 彭海 期刊:《脑与神经疾病》 2004年第04期
目的:研究同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对离体帕金森(parkinson's disease,PD)模型的多巴胺能神经元的作用及其机制.方法:12只大鼠分成四组,脑片分别于对照组、含6-羟多巴胺、Hcy及6-羟多巴胺+Hcy的人工脑脊液中孵育2小时.分别用抗酪氨酸羟化酶免疫组织化学方法及生化方法观测黑质阳性细胞体及突起的变化,以及自由基和抗自由基酶的变化.结果: Hcy与6-羟多巴胺共孵育可以引起离体脑片黑质TH阳性细胞突起及纤维数减少,自由基反应...
作者:张文华; 王晓民; 吴承远 期刊:《中华实验外科》 2005年第03期
目的建立一种可同时高效稳定表达酪氨酸羟化酶(TH)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的双基因工程细胞,探讨其在帕金森病(PD)基因治疗中的作用.方法应用分子克隆技术构建真核表达载体PcDNA3.1/hGDNF和PcDNA3.0/hTH,并同时转染至SH-SY5Y细胞系,利用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定筛选出的阳性细胞克隆TH和GDNF的表达水平,将双转工程细胞与MN9D细胞共培养,高效液相色谱分析工程细胞对MN9D细胞生长状态及细胞内单胺类递质含量...
作者:尹伟华; 刘春风; 苏敏 期刊:《江苏医药》 2004年第11期
目的研究长期应用左旋多巴对健康老年大鼠多巴胺神经元是否存在毒性作用.方法将24只健康老年大鼠随机分为3组,分别给予大剂量左旋多巴、小剂量左旋多巴、生理盐水共4个月,观察大鼠用药后是否产生运动障碍,以及纹状体部位脑组织匀浆中的还原型谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶、丙二醛含量,以免疫组化法检查中脑黑质和纹状体部位酪氨酸羟化酶阳性细胞和纤维的数量.结果没有发现长期应用左旋多巴会引起运动障碍,长期左...
作者:朱秀玲; 鲁亚平 期刊:《皖南医学院学报》 2019年第02期
目的:观察创伤后应激障碍(PTSD)大鼠杏仁核酪氨酸羟化酶(TH)和脑源性神经营养因子(BDNF)的改变,以及电针对它们的影响。方法:采用连续单一刺激(SPS)构建PTSD模型,随机分为PTSD模型组(6只)和电针治疗组(6只),并另设正常对照组(6只)。电针组于造模第2天,给予电针“足三里”穴和“百会”穴,频率为2Hz,时间30min,每日1次,连续电针21d。电针结束后,采用免疫组织化学方法检测各组杏仁核TH及BDNF的表达。结果:与正常对照组比较,PTSD模型组...
作者:王彦春; 马骏; 王华 期刊:《湖北中医药大学学报》 2005年第03期
目的探询"双固一通"针法对帕金森病模型大鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用.方法将Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、假手术对照组、模型组、双固一通组等4组,每组10只.采用6-OHDA单侧纹状体立体定向微量注射法制备大鼠旋转帕金森病模型.双固一通组在造模成功后取关元、足三里、风府、太冲四穴行电针治疗2周.然后,取各组动物中脑,采用流式细胞技术检测各组大鼠黑质多巴胺能神经元数量和细胞凋亡率.结果双固一通组毁损侧黑质TH阳...
作者:朱晨; 刘伟; 李璟; 李婵; 房淼; 陈志杰; 周玉婷; 罗超华; 莫志贤 期刊:《中国药理学通报》 2018年第09期
目的 研究酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)与钩藤碱抑制甲基苯丙胺依赖小鼠条件性位置偏爱(condition place preference,CPP)作用的关系。方法 实验分为5组:空白对照组、模型组、钩藤碱低剂量组(40 mg·kg^-1)、钩藤碱高剂量组(80 mg·kg^-1)、氯胺酮组(15 mg·kg^-1)。腹腔注射甲基苯丙胺后,进行小鼠条件性位置偏爱训练,建立小鼠甲基苯丙胺CPP依赖模型,分析各组小鼠在CPP箱中的活动,以及各组小鼠脑内TH的表达情况。结果 给予...