作者:郭元元; 张文佳; 张宇; 王丽英; 廖璞 期刊:《现代医药卫生》 2019年第22期
复检在医学检验临床工作中最为常见。根据实验室的标准操作规程文件,在一定情况下应进行复检。血常规检测中首次血红蛋白或白细胞值出现异常、生化检验中肌酐的异常结果及医生质疑检查结果与临床症状不符时均应进行复检[1-3]。然而在临床基因扩增检验中,由于试剂成本、技术灵敏度、标本不易再次获取等因素,复检经常被检验者忽略。
作者:吕沈聪; 王恒辉; 燕勇; 管健 期刊:《预防医学》 2019年第07期
目的通过扩增邻苯二甲酸二丁酯(DBP)降解菌L6 的关键基因并分析代谢产物,了解该菌株的降解机制。方法以DBP 降解菌L6 基因组为模板,PCR 扩增邻苯二甲酸双加氧酶基因和邻苯二甲酸酯脱羧酶基因,PCR 产物用2%琼脂糖凝胶电泳检测,再进行测序和分析;将DBP 降解菌L6 接种于含DBP 浓度为800 mg/L 的基础培养基中培养120 h,采用超高效液相色谱法(UPLC)和气相色谱-质谱联用法(GC-MS)检测培养基中的残留物质,确定降解产物。结果通过PCR 扩增...
目的探讨浸润性乳腺癌人表皮生长因子受体-2(HER-2)蛋白及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达情况,并研究HER-2基因扩增与ER、PR、HER-2蛋白表达之间的关系。方法采用免疫组织化学(SP)法和荧光标记原位杂交(FISH)法检测60例浸润性乳腺癌患者HER-2蛋白、ER、PR的表达及乳腺癌中HER-2基因扩增情况。结果 60例乳腺癌组织中出现HER-2基因扩增23例,阳性率为38.33%,ER、PR蛋白的阳性表达分别为31例、34例,HER-2基因扩增在ER...
作者:薄威; 王旭光; 张忠; 韩莹 期刊:《中国现代医生》 2016年第08期
目的探讨从石蜡包埋胃镜组织中提取幽门螺杆菌菌体DNA的方法和策略。方法选取2008年5月~2010年5月中国医科大学263例胃癌术后石蜡包埋标本及2011年6月~2014年6月医学院附属中心医院和沈阳医学院附属第二医院206例幽门螺杆菌阳性石蜡包埋标本,利用试剂盒提取菌体DNA、PCR扩增,对扩增的结果进行统计分析。结果 263例胃癌大体标本中,231例检测出随意选取基因片段,阳性率为87.83%;206例胃镜标本中,194例检测出幽门螺杆菌cag A基因,阳...
目的探讨实时荧光定量PCR技术在分子生物学研究领域的应用。方法对当前分子生物学研究领域中,实时荧光定量PCR技术的使用情况进行总结,并对实时荧光定量PCR的原理、荧光检测和定量方法等方面进行分析。结果实时荧光定量PCR是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术,具有灵敏度高、定量准确、特异性强、重复性好、无污染等特点,目前广泛应用于分子生物学、基础医学、法医学等研究领域。结论实时荧光定量PCR技术有较高使用价值,...
作者:范大明; 冉雯雯; 孙玲玲; 张龙宵; 李玉军 期刊:《实用检验医师》 2013年第03期
目的 探讨双色银染原位杂交技术(dual-color silver-enhanced in-situ hybridization,DSISH)检测胃癌人类表皮生长因子受体2(human epidermalgrowth factor receptor-2,HER2)基因扩增的可行性及其与临床病理学特征的关系.方法 应用DSISH技术检测230例患者胃癌切除组织中HER2基因扩增状态,并进行相关统计学分析.结果 DSISH检测230份胃癌标本中43例存在HER2基因扩增,HER2基因扩增率为18.7%.HER2基因扩增与胃癌的分化程度、淋巴...
作者:吴信华; 倪松石; 姚登福; 邱历伟; 张学光 期刊:《中国组织工程研究》 2005年第10期
目的:旨在探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在肺癌组织中的分布及其表达水平.方法:对象为南通大学附属医院2000-07/2001-05肺癌手术中新鲜肺癌组织标本.采用免疫组织化学法分析了VEGF在38例肺癌组织的胞内定位及其表达状态;并测定癌、癌旁及远癌组织中总RNA水平,以反转录聚合酶链式反应分析组织中VEGF mRNA的表达水平.结果:38例肺癌组织中VEGF阳性表达率为76%,其中在Ⅲ期、Ⅳ期肺癌达90%,伴有淋巴结...
作者:沈定霞; 罗燕萍; 张有江; 张秀菊; 周光 期刊:《中华检验医学》 2005年第12期
目的比较研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的试验检测特性.方法按临床和实验室标准协会的标准分别测定和判断1 μg苯唑西林纸片和30 μg头孢西丁纸片在30℃和35℃时对金黄色葡萄球菌(138株)和凝固酶阴性葡萄球菌(128株)的抑菌环直径.苯唑西林盐平板采用点种法,mecA基因的检测采用PCR.结果苯唑西林和头孢西丁纸片在30℃孵育时对MRSA检测的敏感性均可达到100%,而在35℃孵育时,头孢西丁纸片对M...
作者:胥健敏; 文剑明; 张萌; 吕国丽; 吴立志; 汪维生 期刊:《中华病理学》 2004年第01期
作者:江佳佳; 李晓华 期刊:《中华临床实验室管理电子》 2017年第04期
临床基因扩增检测工作的全面质量管理是在传统检验质量控制体系基础上的延伸。着重整体规划,将实验室建筑流程纳入质量管理范围。从细节着手,把好检测标本质量关。借助信息管理系统,保障分析前阶段的质量管理。加强操作合规性,规范开展性能验证工作,认真评价检测过程有效性,保障实验过程的质量管理。密切联系临床,延伸分析后质量管理内涵。总之,临床基因扩增实验室的质量管理应包括从基因扩增实验室建设和检测标本的前处理...
作者:曾穗德; 谢丹; 林锋; 王长希; 陶瑜; 张萌 期刊:《中华胃肠外科》 2005年第01期
目的探讨甾体类受体共激活因子3(SRC-3)基因在结直肠癌(CRCs)中的蛋白表达与基因扩增及其临床病理学意义.方法运用免疫组织化学和荧光原位杂交方法对60例结直肠癌组织中SRC-3基因的表达与扩增进行检测,结合其临床病理学资料,分析它们之间的相关性.结果在60例CRC患者中,有23例(38%)肿瘤组织出现SRC-3蛋白的过度表达,而且与肿瘤的临床分期有显著的相关性(P<0.01),62%的Dukes C或D期CRC呈现出SRC-3蛋白的过度表达;而74%早期(Dukes A...
作者:刘臻; 杨蕾; 马文锋; 张韬; 张强 期刊:《中华肝胆外科》 2004年第03期
目的探讨肝细胞癌(HCC)中C-erbB2基因扩增和表达与临床病理特征之间的关系.方法应用差异PCR和免疫组化方法检测42例HCC中C-erbB2基因扩增和表达情况,分析它们与HCC临床病理特征的关系.结果 C-erbB2扩增和表达与HBsAg、肿瘤大小、Edmondson分级、临床分期、肝硬化、肝外转移和复发有关,而与年龄、性别、AFP值、丙肝病毒感染、肿瘤结节数和肿瘤包膜无关.结论 C-erbB2基因不仅参与了HCC的发生、发展,并可作为判断HCC预后的生物学指标.
作者:刘雅峰; 郑克立; 王长希; 陈立中; 费继光; 徐鸿绪; 纪玉莲 期刊:《中华器官移植》 2005年第11期
目的评价应用核酸基础序列扩增法(NASBA)检测巨细胞病毒(CMV)即刻早期(IE)mRNA对肾移植术后CMV活动性感染的诊断价值.方法采用NASBA法测定55例肾移植患者的外周血标本中CMVIE mRNA及pp67 mRNA,免疫组化法检测CMV pp65抗原.结果55例患者中,发生有症状的CMV活动性感染者13例;IE mRNA阳性者20例,12例有CMV活动性感染,IE mRNA的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为92.3%、80.9%、60.0%及97.1%.IE mRNA阳性结果出现最早,为术...
作者:赵声明; 常乃柏; 顾惜春 期刊:《中华医学》 2004年第11期
目的探讨激活JAK2信号通路是否能够长期扩增调控造血干祖细胞并评价扩增细胞的定向分化潜能.方法构建克隆1个含有JAK2基因和二聚化化学诱导物(AP20187)结合位点所组成的逆转录病毒载体.AP20187可以使JAK2二聚化激活细胞内信号传导.将该载体转入小鼠原始骨髓造血细胞,在无血清培养基中,将JAK2转基因的细胞分为:①空白对照组,②AP20187组,③细胞因子联合组[干细胞因子(SCF)+Flt3-配体(Flt3-L)],④AP20187+ SCF+ Flt3-L组.对扩增的细...
我们经常看到乙肝的检测报告,最常做的几个检查一个是“肝功”,一个是“乙肝五项”,病毒载量(HBV DNA)也是患者在治疗和随访当中重要的一个指标,也是医生常开的一个检查。所以这个检查的意义是需要患者有所了解的,因为这个检查有时候写的是阴性,有时候写的阳性,有时候又是一个数值。是患者有时候就不太明白这个指标的意义了。尤其是看到病毒载量时,不能光看前面那个数,更要看后面是十的几次方。有时做定性检查时就只报了阳性或者阴...
作者:辛庆红; 陈杭薇; 王四海; 李继成 期刊:《解放军医药》 2005年第01期
人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,hRSV)为呼吸道副黏液病毒,是婴幼儿下呼吸道感染的主要原因[1],近几年越来越多的证据证明hRSV也是老年人及免疫低下病人重要的感染病原体[2].现将我们建立的扩增hRSV M2-1的方法报告如下.
作者:杨丽娟; 翁绳美; 林志雄 期刊:《福建医科大学学报》 2005年第02期
目的获取大鼠内皮抑素的cDN断,并构建融合蛋白的原核表达载体.方法以大鼠脑组织总RNA为模板,采用RT-PCR法从中扩增内皮抑素基因,并将获得基因重组入pThiohis表达载体,重组子经双酶切、PCR及测序鉴定.结果从大鼠脑组织中成功扩增内皮抑素的cDN断,并将其克隆入pThiohis载体,经双酶切、PCR及测序鉴定,产物大小及基因序列与预期值相符. 结论成功构建大鼠内皮抑素基因的重组克隆pThiohis-Endo.
作者:郭慈仁; 欧启水; 李良庆 期刊:《福建医科大学学报》 2004年第03期
目的探讨从小鼠骨髓分离纯化及大量扩增树突细胞(DC)的方法,并对其行免疫表型和形态鉴定.方法制备Balb/c小鼠骨髓细胞,利用0.83%NH4Cl-Tris溶液、抗鼠CD4/CD8/CD45R单克隆抗体和补体溶液,依次去除红细胞、淋巴细胞、单核-巨噬细胞、粒细胞等混杂细胞以获得纯化的DC,再将其培养于含有小鼠重组的粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(mGM-CSF)和白细胞介素4(mIL-4)的RPMI 1640营养液中,培养第6~8天收集悬浮的细胞,电子显微镜观察细胞形态并...
病毒变异产生大杀伤力 美国军队病理研究所的病理学家杰弗里·陶本伯格(Jeffery Taubenberger)证明1918年的流感病毒与猪流感病毒十分相似,是一种与甲型流感病毒(H1N1)密切相关的病毒.陶本伯格所在的研究所保留有西班牙流感死亡者的肺组织,他与同事利用遗传学技术聚合酶链反应的方法(PCR)对其中一位21岁士兵的肺部组织进行基因扩增和转录,找到了一些西班牙流感病毒的RNA(核糖核酸)碎片.
作者:朱研; 苗书魁; 马文戈; 李金娜; 魏玉荣; 汪萍; 魏婕; 米晓云; 黄炯 期刊:《新疆农业科学》 2018年第03期
【目的】扩增口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)基因组5’端序列,为获得基因组全长准备基础。【方法】将FMDV O/Akesu/58 CE39A株液氮冻存基因组RNA反转录三次,对cDNA的5’端序列进行扩增、克隆、测序。【结果】以cDNA1与cDNA3为模板,用LA Taq DNA polymerase、EX Taq DNA polymerase、PrimeSTAR HS DNA polymerase及3对引物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均未扩增出5’端目的片段;以cDNA2为模板,用LA Taq DNA polymerase为扩增酶,两对引...