作者:张婕; 严宏; Marjorie; F.Lou 期刊:《国际眼科》 2020年第03期
目的:通过建立硫醇转移酶(TTase)基因敲除小鼠模型,观察其晶状体形态和生化方面随年龄的改变,探讨TTase在晶状体氧化还原系统中的重要作用及参与年龄相关性白内障形成的机制。方法:建立TTase基因敲除小鼠模型并进行基因型鉴定。裂隙灯观察TTase基因敲除型和野生型小鼠白内障随年龄的发生情况。检测小鼠晶状体中谷胱甘肽(GSH)含量。Western blot检测晶状体中氧化产物蛋白质二硫化物(PSSG)的变化。免疫共沉淀法鉴定形成PSSG的蛋白质...
几乎一个多世纪以前首次提出的一个关于癌症始发机制的假设经受住了时间的考验。当时,德国生物学家Theodor Boveri提出.细胞分裂的失败可能会产生四倍体细胞(含有双份的染色体),后者然后进行多极有丝分裂,导致可诱发癌症的基因组不稳定性。Fujiwara等人通过用一个肌动蛋白抑制因子来阻断细胞分裂、产生四倍体细胞的方式验证了这一假设。所获得的细胞在试管中能发生转化,还能在小鼠身上自发产生肿瘤。转化的细胞表现出很强的...
世界上“最丰富”的蛋白质是什么?要回答这个问题可以从不同的角度入手,如从人类自身的角度,问题的答案是:胶原蛋白。皎原蛋白是人体中最丰富的蛋白质,其含量介于25%~35%。而对于单个细胞来说,含量最丰富的蛋白质则是肌动蛋白,它被称为真核细胞的“管家蛋白”。但当我们不考虑单个细胞或某个物种时,可以说,世界上最丰富的蛋白质是植物进行光合作用时的关键酶——1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(下文简称光合酶)。
作者:徐勤枝; 丁新民; 霍艳英; 张开泰; 颜贤忠; 周平坤; 吴德昌 期刊:《中国生物化学与分子生物学报》 2005年第04期
为了鉴定hHBRK1的相互作用蛋白,通过DNA重组构建重组表达质粒pGEX-hHBRK1,并以谷胱甘肽-Sepharose 4B亲合层析法,获得纯化的重组融合蛋白GST-hHBRK1.以小鼠心肌组织为研究对象,采用GST pull-down技术结合Western印迹法,证实hHBRK1与小鼠心肌肌钙蛋白T Ea亚型(Ea-cTnT)相互作用.结果提示,hHBRK1与Ea-cTnT结合,可能参与心肌微丝的聚合,为小鼠cTnT众多的剪接体,提供了一种可能的功能定位.
作者:郑斌; 温进坤; 韩梅 期刊:《中国生物化学与分子生物学报》 2005年第02期
hhlim(human heart lim)是从人胎心cDNA文库中筛选克隆的一个新基因,作为LIM家族的新成员参与心肌肥大的发生发展过程.为了进一步研究hhLIM在心肌肥大发生过程中的作用,以C2C12细胞为研究对象,以心肌肥大强效刺激因子内皮素-1(ET-1)为诱导因素,探讨hhLIM与肌动蛋白的相互作用及其影响细胞骨架的分子机制.RT-PCR、Western印迹和细胞免疫荧光分析结果表明,心肌肥大刺激因子ET-1在诱导心肌肥大标志基因BNP和肌动蛋白表达的同时,使hhLI...
作者:付福建; 郑周海; 史晓红; 娄方练; 宋飞; 刘睿 期刊:《基因组学与应用生物学》 2019年第10期
尽管近年来骨质流失的相关机制研究越来越多,但双膦酸盐治疗骨质疏松性髋骨部骨折的作用机理仍还未被充分认识。为了探讨双磷酸盐对破骨细胞的作用机理,本研究借助流式细胞仪检测了破骨细胞的凋亡坏死情况;通过免疫荧光实验表征了破骨细胞肌动蛋白,以及重要的雌激素受体α(ERα)蛋白因子变化情况。结果表明:阿仑膦酸钠强烈诱导了破骨细胞凋亡,同时介导肌动蛋白不规则化,引发细胞结构坍塌;阿仑膦酸钠以增强ERα活性的方式,协同诱导了细...
封面图片提供人:冉海莹,实验师,第三军医大学生物医学分析测试中心。封面图片说明:牛肺动脉内皮细胞(BPAEC),蓝色为细胞核,红色为线粒体,绿色代表F-肌动蛋白。
作者:王丽; 黎妃凤; 张文波; 陈贵林; 林晓飞 期刊:《草业学报》 2012年第04期
利用兼并PCR及RACE技术克隆了西伯利亚白刺的肌动蛋白基因(Nitraria sibirica Actin,NsAct),并对其基因结构和表达特性进行了分析。所克隆的NsAct cDNA全长序列为1 831bp,包含1 134bp的开放阅读框,编码377个氨基酸;基因组DNA全长序列为2 913bp,包含5个外显子和4个内含子。系统进化分析结果显示,NsAct与其他植物的肌动蛋白基因具有较高的同源性,与芒果(无患子目)亲缘关系最为接近。基因表达特性分析的结果显示,该基因在根、茎、...
作者:孙嘉璐(综述); 苏玉虹(审校) 期刊:《锦州医科大学学报》 2010年第04期
肌动蛋白是细胞骨架的主要组成成分,cofilin作为肌动蛋白结合蛋白中的一种,对肌动蛋白活性起到重要调节作用。cofdin广泛分布于各组织中,在多种细胞中表达,如平滑肌细胞、癌细胞、神经细胞等等。在很多疾病的发生于发展中起着非常重要的作用,这些疾病都与影响细胞骨架的蛋白相联系。近年来cofilin作为靶蛋白已逐渐成为研究肿瘤转移、生殖系统疾病、神经系统疾病、循环系统疾病等的研究热点。本文系统的对cofilin与疾病的相关...
神经变性疾病的关键蛋白质 神经轴突的生长对于大脑的功能至关重要,如果神经轴突发育不正常,便可能造成亨廷顿舞蹈症、阿兹海默症、肌萎缩性侧索硬化症等神经变性疾病。肌动蛋白和微管是推动神经轴突生长的关键。肌动蛋白控制神经轴突生长的方向,
作者:黄孝闻; 王绪平; 张扬; 寿旦 期刊:《中国现代应用药学》 2019年第13期
作者:韩悦; JM; Pasquet; A; Nurden; 王兆钺; 阮长耿 期刊:《中华血液学》 2005年第03期
目的检测凝血酶受体活化过程中血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰ bα的动态分布及其细胞骨架蛋白的改变,揭示GP Ⅰ bα的异位分布机制与凝血酶受体在血小板信号传递中的作用.方法以凝血酶受体活化肽(thrombin receptor activating peptide,TRAP)诱导血小板活化,应用流式细胞术比较刺激前后血小板膜表面GPⅠ bα及P-选择素的表达,并通过转移电泳及免疫沉淀技术,分析细胞骨架中GP Ⅰ bα、肌动蛋白、肌球蛋白的变化.观测细胞松弛素(Cytochalasin)D与...
作者:濮孟辉; 金东岭; 田珂 期刊:《中国全科医学》 2005年第14期
目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)对瘢痕成纤维细胞中纤维粘连蛋白(FN)和肌动蛋白(α-actin)表达的诱导作用,探讨TGF-β1与瘢痕挛缩的关系.方法采用细胞培养、免疫组化、图像分析技术,观察在不同含量TGF-β1的作用下,瘢痕成纤维细胞FN和α-actin的表达情况.结果不同含量的TGF-β1诱导瘢痕成纤维细胞表达FN和α-actin的作用不同,分别以25~100 μg/L和10~50 μg/L为有效;与正常瘢痕组织相比,增生性瘢痕的成纤维细胞在表达FN和α-actin方面,...
作者:王秋萍; 赵静苗; 贾佳; 路娟; 胡继宏 期刊:《中外医疗》 2017年第03期
目的探讨组织激肽释放酶1(KLK1)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的影响。方法选取2015年3—7月购买的大鼠BMSCs,将大鼠BMSC细胞分为3组即正常组、组织激肽释放酶1组、5-Aza组。采用RT-PCR分别对诱导培养后的大鼠BMSCs进行心肌细胞特异性蛋白Actin、c-Tn I和Desmin的检测,并用Western blot免疫印迹分析c-Tn T蛋白表达量。结果 RT-PCR检测显示,5-Aza诱导的BMSCs(1.964±0.805)在心肌特异性蛋白Actin RNA、c-Tn...
作者:杨崇志; 张会堂; 王公升; 周海全; 马驰; 胡大海 期刊:《中国美容医学》 2010年第07期
目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导成纤维细胞转分化的影响,探讨其抗瘢痕纤维化的潜在作用。方法:体外培养成人正常皮肤成纤维细胞,利用免疫荧光细胞化学法观察、分析PPARγ配体15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)及其激动剂曲格列酮对TGF-β1诱导的α平滑肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,利用Western blot、实时荧光RT-PCR技术检测PPARγ激动剂对TGF-β1诱导的α-SMA蛋白及mRNA水平的影响...
作者:李垚艳; 梁宸; 杨春梅; 王双露; 李金旺; 冯宪敏 期刊:《中国兽医学报》 2018年第09期
棘阿米巴角膜炎的临床诊断比较困难,以角膜刮片的病原学诊断为主,样本采集困难,临床诊断率低。本研究构建了棘阿米巴原虫actin1基因进行原核表达载体,并进行鉴定。以棘阿米巴滋养体cDNA为模板,通过特异性引物,经聚合酶链反应,获得actin1基因开放阅读框(ORF)片段,进行克隆及序列分析,经双酶切,连接,构建重组表达载体pET22b(+)-actin1。将重组载体转化入大肠杆菌(E.coli)DH5α,筛选出阳性菌落,经PCR扩增和酶切鉴定后,阳性质粒...
作者:宋洪元; 曹必好; 丁建刚; 雷建军; 宋明 期刊:《农业生物技术学报》 2004年第04期
结合Cre/lox定位重组系统和杂种一代的育种特点,构建了反义肌动蛋白雄性不育基因表达载体pCABARTAAct和相应的恢复基因表达载体pBINPLUSCre。将位于质粒pSTAAct中的反义肌动蛋白雄性不育基因表达盒(含TA29启动子、反向插入TA29启动子下游的Actin基因及Nos终止子)切下插入中间克隆载体pGloxp两个同向lox位点之间,再将上述表达盒连同lox位点切下插入pcAMBar,获得以除草剂Basta为筛选剂的反义肌动蛋白雄性不育基因表达载体pcABARTA...
作者:唐伊; 谭金龙; 罗启慧; 黄超; 刘文涛; 陈正礼 期刊:《中国细胞生物学学报》 2018年第08期
为了探究SIF对肌肉生长的影响,我们用6周龄SD雄性大鼠作为实验对象,运用苏木精–伊红染色法、免疫组织化学法和实时荧光定量PCR法研究不同浓度大豆异黄酮(soybean isoflavone,SIF)作用下的雄性大鼠肌纤维形态学变化和α-肌动蛋白(α-actin)、肌球蛋白(myosin)及其m RNA表达量的变化。苏木精–伊红染色结果显示,中、高剂量组肌纤维直径极显著高于溶媒对照组(P〈0.01)。免疫组织化学结果显示,中、高剂量组α-actin表达量极显著...
作者:郭肖岩; 何纳 期刊:《国际医学寄生虫病》 2004年第04期
已经证明致病微生物的蛋白酪氨酸磷酸酯酶(FTPase)能够破坏宿主细胞肌动蛋白的细胞骨架。为了探索溶组织内阿米巴的分泌性酸性磷酸酶(SAP)是否具有磷酸酪氨酸磷酸酯酶的活性以及这种活性参与破坏宿主细胞的潜力,研究者首先测定了能够在酸性环境中水解对硝基磷酸盐(p-NPP)的