以认知结构理论为基础,依据学生原有认知创设问题串,引领学生深入探讨动物细胞培养的过程、条件、应用。强化和深化学生的知识运用能力、知识迁移能力、实验设计能力,深化学生对动物细胞培养的理解。
作者:李井春; 方南洙 期刊:《中国牛业科学》 2006年第05期
用改进的Willaden去核法与McGrath-Solter去核方法对延边黄牛卵母细胞进行去核操作,比较其去核操作效率。结果表明,本实验改进的Willaden去核法——挤压去核法,无论在去核操作时间(1.0min/枚,P〈0.05)上,还是在去核效率(949/5,P〈0.01)上都显著地高于McGrath-Solter去核法(1.4min/枚、72%)。表明改进的Willaden去核方法是一种适用于延边黄牛卵母细胞操作的快速、简单、实用的去核方法。
<正>盘古开天,华夏神勇,千秋伟业。育构木为巢,钻燧取火;以佃以渔,狩猎采集。石刀蚌镰,铁具排灌,垄作代田耕耙荣,教稼穑,艺五谷先河,杨凌后稷。和谐崛起梦想,民族兴嘹亮号角鸣,解国本民生,诚朴勇毅;绿色生态,创建高产,食品安全,水稻发明,胚胎体细核移植,免税赋,创邦强民富,虎啸
动物克隆随着"多莉"羊的诞生而逐渐受到人们的关注。动物克隆的核心是细胞核的再程序化。从动物克隆的技术流程、理论基础以及应用领域等方面作一综合论述。
作者:项智锋; 谢红兵; 张金洲; 王清华; 张德福 期刊:《动物医学进展》 2005年第07期
韩国汉城国立大学教授Woo Suk Hwang等于2005年5月19日在《Science》网络版上(doi:10.1126/science.1112286)了他们的最新研究成果:将患者的表皮细胞核移植入她人捐赠的卵母细胞中,从而获得11株人胚胎干细胞系。不管是生长于患者来源的人饲养层,还是生长于无任何遗传关系的人饲养层,这些细胞系的建系率都很高,且建系率与核移植供体的性别和年龄无关。
作者:杨正田; 兰国成; 沈伟; 吴晓洁; 徐秀英; 谭景和; 邓继先 期刊:《生物技术通讯》 2004年第05期
构建了t-PA突变体山羊乳腺特异表达载体pGBCt-PAm,包括长4.1 kb的山羊β-酪蛋白启动子以及启动子前2.4kb的鸡β-珠蛋白绝缘子序列;并检测了表达载体在家兔乳腺的瞬间表达,验证了载体的有效性.通过电击和脂质体2种转染方式转染了山羊胎儿成纤维细胞(GFFC),经过筛选检测,得到了7株能大量扩增的PCR阳性细胞株.其中的2株(M9,M10)已经进行了首次细胞核移植和胚胎移植试验,2只受体羊2个情期未见返情.
作者:彭黎明; 聂李平 期刊:《中华检验医学》 2005年第12期
答:克隆也是所谓的核移植,即将供者的体细胞核移植到一个预先去除了细胞核的卵母细胞中,融合成含有供者遗传信息的全能细胞,后者进一步发育成囊胚。当囊胚内细胞取出到体外定向培养产生多能干细胞,这些细胞可进一步分化形成特定的专能干细胞,相应组织甚至器官,即所谓的组织克隆。如将囊胚种植入子宫内,继续发育将会得到与供体表现型与基因型完全一样的子代,即所谓的成体克隆。
作者:周竹娟; 郑健; 徐炎 期刊:《卒中与神经疾病》 2008年第02期
目的 建立制备皮质神经元细胞核的方法,以便用于核移植研究。方法 (1)采用胎龄17d的胎鼠进行皮质神经元的分离培养,用抗MAP2和NeuN免疫细胞化学法进行鉴定;(2)用梯度离心法制备神经元细胞核,并用HE染色、免疫荧光染色、透射电镜检查等方法进行鉴定,用台盼蓝染色检测其活性。结果 (1)胎鼠皮质神经元呈多角形,伸出多个突起,MAP2染色显示神经元细胞浆和突起呈免疫反应阳性,NeuN染色显示神经元细胞核呈免疫反应阳性,部...
作者:尚江华; 徐如祥; 姜晓丹; 雷安民; 邹雨汐; 秦玲莎; 滕晓华; 郑行; 崔胜 期刊:《中华神经医学》 2005年第09期
目的通过建立骨髓基质细胞核移植的方法,为进一步从克隆囊胚的内细胞团细胞分离培养出全能性的胚胎干细胞并用于治疗性克隆等研究奠定基础.方法超排获得的兔成熟卵母细胞去核后,将同种的单个骨髓基质细胞核注入其内;电融合后,经离子霉素(ionomycin)和6-甲氨基嘌呤(6-DMAP)激活,用10%胎牛血清(FBS)的TCM-199进行体外培养直至囊胚阶段.结果实验对147个卵母细胞去核,去核成功率为70.75%(104/147);注核后有82.69%(86/104)的卵细胞保持...
作者:李垚; 薛立群 期刊:《黑龙江动物繁殖》 2005年第03期
小白鼠颗粒细胞核移植技术是指将小白鼠的颗粒细胞,通过显微手术和细胞融合的方法,移植到一个去核卵母细胞中,构成重组胚胎(克隆胚胎),然后移植给受体,获得与核供体基因型相同的后代(克隆动物)的生物技术.目前,在核移植操作过程中还存在着许多问题,影响了核移植的效率.
作者:锡建中; 贾青 期刊:《上海畜牧兽医通讯》 2005年第03期
克隆即clone的音译,来源于希腊文,表示用离体的细枝或小树枝增殖.动物克隆即动物的无性繁殖,就是将供体细胞核移人去核的卵母细胞中,使后者不经精子穿透等有性过程即可被激活、分裂并发育成个体,使得核供体的基因得到完全复制,也称为动物体细胞克隆.
作者:王立虎; 黄俊成; 王惠川; 施巧婷; 郭志勤 期刊:《草食家畜》 2004年第04期
将体外成熟的卵母细胞按不同成熟时间进行分组处理,并进行克隆胚胎的生产,实验表明,成熟时间为20-22h并在23-25h完成融合及激活的重构胚其融合率,卵裂率及体外培养到达桑葚胚/囊胚的比例分别为76.2%(176/231)、51.1%(118/231)和21.7%(23/106),而成熟时间为16~18h及24h以上的卵母细胞进行核移植胚胎的生产,其重构胚各种相应的数据分别为44.9%(84/187)、20.9%(39/187)、10.8%(4/37)以及71.1%(263/367)...
作者:崔龙波; 周雪莹; 王敏强; 黄秀英; 孙方臻 期刊:《烟台大学学报·哲学社会科学版》 2005年第01期
为探讨细胞核与细胞质调控减数分裂的机制,对昆明白小鼠GV期卵母细胞进行了GV移植研究.将6~8周龄小鼠GV期卵母细胞分别与6~8周龄和3月龄小鼠GV期卵母细胞进行GV互换,所形成的3种GV-胞质体复合体的融合率(85.0%~89.8%)和3种重组卵母细胞的成熟率(93.9%~96.2%)并不因小鼠年龄的改变而有所变化.经人工活化后,3种重组卵母细胞形成原核期胚和2-细胞期胚的比率(分别为80.5%~85.4%和51.2%~55.4%)也不因不同年龄小鼠卵母细胞所带来的...
作者:徐小明; 雷安民; 华进联; 窦忠英 期刊:《遗传》 2005年第02期
核移植与治疗性克隆在畜牧业生产以及生物医学上具有广阔和诱人的应用前景.文章分析指出卵母细胞质量与供核细胞重新编程是影响体细胞核移植效率及克隆动物异常的主要因素,阐述了治疗性克隆所面临的一些基本问题及出路:治疗性克隆以核移植技术为基础,核移植所面临的一些问题也直接影响着治疗性克隆的临床应用;核移植胚胎干细胞分离培养效率的高低以及向重要功能细胞定向分化是治疗性克隆的前提;成体干细胞可用于一些重大疾病的治疗...
作者:蒋晓明; 王锋 期刊:《四川动物》 2004年第04期
成熟促进因子(maturation promoting factor,MPF)由催化亚单位P34cdc2和调节亚单位cyclin组成,对细胞周期的调控起着重要作用.目前,在核移植研究中发现:供体核在MPF的作用下发生核膜破裂(nuclear envelop breakdown,NEBD)和早熟染色体凝集(premature chromosome condensation,PCC),促进了核、质蛋白质因子的交换,有利于核重编程的进行.PCC还会对供体核的倍性及形态产生影响.
作者:朱良成; 芮荣 期刊:《上海农业学报》 2004年第02期
猪器官的解剖结构和生理生化特性与人类的相近,猪有可能成为人类异种器官移植的首选供体动物."多莉"羊的诞生,启发了人们改造猪器官用于异种移植的思路,大大促进了猪核移植技术的发展.该文对猪核移植及其相关技术的研究进展加以综述分析,以供参考.
克隆概念从被创造出来应用至今,已经有一个多世纪的历史了.在这100多年的应用过程中,克隆的含义发生了显著的改变.克隆这个词最初是应用于园艺学,随着克隆技术的发展,克隆概念不断获得新的含义,扩展到了细胞培养技术、核移植技术、以及DNA序列的扩增技术.克隆概念的发展历史表明,仅仅因为部分特征的重叠把多个概念简略为一个概念是危险的,草率的命名法容易导致大众对概念的曲解.
作者:项智锋; 张金洲; 王清华; 张德福 期刊:《黑龙江畜牧兽医》 2005年第11期
采用胞质内注射法进行猪体细胞核移植,对去核、激活和培养等关键技术过程进行研究.结果表明:(1)点压法、挤压法对卵母细胞的去核率明显高于盲吸法(三者分别为62.5%、64.6%、50.7%,P<0.05).对早成熟的卵母细胞(36~44h)进行去核可明显提高去核效率(P<0.05),在36~38 h、39~41 h、42~44h去核率分别为60.9%、67.8%、64.3%,而45~48 h为48.4%.(2)体细胞预激活有助于提高核移胚卵裂率(28.0%、20.1%,P<0.05).钙离子载体A23187单独或...
作者:崔龙波; 周雪莹; 王敏强; 黄秀英; 孙方臻 期刊:《动物学》 2005年第06期
为探讨卵母细胞减数分裂异常及其与年龄相关变化之间的关系,对不同年龄段昆明白小鼠卵母细胞进行了生发泡(GV)移植研究.应用显微操作和电融合技术,将6~8周龄小鼠GV期卵母细胞分别与6月龄、9月龄和12月龄小鼠GV期卵母细胞进行GV互换,所形成的6种GV-胞质体复合体的融合率(89.7%~95.6%)和6种重组卵母细胞的成熟率(83.5%~88.2%)并不因小鼠年龄的改变而有所变化.成熟的6种重组卵母细胞经体外受精后,形成原核期胚和2-细胞期胚的比率(...