作者: 期刊:《生物医学工程与临床》 2019年第06期
2019年8月30日,国家市场监督管理总局(国家标准化管理委员会)批准了501项国家标准。其中6项国家标准规定了包括核酸提取、核酸纯化、核酸检测、高通量测序、目标基因捕获等方法或试剂盒质量评价规范。
作者: 期刊:《中华人民共和国农业部公报》 2019年第06期
为确保兽用生物制品质量安全,防止非洲猪瘟病毒污染相关制品,根据《中华人民共和国动物防疫法》《重大动物疫情应急条例》《兽药管理条例》等法律法规规定,自2019年5月25日起,各兽用生物制品生产企业(以下简称'生产企业')应对兽用生物制品生产过程中使用的毒种、原辅材料、半成品、成品等全面开展非洲猪瘟病毒核酸检测,并做好检测结果报送和后续处置工作。现就有关事项公告如下。
作者:杨婷; 王远虹; 曾晶; 周璇; 刘满清; 小林宣道; 彭劲松; 周敦金 期刊:《公共卫生与预防医学》 2009年第01期
世界卫生组织估计全世界每年腹泻病例高达30~50亿例次,是人类健康和公共卫生面临的重大问题。诺如病毒(Norovirus)是非细菌性急性病毒性胃肠炎暴发的主要病原,常在医院、学校、餐馆、家庭及其它人群中引起暴发;也是引起儿童和成人散发性急性胃肠炎的主要因素。诺如病毒属于杯状病毒科,诺如病毒属,其基因组为单股正链RNA。诺如病毒可分为5个基因组,其中GII型是引起人类感染的主要病原。
作者:刘敏; 陈秀英; 梅少林; 陈沙彬; 雷永良 期刊:《中国现代医生》 2016年第20期
目的比较5种核酸提取法提取HIVRNA的效率。方法收集2015年HIV病毒感染者血样,使用不同核酸提取方法平行检测ct值及载量值,分析检测的检出率、敏感性、变异系数、稳定性,并进行耐药扩增。结果5种提核酸方法检出率国产磁珠法最高,5种方法差异无统计学意义(x2=7.98,P=0.09);Ct值从小到大顺序为:国产磁珠法≥离心柱法〉大批量法≥进口磁珠法〉试剂盒自带法;重复性比较表明国产磁珠法检测结果较稳定;核酸胶显示国产磁珠法...
作者:杜冬冬; 刘斌; 王朵; 屈娅荣; 焦欢 期刊:《预防医学情报》 2018年第11期
目的探索免核酸提取进行Real-time PCR在流感病毒细胞株中的应用。方法选取甲型H1N1、H3N2、B-Yamagata、B-Victofial4种亚型流感病毒细胞株各10株,先进行血凝实验(Hemagglutination test,HA),再进行核酸提取与病毒液用Real-timePCR分别进行甲、乙、4种亚型核酸检测,比较其CT值差异。结果流感病毒HA几何平均滴度(GMT)和CT值的几何平均值无线性关系。甲、乙型核酸提取和不提取的CT值范围分别为10.5-14.7和10.5-18.2,甲...
作者:黄学文; 潘杰; 赵兰静; 吴茵; 朱菊平 期刊:《检验医学》 2018年第04期
RT-PCR的指数扩增是一项很灵敏的技术,可以检测很低拷贝数的RNA。目前,市级动物疫病预防控制中心均可开展此项检测,但由于市级只对各种重大动物疫病的病原进行初步检测,检测任务量不是很多, RNA的提取多由手工操作。文中笔者就实际操作中的注意事项和大家分享。
摘要本发明涉及一种分段式吸附磁珠方法、存储设备及核酸提取仪器,特征部分在于:根据试剂量设置至少两个停顿点;控制磁珠吸附装置动作,使磁珠吸附装置上的磁棒套在每个所述停顿点停顿,进行磁珠吸附;设置停顿点,磁棒套在每个停顿点做适当停顿,为分段吸磁方式,确保磁珠的充分吸收,有利于提高核酸的提取效率.本发明具有的有益效果:在支撑架上设置收纳用的容纳腔,使用方便,且简洁.同时,支撑架采用钢制材料,钢材具有很好的延展性和可...
作者:赵亚玲; 郑直 期刊:《基础医学与临床》 2019年第06期
目的介绍一种基于捕获的高通量DNA检测技术,无需核酸提取,适用于不同样品的各种应用,以提供遗传分析有力的技术手段。方法全血、唾液、干血斑和口腔拭子等样品裂解后释放DNA,经热变性后,通过与一系列特异探针杂交使靶DNA被捕获至96孔板;洗去未结合探针后,直接利用特异性引物进行荧光定量扩增(qPCR),或用酶连接连续排列的杂交探针,形成两端为特定序列的单链DNA模板,最后用通用引物进行qPCR分析;以全血中P16基因为靶标评估免提核酸技...
作者:王浩; 周俊宇; 苏锦华 期刊:《今日畜牧兽医》 2019年第03期
猪丹毒是一种生活中较为常见的急性或慢性传染病,由猪丹毒杆菌(也称红斑丹毒丝菌)所引起,猪是主要发病群体,是屠宰检疫中的重点之一[1]。本实验选择在屠宰检疫过程中较常见的猪丹毒杆菌作为研究对象,采用磁珠法、离心柱吸附法和热提取法三种方法提取阳性样本猪丹毒杆菌核酸,通过实时荧光PCR比较提取的效果。磁珠法在大批量的样品处理时,不仅省时省力、提高了工作效率、减少化学试剂可能对实验人员的伤害,还能节约大量成本;离心柱吸...
作者:吕二盼; 周正; 周巍; 李洋洋; 张薇; 吴涛; 曾小盼; 李波; 张伟 期刊:《食品工业科技》 2012年第16期
目的:研究从鸭血、猪血中提取DNA的快速简便方法并建立多重PCR鉴别方法。方法:用KI提取法从固体块状鸭血、猪血中提取DNA,经PCR扩增检测提取效果。建立多重PCR方法鉴别动物源性食品中的鸭血、猪血成分,并对市售动物源性血制品进行检测。结果:这种方法提取到的DNA纯度较高,凝胶电泳条带整齐,背景清晰;PCR反应能扩增出目的条带。多重PCR能同时扩增出鸭和猪的条带。结论:这种改进的DNA抽提方法能获得高纯度DNA,比传统方法安全、简...
分子检测方法由于具有的高敏感性、高通量和适合的价格,越来越频繁的应用在兽医诊断中.在检测过程中,常需要对检测样本进行核酸提取纯化,需要投入大量的时间,其复杂的提取步骤容易造成交叉污染.为能更加快速准确的进行疫病检测,免核酸提取产品成为了疫病检测的最佳选项.本文通过对禽流感病毒培养物、临床样本中的病毒核酸进行研究,用以评价免核酸提取与常规核酸提取两者在阳性符合率、病毒复制、检测效果等方面的差异,为临床疫病检...
作者:陈建仁; 李驰; 关惠恒 期刊:《中国实用医药》 2018年第09期
目的探讨超敏荧光定量聚合酶链反应(PCR)法核酸检测与乙型肝炎(乙肝)两对半联用在乙肝防控中的临床应用。方法 155例乙肝患者分别采集血清样本,利用化学发光法和基于磁珠法自动化核酸提取的超敏荧光定量PCR法分别进行乙肝两对半和乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)检测。结果 155例样本中乙肝两对半共检出12种血清类型,其中小三阳占58.06%,大三阳占20.00%。155例样本超敏荧光定量PCR总阳性率为62.58%,检测下限低至10 IU/ml,其中...
作者:叶贤林; 周一炎; 朱为刚; 王良华; 尚桂芳; 杨立新 期刊:《现代预防医学》 2005年第04期
目的:探讨在加样仪上实现血液样本汇集,在Roche MPLC上全自动提取样本HBV DNA,在COBAS AM-PLICOR上进行扩增和检测的方法,为血液HBV全自动核酸筛查提供应用依据.方法:在酶联免疫吸附实验(ELISA)筛查血液基础上,应用STAR2000加样仪自编程序进行全自动血样汇集(24人份),在MPLC上全自动方法提了样本核酸,应用PCR方法在COBAS AMPLICOR进行扩增和检测分析结果,从检出限量及抗干扰能力方面进行考评.结果:用国际标准核酸质控品考评及深圳...
作者:丁春宇; 张大丙 期刊:《中国兽医》 2007年第02期
PCR或RT—PCR因其操作简便快速、灵敏度高已越来越广泛的应用到病毒核酸的检测中,但其检测效率在很大程度上受到核酸提取速度和质量的影响。经典的病毒核酸提取方法主要包括变性剂裂解、蛋白酶K处理、有机溶剂抽提、乙醇或异戊醇沉淀等操作。众多的步骤和多次的转移操作以及在每个步骤上消耗的时间往往会降低核酸提取的效率。本文介绍了一种改进的异硫氰酸胍法,经多次提取鸭瘟疱疹病毒(Duck plague herpesvirus,DPV)的基因组D...
本文强调了动物源性成分对食品安全的影响,强调了提高食品安全的重要性,主要通过试验的方法,对肉制品中混合动物源性成分的快速分子鉴别方法进行了研究,希望能够为有关人员提供参考。
作者:卢占军; 丁鹏; 刘映雪; 黄爱军; 胡威; 周小娟; 谢昌平; 姚林建; 夏宜林 期刊:《中国南方果树》 2016年第06期
为找出较优的单头柑桔木虱黄龙病菌核酸提取方法,以饲养于温室内感染柑桔黄龙病的甜橙树上的柑桔木虱为试材,采用3种方法提取单头柑桔木虱的总核酸,对提取的核酸样品进行质量检测,并利用柑桔黄龙病菌特异性引物OI1/OI2c以及r-rplLAs/f-rplLAs分别进行了常规PCR和qPCR检测。结果表明,3种方法均可以成功提取到单头柑桔木虱总核酸且均能检测到黄龙病菌。3种方法各有优缺点:李菁的方法步骤简单、历时短,提取的核酸浓度较高,但核酸质量...
作者: 期刊:《中国医疗器械信息》 2015年第10期
作者: 期刊:《中国医疗器械信息》 2015年第10期
作者:张险朋; 董瑜; 温贤诚; 徐振娜; 殷三鸿; 黄炳炽 期刊:《动物医学进展》 2014年第11期
为比较不同核酸提取方法检测禽流感病毒敏感性的差异,将 H5N1禽流感抗原做10-2-10-10稀释,分别用 Trizol 法、磁珠法和膜吸附法提取上述抗原稀释度核酸模板,采用荧光 RT-PCR 对其进行评价。结果表明,在不同稀释度的抗原的检测中,3种核酸提取方法以膜吸附法提取效率最高,其依次为磁珠法、Trizol 法,经方差分析,3种核酸提取方法之间存在显著性差异(P<0.05)。说明 3种核酸提取方法提取效率存在显著差异,核酸提取效率的...