作者:陈万宏; 刘东伟; 黄圣明 期刊:《中国糖尿病》 2019年第12期
作者:汪亚君; 左湘; 黄靓; 马国达 期刊:《广东医科大学学报》 2016年第04期
目的构建含糖尿病相关锚定重复序列蛋白(DARP)基因的重组腺病毒过表达及RNA干扰载体。方法应用PCR技术扩增大鼠DARP基因序列,设计并合成shRNA序列,分别插入表达载体GV-314和GV-119,经基因测序鉴定。用重组DARP过表达和shRNA表达穿梭载体与辅助包装质粒pBHGloxΔE1共转染人胚肾细胞HEK293,进行病毒包装、出毒和扩增,采用终点稀释法测定病毒滴度。用重组腺病毒感染大鼠H9c2细胞,荧光显微镜观察绿色荧光强度,Western Blot检测DARP蛋...
作者:甘世虎; 崔晓腾; 马锦征; 房丽娇; 刘明霞; 任媛媛; 曹晓娜; 杨洁; 苏超 期刊:《中国生物化学与分子生物学报》 2018年第07期
基因特异性敲除的细胞常用于生物学研究。近些年兴起的CRISPR-Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats-Cas9 nuclease)基因编辑技术越来越广泛地用于基因特异性敲除的实验中。本实验通过利用CRISPR-Cas9基因编辑技术,实现对大鼠心肌H9c2细胞Tudor-SN(tudor staphylococcal nuclease)基因的敲除,并观察其对H9c2细胞周期及增殖的影响。选择PX462质粒为载体,利用软件设计能特异性识别H9c2细胞Tudor-SN基...
作者:宜全; 陈秀会; 谭芳慧; 刘英华 期刊:《中国临床药理学》 2019年第22期
作者:赵海洋; 程姝娟 期刊:《心肺血管病》 2014年第02期
目的:构建核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB) p65亚基特异的核糖核酸干扰腺病毒表达载体,验证其对p65亚基的沉默效应.方法:设计针对大鼠NF-κB p65亚基的不同干扰序列,通过质粒将其导入腺病毒,感染大鼠心肌细胞(H9C2).将感染后的心肌细胞通过RT-PCR方法和Western Blot方法检测各组NF-κB p65的基因水平表达和蛋白质水平表达.结果:成功构建了NF-κB p65亚基特异的RNAi腺病毒表达载体,获得高滴度的腺病毒液;RNAi腺病毒感染H9C2...
作者:李靳; 张长城; 王佼; 袁丁; 王婷 期刊:《时珍国医国药》 2015年第12期
目的探讨三七总皂苷(Total saponins of Panax notoginseng,TPNS)对D-半乳糖致H9c2心肌细胞线粒体氧化损伤的保护作用。方法不同浓度的三七总皂苷(5,25,50μg/ml)预处理H9c2心肌细胞4h,再采用D-半乳糖刺激细胞24h后,检测H9c2心肌细胞线粒体膜电位变化以及线粒体氧化应激相关蛋白SIRT1和PGC-1α表达情况。结果与D-半乳糖组相比,各浓度三七总皂苷均显著提高H9c2心肌细胞线粒体膜电位并能显著增加SIRT1和PGC-1α蛋白的表达量。结论三...
作者:曾志辉; 王晓莉; 叶艳琼; 王甜甜; 苏其利; 詹纪春; 申婕; 曾茂君; 赵明一 期刊:《中国全科医学》 2019年第15期
作者:杨睿; 董卓; 王梦琪; 徐蕾 期刊:《中国医药导报》 2017年第24期
目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对氧化应激诱导的大鼠H9C2凋亡的细胞保护作用及机制。方法 H9C2细胞传代培养后进行随机分组。阴性对照组(正常培养液培养),H2O2损伤组(100μmol/L H2O2作用12 h),EGCG低浓度组(10μmol/L EGCG孵育24 h后,加入H2O2作用12 h),EGCG高浓度组(100μmol/L EGCG孵育24 h后,加入H2O2作用12 h)。MTT比色法检测细胞活力,Hochest33258染色观察凋亡细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率,比色法检...
作者:韩斯嘉; 董季; 罗乐; 李洁; 陈敏; 高雪梅; 张轩萍 期刊:《中国心血管病研究》 2018年第07期
目的 本研究旨在观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)在高糖诱导H9C2心肌细胞中的表达以及其对氧化应激的作用.方法 将H9C2细胞在不同条件下干预24 h,包括正常糖浓度组(NG组)、高糖组(HG组)、高糖+CaSR激动剂组(HG+GdCl3组)、高糖+CaSR抑制剂组(HG+NPS2390组).用CCK8试剂盒检测细胞存活率;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧簇(ROS)含量;用比色法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH...
作者:张海增; 全慧; 单晓琼; 田秋云; 张福坤; 范小芳; 龚永生 期刊:《中国病理生理》 2019年第08期
作者:燕林贞; 燕钦栋; 张顺祥; 丁小青; 李康 期刊:《中国病理生理》 2018年第11期
作者:杜娜; 戴红良; 贾桂枝 期刊:《中国现代医学》 2019年第09期
目的观察在氧化应激情况下心肌营养因子-1(CT-1)的表达情况及其对心肌细胞凋亡的影响,探讨其相关机制。方法以过氧化氢刺激H9C2细胞建立氧化损伤模型,N-乙酰半胱氨酸或CT-1小干扰RNA(siRNA)与过氧化氢共同孵育以确定活性氧类(ROS)对CT-1表达的影响,以及CT-1在细胞凋亡中的作用。以丝裂原活化细胞外信号调节激酶(MEK/ERK)特异性抑制剂PD98059预处理H9C2细胞,以确定过氧化氢诱导CT-1表达的机制。结果过氧化氢可剂量依赖性地诱导CT-1...
作者:余学钊; ; 叶琦; 陶瑜 期刊:《安徽医科大学学报》 2018年第11期
目的 探讨过氧化物酶5来源的多肽(pPRDX5tide)对心肌细胞低氧损伤的保护作用。方法 应用生物信息学对心肌低氧多肽组进行分析,初步筛选在低氧后显著上调的pPRDX5tide为候选生物活性多肽,进一步对其稳定性、保守性等基本信息分析,在细胞水平对H9c2大鼠心肌细胞进行pPRDX5tide的预处理后,分别应用低氧袋和化学模拟物氯化钴(CoCl 2)建立物理和化学性低氧损伤的实验模型,检测细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)的水平;台盼蓝染色法...
作者:刘超; 韦苏; 张琨玮; 祝倩; 李烨仪; 荣玉美; 赵俊玉; 李无为; 尚曼; 宋君秋; 吴燕娜; 刘艳霞 期刊:《天津医科大学学报》 2018年第02期
作者:王晶晶; 王春梅; 林瑞超 期刊:《中华中医药》 2017年第11期
作者:陆定艳; 李靖; 孙佳; 薛维娜; 何彬; 李勇军; 王永林; 林昌虎; 刘亭 期刊:《中国中药》 2019年第17期
作者:王月; 李姗姗; 赵春明; 张美香; 王威; 蔡红星 期刊:《科学技术与工程》 2019年第07期
为探讨不同浓度的鱼藤素(deguelin)对大鼠H9C2心肌细胞活力及凋亡的影响,通过将不同浓度(0、10、50、100、500、1 000 nmol/L)的鱼藤素作用于H9C2细胞24、48、72 h,应用CCK-8法测定鱼藤素对H9C2细胞存活率的影响;划痕实验检测(0、10、50、100、500、1 000 nmol/L)浓度的鱼藤素作用于H9C2细胞24、48 h后,对细胞迁移能力的影响。应用Hoechst33342/PI双染试剂盒检测不同浓度鱼藤素(0、10、50 nmol/L)作用于H9C2细24 h后对细胞凋亡的影...
作者:王海霞; 张蕾; 刘玲娟; 刘晓燕 期刊:《重庆医科大学学报》 2017年第11期
目的:探讨Wnt/β-catenin信号转导通路在H9c2心肌细胞慢性缺氧适应中的作用及可能机制。方法:将37℃、5%O2、5%CO2、90%N2条件下培养的H9e2细胞作为实验组,低氧培养6、12、24、36、48、72h时收集细胞;将37℃、21%O2、5%CO2条件下培养的细胞作为对照组。采用Westernblot和real-timePCR技术检测13-catenin、抗凋亡因子bcl,2和survivin在不同培养时间点的表达变化。结果:5%O2培养的H9c2细胞与对照组相比,β-catenin蛋白在...
作者:孙伟铭; 张源洲; 温馨; 席雨鑫; 袁迪; 王跃虹; 魏璨; 徐长庆; 李鸿珠 期刊:《中国应用生理学》 2018年第04期
目的:探讨外源性硫化氢(H2S)恢复缺氧后适应对衰老H9C2细胞的保护作用及相关机制。方法:H9C2细胞(心肌细胞系)用30μmol/L过氧化氢(H2O2)处理2 h后再培养3 d,诱导生成衰老细胞。衰老H9C2细胞被随机分5组(n=8):正常组(Control)、缺氧/复氧组(H/R)、H/R+NaHS组、缺氧后适应(PC)组、PC+NaHS组。缺氧/复氧(H/R)模型:衰老H9C2细胞用缺氧液(无血清、无糖培养基,p H=6.8)培养3 h,然后正常培养6h;缺氧后适应(PC)...
作者:王宁宁; 王佳; 谭洪玲; 王宇光; 高月; 马增春 期刊:《中国中药》 2019年第08期
研究乌头碱(aconitine,AC)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导H9c2细胞肥大的抑制作用,并探讨其作用机制。通过AngⅡ诱导H9c2细胞肥大建立模型,并分别与不同浓度的乌头碱共同处理,Western blot法检测atrial natriuretic peptide(ANP)、brain natriuretic peptide(BNP)、β-myosin heavy chain(β-MHC)、α-smooth muscle actin(α-SMA)在蛋白水平的表达;实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测肥大基因ANP,BNP,β-MHC mRNA的表达。采用...