作者:徐璐宁; 王宇洋; 薛彬冰; 梅荣武; 张宇; 丁林贤; 苏晓梅 期刊:《中国科学院大学学报》 2019年第04期
高氨氮废水的生物处理技术因安全高效而备受关注,但反硝化细菌的分离菌源仅限于常规分离培养法所获得的不到1%的微生物,绝大多数菌株因处于活的但非可培养(“viable but non-culturable”,VBNC)状态而未能被发掘。复苏培养VBNC菌群对强化高氨氮废水的生物处理具有重要意义。本文利用复苏促进因子复苏培养高氨氮废水中的VBNC菌株,16S rRNA基因测序对其进行同源性分析,初步鉴定复苏培养的菌株归属于Gordonia和Pseudomonas属。通过测...
作者:岳靓; 陈吉祥; 杨智; 李彦林; 芮文鸿; 王永刚 期刊:《基因组学与应用生物学》 2018年第01期
复苏促进因子(Rpf)广泛存在于高G+C含量的革兰氏阳性细菌中,与细菌生长及抵抗不良环境有关,不同细菌Rpf种类和数量有一定差异。红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)KB1分离自石油污染土壤,具有高效石油降解能力和环境适应性。为探索Rpf在红平红球菌KB1适应环境过程中作用,设计了复苏因子基因特异引物,从红平红球菌KB1基因组DNA扩增出4种rpf基因。序列分析发现4种基因分别与藤黄微球菌(Micrococcus luteus)rpf基因,结核分...
作者:邵天舒; 余利岩 期刊:《国外医药》 2007年第02期
自然界中的微生物在处于不利环境时可进入休眠状态,也就是常说的“活的非可培养状态”(VBNC)。当给予适合的环境条件后又可恢复其生长活性。研究表明,某些革兰阳性菌可分泌一种蛋白质,即能够有效促进多种处于休眠期细菌复苏的生长因子,称为复苏促进因子(resuscitation-promoting factor,Rpf)。结核分枝杆菌的Rpf是一个蛋白家族,共包含RpfA~E5个成员,编码这5个蛋白质的基因与藤黄微球菌的rpf基因有显著的同源性。它们执...
作者:刘忠泉; 张宗德; 邢爱英; 陈曦; 李自慧; 古淑香; 贾红艳; 杜博平; 马玙 期刊:《国际呼吸》 2007年第18期
目的对结核分枝杆菌复苏因子Rv2450c基因克隆、并测序正确后进行融合蛋白表达、纯化。方法通过PCR扩增结核分枝杆菌H37Rv复苏因子Rv2450c基因,酶切,克隆至PGEM-TEasy质粒,测序确定插入片段的正确性,再克隆至表达载体pET30a中,并转化至BL21(DE3)中。经PCR鉴定阳性的菌液通过IPTG诱导,表达氨基端带6个连续组氨酸残基的Rv2450c蛋白,并纯化。结果获得了结核分枝杆菌复苏因子Rv2450c基因,构建了重组表达质粒,得到融合了6个连续组氨酸...
作者:邸聪聪; 胡平; 胡章立; 陈辉蓉 期刊:《应用与环境生物学报》 2014年第06期
细菌活的非可培养(Viable but non-culturable,VBNC)状态是指在一定环境胁迫条件下,一些不形成芽孢的细菌仅保留很低代谢活性但无法分裂,失去在培养基上形成菌落能力的状态.细菌的这一状态也可逆转而恢复生长形成菌落,称为复苏.自1982年这一状态被发现以来,已有60余种非芽孢菌被报道可进入VBNC状态,其中包括许多常见致病菌,从而给以菌落培养为基础的常规检测手段带来了挑战.目前VBNC菌研究领域仍以现象报道为主,对其形成条件、生...
作者:李伦; 许崇波; 李元 期刊:《生物技术通讯》 2009年第05期
复苏促进因子是一类广泛存在于结核分枝杆菌等革兰阳性菌中的蛋白质,能促进休眠菌复苏。复苏促进因子的作用机制目前仍然是未知的,然而对此类蛋白的结构域预测及核磁共振分析显示其保守区具有溶菌酶样折叠。我们简要综述了国外对此类蛋白作用机制的研究进展。
作者:师长宏 赵勇 毛峰峰 张海 白冰 江鹰 期刊:《现代生物医学进展》 2010年第11期
目的:在大肠埃希氏菌中表达结核分枝杆菌复苏促进因子结合蛋白A(resuscitation-promoting factor-interacting protein A,RipA),观察该蛋白对耻垢分枝杆菌的促生长作用。方法:采用PCR方法,从结核分枝杆菌H37Rv的DNA中扩增出编码RipA蛋白的Rv1477基因,测序正确后克隆入原核表达载体pProEx HTa,构建重组表达质粒pProEx HTa-RipA。以重组质粒转化大肠杆菌DH5a,筛选阳性重组菌株,经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(Isopropyl β-D-1-thioga...