每个科学家的工作必定是站在前人的肩膀上,再向上去攀登新的高峰。作者的研究主要涉及“蛋白质折叠问题”,许多思想火花和实验设计直接或间接地源于“胰岛素人工全合成”的“肩膀”。此文与读者分享对蛋白质折叠问题的认识,介绍中国科学家对蛋白质折叠问题研究的贡献,并以此纪念我国科学家成功地人工全合成结晶牛胰岛素50周年。
作者:时丽洁; 蒋枞璁; 王方梅; 杨平; 冯宗云 期刊:《作物学报》 2019年第09期
蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerases,PDIs)是定位于真核生物内质网中的一类蛋白,具有催化蛋白质二硫键氧化还原反应与协助蛋白质发生构型变化、类似分子伴侣的功能,参与生长发育、生物或非生物胁迫应答等方面的调控。真核生物中PDI基因家族的分子鉴定已有报道,但是对大麦PDI基因家族的鉴定分析鲜有报道。本研究利用生物信息学分析手段鉴定了10个大麦PDI-Like基因(HvPDILs),并分析了相应编码蛋白的结构特征。与其他物...
作者:胡松青; 黄政; 刘光; 黄滟波; 李琳; 侯轶 期刊:《华南理工大学学报·社会科学版》 2017年第11期
小麦蛋白质二硫键异构酶(wPDI)由4个硫氧还蛋白结构域a-b-b'-a'和C-末端c尾组成.为考察wPDI各结构域对活性的影响,通过亚克隆表达了8个不同结构域组成的wPDI截短蛋白,表达产物经分离纯化后进行了酶学性质研究和蛋白质电泳分析.结果表明,所设计的8个wPDI截短蛋白在大肠杆菌BL21中得到了表达,金属螯合亲和层析和分子排阻层析后获得了纯度较高的wPDI截短蛋白;活性测定结果表明,wPDI的所有结构域对其二硫键氧化还原活性和分子伴侣...
作者:李利波; 陈腾祥; 潘娅 期刊:《贵州医科大学学报》 2016年第06期
目的:探讨正常肝细胞和肝癌细胞在诱导发生内质网应激(ERS)前后细胞裂解液中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白质二硫键(PDI)、的表达水平。方法:取培养获得的第3代正常肝细胞LO-2和肝癌HepG2与SMMC-7721细胞,采用150mmol/L无水乙醇处理48h诱导发生ERS;分别提取3种细胞裂解液中蛋白质,采用Westernblot方法检测GRP78和PDI表达水平。结果:在ERS前,GRP78在HepG2细胞中表达最高,其次为SMMC-7721细胞,在LO2细胞中表达最低...
作者:李春旭; 张善勇; 齐治平; 夏鹏; 潘肃; 昝春芳; 杨小玉 期刊:《中国组织工程研究》 2017年第24期
背景:目前认为脊髓缺血再灌注损伤是造成脊髓减压手术后"二次瘫痪"的主要原因,而控制应激相关蛋白和兴奋性氨基酸对脊髓缺血再灌注损伤的治疗至关重要。目的:观察蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)在兔脊髓缺血再灌注损伤后表达变化。方法:依据Zivin法建立兔脊髓缺血再灌注损伤模型,将36只新西兰白兔随机均分成6组,对照组只显露腹主动脉而不阻断血流,30 min后关闭腹腔;实验组阻断腹主动脉血流30 min后分别再灌注0,6,12,24,48 h再...
作者:王孟春; 郭静波; 刘明华; 方文刚; 李岩 期刊:《世界华人消化》 2006年第29期
目的:了解蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)在幽门螺杆菌(H pylon)感染人胃黏膜组织中的表达情况. 方法:分别应用半定量RT-PCR方法及Westem blot方法检测感染(n=32)与未感染(n=28)H pylori的人胃黏膜组织中PDI mRNA及蛋白的表达情况. 结果:未感染组PDI mRNA及蛋白表达量分别为0.5704±0.0794,0.5198±0.0379,感染组PDI mRNA及蛋白表达量分别为1.0642±0.1533,0.8252±0.0321;两组相比差异...
作者:冯锋; 刘卫群 期刊:《植物生理学报》 2008年第02期
将从普通烟草(Nicotiana tobaccum)‘K326’中克隆得到的转录因子基因NtDREB2,采用PCR去除NtDREB2基因的终止密码子,酶切后构建入PDI/pET28a融合表达载体。取测序正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,SDS-PAGE检测表达后,用Ni-NTA纯化融合蛋白,获得了高效表达的可溶性目的蛋白。凝胶滞留(EMSA,electrophoresis mobility shift assay)实验表明融合蛋白具有结合DRE(dehydration—responsive element)元件...
作者:刘颖慧; 王秀堂; 石云素; 黄亚群; 宋燕春; 王天宇; 黎裕 期刊:《中国生物化学与分子生物学报》 2009年第03期
蛋白质二硫键异构酶(PDI)对蛋白的折叠和二硫键的形成起重要的作用.此外,PDI还执行许多其他的生物功能,是1个多功能酶.本文通过研究玉米中1个PDI基因的特征和表达,探讨它的功能作用.玉米中的PDI基因编码513个氨基酸.同源分析表明,该基因和水稻、小麦的PDI基因聚为一类,有很高的蛋白相似性.蛋白结构分析表明,该基因具有明显的PDI基因的结构特点,包括硫氧还蛋白活性位点(CGHC)以及内质网定位信号(KDEL).Northern杂交分析显示,...
作者:李利波; 陈腾祥; 潘娅 期刊:《贵阳医学院学报》 2016年第06期
目的:探讨正常肝细胞和肝癌细胞在诱导发生内质网应激(ERS)前后细胞裂解液中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白质二硫键(PDI)、的表达水平。方法:取培养获得的第3代正常肝细胞LO-2和肝癌HepG2与SMMC-7721细胞,采用150mmol/L无水乙醇处理48h诱导发生ERS;分别提取3种细胞裂解液中蛋白质,采用Westernblot方法检测GRP78和PDI表达水平。结果:在ERS前,GRP78在HepG2细胞中表达最高,其次为SMMC-7721细胞,在LO2细胞中表达最低...
作者:王志强 周智敏 郭占云 期刊:《生命科学研究》 2009年第06期
蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)家族是一类在内质网中起作用的巯基-二硫键氧化还原酶.它们通常含有CXXC(Cys-Xaa-Xaa-Cys,CXXC)活性位点,活性位点的两个半胱氨酸残基可催化底物二硫键的形成、异构及还原.所有PDI家族成员包含至少一个约100个氨基酸残基的硫氧还蛋白同源结构域.PDI家族的主要职能是催化内质网中新生肽链的氧化折叠,另外在内质网相关的蛋白质降解途径(ERAD)、蛋白质转运、钙稳态、抗原提...
作者:王海波 施晓东 张梅芬 郭俊云 期刊:《安徽农业科学》 2009年第33期
紫花苜蓿蛋白质二硫键异构酶的基因已经被克隆测序。利用其mRNA及氨基酸序列,应用生物信息学软件预测了该蛋白质的理化性质、亲/疏水性、信号肽、二级结构、卷曲螺旋结构、跨膜区域、糖基化位点、活性位点、亚细胞定位、功能结构域及高级结构。结果表明,该蛋白质是一个整体疏水性蛋白,细胞定位为粗面内质网,含有512个氨基酸,理论等电点为4.98,信号肽位于1~24号氨基酸;二级结构中α-螺旋占26.37%(135AA),无规则卷曲占53....
作者:潘黎明 盛梦婷 黄子芮 李俊明 期刊:《海南医学》 2015年第08期
糖尿病缺血性心脏病是一类预后不良的心脏疾病,是我国糖尿病患者死亡的主要原因之一,现阶段主要采取传统的方式结合介入手段予以治疗。近年来,这个治疗方法取得了显著疗效,但仍然存在很多问题。研究表明蛋白质二硫键异构酶(Protein disulfide isomerase,PDI)氧化还原状态和心肌损伤存在密切关系,这使得PDI在糖尿病缺血性心脏病中的作用机制研究成为了一个热点。本文就PDI与糖尿病缺血性心脏病的发生发展关系以及针对PDI的潜在治...
作者:黄子芮 潘黎明 盛梦婷 李俊明 期刊:《现代医药卫生》 2016年第02期
蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)家族是硫氧还蛋白(thioredoxin,TRX)超家族中的成员,均含有TRX样结构域,主要存在于细胞内质网中,促蛋白巯基-二硫键转换,调节二硫键的氧化还原状态,帮助二硫键形成、破坏与重排。PDI家族主要在促蛋白折叠、翻译后修饰上发挥重要作用,与未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)密切相关,