作者:郭建军; 曾静; 袁林; 魏国汶 期刊:《食品与发酵工业》 2020年第03期
为构建组成型分泌表达蛋白酶Ker的重组粪肠球菌,采用豆粕固态发酵实验并评估其应用效果。以重组质粒pSIP401-kerhds为基础框架,向其中引入组成型启动子p10和高效分泌信号肽S6,构建重组载体pSIP401Z-s6-kerhds。采用电击转化方法将该重组载体转入具有益生特性的粪肠球菌EXW27来构建重组粪肠球菌。重组粪肠球菌的胞外蛋白酶的比酶活力为125.37 U/mL。重组蛋白酶Ker的最适反应温度为40℃,在pH 5.0~10.0范围内具有较高的相对酶活力和稳...
作者:吕兴霜; 张永勤; 王鹏博; 张凤国 期刊:《食品工业科技》 2020年第03期
海参作为海产品中的名贵滋补品,具有较高的商业价值,却极易受到外界刺激而迅速自溶,造成严重的经济损失。本文综述了海参体壁的组成及其在自溶过程中的变化,以海参内源酶为研究基点综述了引起海参自溶的原因和海参自溶的控制技术,并针对海参自溶的研究策略进行了展望。
作者:李玉昕; 朱迎春; 卫云云; 吉玉程 期刊:《食品研究与开发》 2020年第03期
试验研究牛骨汤的最佳酶解工艺并对其游离钙含量进行分析。以牛骨汤为原料,以水解度为指标,从木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶中筛选最佳酶制剂,通过单因素试验和响应面试验得到酶解最佳工艺。结果表明复合蛋白酶酶解效果最好,其最优酶解工艺为:pH 7.60、加酶量1.16%、温度53℃、时间3.5 h,在此条件下水解度可达到4.83%;通过游离钙含量测定可知酶解后牛骨汤中可溶性钙含量增加了75%。
作者:刘宗文; 李森; 雍德祥 期刊:《科学与信息化》 2017年第08期
为获得一种新的基因工程工具酶,通过基因合成的方法获得3C蛋白酶基因并将其克隆入表达载体pGEX-4T-1中构建表达载体pGEX-4T-3C,转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。表达产物经GST柱纯化后获得目的蛋白,于4℃条件下对融合蛋白TY50进行切割以鉴定活性。结果表明3C蛋白酶在大肠杆菌中获得了稳定高效的表达,经过GST柱纯化纯度达95%以上。酶切结果表明,获得的3C蛋白酶能够切割含有3C酶切位点的融合蛋白,因此成功开发出一种新的基因工程工...
作者:和渊; 佟奕聪; 白津菁; 伍依然; 韩亚新 期刊:《生物学通报》 2015年第11期
“探究影响酶活性的条件”是生物学必修1教材的基本实验之一,但教材上未给出有关温度对酶活性影响的具体实验方案。详细阐述了探究温度对酶活性影响的实验过程。研究对象选用底物蛋白和蛋白酶,运用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对反应后的样本进行跑胶实验。由于在不同温度和时间下蛋白酶活性强弱不同,使得底物蛋白被切割的条带在聚丙烯酰胺凝胶上显示出的粗细不同.据此判断酶活性的强弱。实验结果验证了“酶的活性随着温度的升高而...
美国研究人员以小鼠为对象进行的研究发现,咖啡因能清除体内因紫外线照射而受损的细胞,进而降低患皮肤癌的风险。此前有研究表明,咖啡凶能够抑制名为ATR的蛋白酶。研究人员培育了ATR蛋白酶被抑制的基因改造小鼠。暴露于紫外线环境后,基因改造小鼠出现皮肤肿瘤的时间比普通小鼠晚3周;在紫外线环境中19周之后,出现肿瘤的基因改造小鼠比普通小鼠少69%。
作者:韩秋菊; 张倩倩 期刊:《生物资源》 2011年第02期
玉米黄粉中含有约质量分数60%的蛋白质,但很难直接应用,必须进行预处理。本文以玉米黄粉为原料,利用蛋白酶产生菌LN01进行液体发酵,分别研究了液体接种量、初始pH、培养温度和培养时间等因素对LN01菌株水解玉米黄粉蛋白的影响。实验结果表明,LN01菌株水解玉米黄粉蛋白的最佳发酵条件为:初始pH值为6.0,液体种子接种量为12%,培养时间为3 d,发酵温度为25℃。
作者:任艳; 万德光; 张志丹; 国锦琳 期刊:《生物资源》 2009年第03期
利用粉末活性炭、羧甲基淀粉钠(CMS)、羧甲基纤维素钠(CMC)吸附作用进行中药猪血的脱色剂初步筛选,发现活性炭脱色效果较好;选取胃蛋白酶、胰蛋白酶、1394酶、木瓜蛋白酶4种酶酶解猪血蛋白,综合考虑胃蛋白酶酶解效果最好;进一步利用45均匀设计法得到猪血最佳酶解脱色条件为加酶量8%、温度45℃、酶解时间0.5 h、底物浓度18%,吸附剂为活性炭,脱色液呈浅黄色,无腥味,蛋白质含量较高,并且酶解后猪血蛋白分解为多肽,具有多功能生物...
作者:叶巧园(综述); 樊翌明(审校) 期刊:《广东医科大学学报》 2008年第05期
本文对P物质、蛋白酶、阿片样肽3种非组胺依赖性瘙痒介质的外周致痒机制进行综述,旨在为慢性瘙痒性皮肤病和其它系统性疾病的抗瘙痒的临床治疗提供理论依据。
作者:吴松芳; 陆宜隽 期刊:《生物化工》 2019年第06期
近年来,随着生物技术的不断发展,提高了生物制品的质量,其中DNA提取是生物工程中的常规操作。本文首先分析了DNA提取方法的发展现状及常用的提取方法,之后对蛋白酶K在DNA提取中的应用进行了分析,并重点分析了通过调节蛋白酶K消化时长来优化DNA提取的方法。
作者:马文锋; 朱艳芝; 陈晓晨; 孙利鹏; 张永钦; 郭亮 期刊:《中国饲料》 2020年第01期
作者:高维强; 阮长耿 期刊:《国际内科学》 2004年第02期
血管性血友病因子裂解酶(vWF-cp)可将大分子量的血管性血友病因子(vWF)多聚体水解成为生理状态下的小分子肽段。vWF-cp活性的异常或vWF对该酶敏感性的增加均影响vWF多聚体的降解,改变vWF与血小板和内皮下胶原的结合能力,易于导致血栓性血小板减少性紫癜、肿瘤的浸润与转移、血栓形成以及出血等多种病理状态的发生。本文就血浆vWF-cp的活性水平与上述病理状态的关系作一综述。
作者:沈颖越; 冯伟林; 蔡为明; 张宏福; 范丽军; 宋婷婷 期刊:《食药用菌》 2019年第06期
对两个香菇主栽品种浙香6号和939在冷藏过程中总糖含量、蛋白含量、多酚氧化酶和蛋白酶变化趋势和规律的测定结果:在整个冷藏过程中,参与鲜菇褐变的多酚氧化酶的活性浙香6号同比均明显高于939,且在0~25天始终保持较高活性;对营养和风味品质的维持有较大关系的蛋白酶的活性,浙香6号先升后降,在3天时达到峰值,显著高于939。通过早期干扰蛋白酶活性变化,可对浙香6号鲜菇在长远运输中营养和风味品质的维持起较大作用,使25天时商品性状...
作者:孔祥承; 周嘉睿; 邓瑾; 徐喜; 王立元 期刊:《农村科学实验》 2019年第32期
对分离得到的枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WHJ菌株进行诱变,经紫外线和亚硝基胍复合诱变处理,获得1株遗传性状稳定的高产蛋白酶突变菌株WXP99。检测结果表明,发现突变后表达的蛋白酶活性提高约39.2%,但酶稳定性有所下降。
作者:陈周; 张美玲; 尹涛; 熊善柏; 尤娟; 胡杨 期刊:《华中农业大学学报》 2019年第06期
作者:寇娟妮; 辛寒晓; 孙国科; 刘丽英; 孙中涛 期刊:《中国农学通报》 2019年第30期
为了提高牛蒡根下脚料酶解物的收率并验证其肥效,笔者采用响应面法对复合酶的组成和酶解条件进行优化,并通过盆栽试验验证酶解物对甜瓜生长和品质的影响。结果表明,复合酶的最佳组成为纤维素酶47.3%、中性蛋白酶1.0%、碱性蛋白酶51.7%,最佳酶解条件为49.9℃、pH 6.42、底物浓度6.94%、酶底比2.536%。在此条件下水解3 h,牛蒡根酶解物的收率可达74.83%,可溶性蛋白得率可达11.06%,可溶性糖得率可达37.49%。牛蒡根酶解物富含有机质、可...
作者:陈一萌; 唐善虎; 李思宁; 贡佳欣; 李琦 期刊:《食品与发酵工业》 2019年第23期
作者:熊科; 邓蕾; 柳佳芸; 裴鹏钢 期刊:《食品与发酵工业》 2019年第19期
蛋白酶酶解底物位点的专一性,对酶解产物的组成与比例都有较大影响,直接影响最终产物的价值。酶法水解蛋白质存在水解效率低、特异性成分产率低以及后期纯化成本高等问题,使得特异性的酶解方式难以实现大规模工业化应用。解决这一问题则亟需探究蛋白酶特异性水解机理,得到酶解产物的分子机制。基于此,文章围绕蛋白酶的水解特异性,综述了目前与特异性相关的底物基团性质、结合部位氨基酸性质与空间位置,以及酶分子表面电荷等方面的...
作者:陈丽华; 米建锋; 张桂萍 期刊:《临床和实验医学》 2019年第24期
作者:刘颖; 王彦多; 曹广超; 施东方; 吕迎兰; 毕经会; 王集会; 李静 期刊:《西部中医药》 2019年第09期
目的:分别用4种蛋白酶对美洲大蠊粉超声提取液基于半仿生环境进行酶解,制备不同类型多肽,并采用MTT法筛选出抑制乳腺癌MCF-7细胞的最佳用酶。方法:分别用胃蛋白酶、弹性蛋白酶、胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶对美洲大蠊粉进行酶解,采用苯并戊三酮显色法和半微量凯氏定氮法测定不同酶解液的水解度;使用MTT法进行体外抗肿瘤实验。以乳腺癌MCF-7细胞的抑制率为指标,水解度为参考,评价4种蛋白酶对美洲大蠊粉的酶解效果并筛选出最佳用酶。结果...