作者:钟键; 金正贤; 卞卫星; 仇佳星; 侯建全 期刊:《中华肿瘤防治》 2020年第02期
作者:刘明; 胡文祥 期刊:《生物学通报》 2009年第09期
通过在本科生实验教学“生物技术综合实验”和硕士研究生的“细胞及分子生物学实验”中,尝试使用微波超声波组合催化仪器代替溶菌酶和超声波细胞破碎的方法来裂解细胞,IPTG诱导蛋白表达,建立了微波单一催化的实验方法,可以准确表达GFP蛋白,不需要过夜反应,大大加快了反应速度,缩短反应时间,节约了实验课时间。绿色化学中的微波技术催化方法在生物化学和分子生物学领域也得到推广和应用。
作者:陈春雷; 赵芳良; 李连健; 蒋厚军; 林晖; 林俊琼; 韩卓兴 期刊:《广东医科大学学报》 2015年第03期
目的 Rapamycin,探讨雷帕霉素(RAP)、吉西他滨(Gemcitabine,GEM)、阿霉素(Doxorubicin,DOX)联合化疗对人胆管癌HCCC-9810细胞中Survivin、VEGF-C、p-m TOR、m TOR蛋白表达的影响。随机分为对照组、方法 RAP组、GEM组、DOX组、RAP+GEM组、RAP+DOX组、GEM+DOX组、RAP+GEM+DOX组。MTT实验界定3种药物的干预浓度。Western Blot技术检测3种药物联合用药对胆管癌细胞系HCCC-9810细胞中Survivin、VEGF-C、p-m TOR、m TOR蛋白表...
作者:林贯川 期刊:《广东医科大学学报》 2012年第05期
目的构建hGPR177/PCDNA3.1(+)重组质粒,并在A549肺癌细胞中表达hGPR177蛋白。方法利用生物分析软件DNAMAN6.0选取合适的穿梭载体PCDNA3.1(+)和酶切位点。用质粒提取试剂盒对穿梭载体PCDNA3.1(+)及含有hGPR177基因pReceive-B04质粒进行抽提,并对其进行双酶切。使用DNA连接酶把hGPR177基因与PCDNA3.1(+)酶切片段连接,重新构建hGPR177/PCDNA3.1(+)重组质粒。将重组质粒通过电转的方式转导进A549肺癌细胞。运用细胞培养...
作者:夏雪; 许筱莉; 龙金华; 王赞; 张世超; 欧阳燕; 朱贵明; 胡祖权; 曾柱 期刊:《安徽医科大学学报》 2019年第12期
目的探讨白介素10(IC-10)对人成熟树突状细胞(mDCs)F-ccUn结构及其结合蛋白表达情况的影响&方法从新鲜的人外周血分选出CD141单核细胞,诱导培养成mDCs,用10 ng/ml IC-10处理48 h,利用激光共聚焦显微镜观察mDCs细胞骨架结构的变化,并通过Western b/t实验和免疫荧光实验分析IC-10对mDCs细胞骨架结合蛋白Fas-cin-1 Cofilin和磷酸化Cofilin(p-Cofilin)的表达及其定位的影响。结果IL-IO处理mDCs后,其F-actin含量明显上升,细胞突起增加,F...
作者:吴鹏; 尹欣悦; 陈创夫 期刊:《黑龙江畜牧兽医》 2019年第17期
为了研究淋巴细胞活化基因-3蛋白的生物学特性,试验采用PCR方法扩增淋巴细胞活化基因-3胞外区序列,构建重组质粒,将重组质粒转染至HEK293感受态细胞中表达目的蛋白,并对目的蛋白进行SDS-PAGE及Western-blot检测,通过ProtParam软件分析淋巴细胞活化基因-3蛋白性质,通过SWISS-MODEL软件预测蛋白质结构。结果表明:PCR法成功扩增出目的条带,大小约为1 430 bp,1. 0%琼脂糖凝胶电泳显示酶切成功;经10%SDS-PAGE凝胶电泳分析,在68 ku处出现...
作者:王晓静; 孙林静; 孙玥; 张融雪; 李军玲; 闫双勇; 苏京平 期刊:《华北农学报》 2019年第05期
为研究水稻水孔蛋白OsPIP2;7基因在非生物胁迫中的生物学功能,根据OsPIP2;7基因序列设计特异性引物,以水稻品种中花11的三叶龄叶片RNA反转录的cDNA第一链为模板,克隆OsPIP2;7。采用嵌套PCR的方法,将3×HA标签的碱基序列连接在去除终止子OsPIP2;7基因序列的3′端,然后将此核酸片段插入到植物双元表达载体pHB中,构建pHB-OsPIP2;7-3×HA载体。以中花11成熟胚愈伤组织为材料,采用农杆菌介导的方法进行遗传转化,经过在含有潮霉素的培养基...
作者:明成玥; 柯飞; 张奇亚 期刊:《病毒学报》 2019年第06期
沼泽绿牛蛙病毒(Rana grylio virus,RGV)和大鲵蛙病毒(Andrias davidianus ranavirus,ADRV)同属虹彩病毒科(Iridoviridae)蛙病毒属(Ranavirus)成员,是引起水产动物高死亡率的病原。其同源早期蛋白RGV-27R和ADRV-85L与蛙病毒代表株蛙病毒3型(Frog virus 3,FV3)25R基因所编码的大小为31kD的早期蛋白P31K(FV3-P31K)同一性超过99%。我们在观察和比较RGV与ADRV感染大鲵胸腺细胞(Giant salamander thymus cell,GSTC)显微病变的基础上,将A...
作者:韦钦钦; 朱传凤; 马超; 傅生芳; 高雪军 期刊:《中国生物制品学》 2019年第11期
目的构建含有人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,hRSV)核蛋白(nucleoprotein,N)、磷蛋白(phosphoprotein,P)和转录延长/终止抑制因子(transcription elongation/antitermination factor M2-1,M2-1)蛋白编码基因的表达载体,并转染BSR T7/5细胞,鉴定蛋白的表达。方法根据hRSV兰州株(LZ01/09)的N、P和M2-1基因序列设计3对特异性引物,以pcDNA-N、pcDNA-P和pcDNA-M2-1质粒为模板,PCR扩增N、P和M2-1基因片段,与pGEM-T...
作者:王乌云塔娜; 青玉; 玉海; 王欢; 查苏娜; 巴根那 期刊:《中药药理与临床》 2019年第04期
目的:研究蒙药土茯苓-7汤对咪喹莫特诱导的银屑病样皮损的干预作用及皮损组织的增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮生长因子(VEGF)、CD3^+、CD8^+等因子的表达的影响。方法:取BALB/C雄性小鼠,随机分成正常组、模型组、阳性对照组(消银颗粒1. 5 g/kg)、土茯苓-7汤0. 71、1. 42、2. 13 g/kg组。各组灌胃相应药物或生理盐水,每天一次,第6日药后采用药物诱导的方法激发小鼠皮肤出现银屑病样变化,再连续给药6日,处死小鼠,观察小鼠皮肤病损...
作者:刘国栋; 周尧芳; 钟伟传; 文艳 期刊:《中国优生与遗传》 2019年第09期
作者:韩聪; 姜月华; 李伟 期刊:《中华高血压》 2019年第08期
我国成人高血压患病人数已达3亿,患病率高达27.8%[1],由高血压引起的肾损害进而导致的终末期肾病(end stage renal disease,ESRD)发病率亦逐年上升。近来研究发现,微小RNA(microRNA,miRNA,miR)调控高血压及其相关肾损害的基因与蛋白表达[2-3]。笔者课题组通过总结多项有关miRNA的基因预测、基础及临床研究发现,miR-21与miR-29为参与高血压肾损害最广泛、最具特异性的两个miRNA,其中miR-21是一种损害性miRNA,而miR-29是一种保护性mi...
作者:胡丹妮; 孙小年; 黄丽芳; 钟雅婷; 杨利民 期刊:《当代医学》 2019年第30期
目的探究PTEN、p27分别在口腔黏膜白斑和口腔癌患者组织中的表达状况并分析其意义。方法回顾性分析本院中2016年8月至2018年4月收入的所有口腔黏膜白斑和口腔癌患者的临床资料,根据实验要求分别在两种疾病中各抽取出25例患者,抽取同期在本院中进行体检的正常人群25例的口腔黏膜状况进行对比。采用免疫组化S-P法对所有患者的PTEN、p27指标进行检测,分析其蛋白的表达状况。结果对照组人群中其PTEN蛋白表达为100.00%阳性,同时口腔白斑...
作者:聂东宋; 刘宇; 冯惊涛; 胡道奇 期刊:《湖南理工学院学报·自然科学版》 2010年第04期
通过RT-PCR从HCV全长基因组中分别克隆HCV核心区和NS3非结构区的部分优势表面抗原的基因片段,运用重叠延伸PCR技术将它们拼接成融合基因,将融合基因再克隆到表达载体pTrcHis2 TOPO TA中,转化大肠杆菌Top10,阳性克隆经IPTG诱导融合蛋白的表达,表达产物经15%SDS-PAGE鉴定,重组蛋白经His标签纯化.经IPTG诱导可高效表达分子量约为14.4KD的融合抗原,重组蛋白主要以可溶性形式存在.经过纯化目的蛋白纯度达96.3%以上的,表达量约为550μg/mL...
作者:李为民; 韩薇; 李曦; 谢宝栋; 赵继义; 王岚峰 期刊:《中华心律失常学》 2005年第03期
目的研究慢性心房颤动(房颤)患者心房内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)蛋白表达和血浆一氧化氮(NO)、PAI-1、血管性血友病因子(vWF)含量的变化,探讨房颤血栓形成的可能机制.方法 30例风湿性心脏病二尖瓣病变接受外科手术者,分为窦性心律组、阵发性房颤组和慢性房颤组,手术时取左右心房组织各100 mg,通过Western blot检测eNOS和PAI-1蛋白表达数量,免疫组织化学方法检测蛋白表达位置,酶联免疫吸附双抗体夹...
作者:李岩; 李明; 陈伟强; 邝枣园; 黄宁 期刊:《广东药科大学学报》 2009年第06期
目的构建富组蛋白-5(histidine-rich protein-5,HRP-5)重组表达载体,表达并纯化HRP-5蛋白,观察其抗菌作用。方法用基因克隆的方法构建pET-32a-HRP-5重组表达质粒,经IPTG诱导表达后,用亲和层析的方法纯化HRP-5融合蛋白,Tricine-SDS-PAGE电泳鉴定其分子量,琼脂糖弥散法检测其抗菌功能。结果成功构建了pET-32a-HRP-5表达质粒并表达、纯化出HRP-5融合蛋白,融合蛋白对致病性大肠杆菌54299和绿脓杆菌PAO1有抗菌活性。结论HRP-5是一种抗...