针对近年来大火的增材制造技术,OSG推出增材制造用铣刀(AM-EBT/AM-CRE)。相对于切削等将材料去除的加工方法,像3D打印那样增加材料进行制造的制作方法称为增材制造。AM-EBT(增材制造用铣刀球头型)采用最适合于增材制造的最优化设计,其强韧的3D负前角刃型,可对应大切深的加工。AM-CRE(圆弧角型硬质合金铣刀)适用于堆焊件加工。
作者:李娟; 李晓东 期刊:《湖北师范大学学报·哲学社会科学版》 2015年第02期
将Avp-iCre转基因首建小鼠传到C57BL/6背景。通过与纯合ROSA26 Cre报告小鼠交配来检测iCre(improved Cre,改进的Cre重组酶)的表达,在子代中研究β-gal(beta-galactosidase,β-半乳糖苷酶)与AVP( arginine vasopressin,精氨酸血管加压素)的共定位关系。利用ClockLab软件记录分析Avp-iCre小鼠跑轮运行行为节律的完整性。实验结果显示β-gal和AVP在SCN( suprachiasmatic nucleus,视交叉上核)的表达存在明显共定位;A...
作者:张鹏; 陈晓慧; 冯斐斐; 刘金燕; 王帮民; 姚伟涛 期刊:《河南医学高等专科学校学报》 2019年第06期
目的通过分析检索文献总结了中外软组织肉瘤(soft tissue sarcoma,STS)动物构建模型的各种方法及其特点。方法检索PubMed和中国知网等中英文数据库,以“软组织肉瘤”和“模型”为中文关键词,以“soft tissue sarcoma”和“model”为英文关键词,检索2001—2019年的相关文献。纳入标准:①动物模型。②明确的模型构建操作方法。③明确的模型构建原理。根据标准共纳入43篇进行分析。结果总结分析了4类STS动物模型,分别是自发型、诱导型...
作者:卢晶; 李奇; 朱晓蓉; 谢荣荣; 杨金奎 期刊:《首都医科大学学报》 2020年第01期
目的构建KCNH6基因肝脏细胞特异性敲除小鼠,并监测其肝脏血脂变化。方法运用Cas9技术构建KCNH6 flox/flox转基因小鼠,将其与肝脏细胞特异性表达Cre重组酶工具鼠(Alb-cre)进行杂交,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法鉴定基因型。监测基因敲除小鼠和同窝对照小鼠的体质量和进食量。分别检测8周和20周雌雄各两组小鼠的三酰甘油、胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇。结果成功构建KCNH6基因肝脏细胞...
六盘水拉力赛是今年CRE的第三站比赛。比赛地点仍设在被誉为“凉都”的水城和盘县。与去年不同的是,第二天赛事启用仝新的赛段,但没有想到的是,首日比赛却让很多大腕车干折戟沉沙,本土车队——咳速停车队最终如愿以偿卫冕“双冠军”。
<正>1.10月13日,英国曼彻斯特机场,"裸体x光"通过被检测者皮肤的x光反射透视身体的轮廓,分毫毕现。机场以此来检查乘客是否携带有隐藏的、有威胁物品。这令人非常尴尬。
在植物遗传转化中,标记基因是必须的,但标记基因的存在引起人们对转基因食品安全性的关注。Cre/loxp重组系统可用于删除转基因植物中的标记基因,可以通过杂交或二次转化,或瞬时表达、诱导表达、组织特异表达重组酶来获得无标记基因的转基因植株。
作者:刘宏扬; 黄丽; 张昆丽; 翁长江; 杨玉莹 期刊:《兽医导刊》 2019年第04期
目的为研究抑癌基因Pten在肝脏中的生物学功能,利用Cre/Loxp基因敲除技术建立肝脏特异性Pten基因敲除小鼠模型。方法将Ptenflox/flox小鼠与肝脏特异性表达Alb-Cre重组酶的小鼠进行交配,对F1代小鼠进行鉴定,筛选出基因型为Ptenflox/+/Alb-Cre的子代小鼠,将其与Ptenflox/flox小鼠进行交配,筛选出基因型为Ptenflox/flox/Alb-Cre的F2代小鼠,将Ptenflox/flox/Alb-Cre小鼠与Ptenflox/flox小鼠进行交配,获得F3代基因敲除小鼠,Ptenflox/flo...
作者:张小芳; 董秋平; 乔潇; 乔亚科; 王冰冰; 张锴; 李桂兰 期刊:《作物学报》 2019年第05期
筛选标记基因在转基因植物应用中存在一定潜在安全风险,在转基因植物改良中如何合理消除该基因非常必要。转录因子PTF1具有改善植物在低磷胁迫下吸收磷效率的作用。本研究用根癌农杆菌介导法将Cre/loxPGmPTF1导入大豆品种豫豆22,利用β-雌二醇诱导Cre/loxP系统删除筛选标记基因,获得了无筛选标记的转GmPTF1基因大豆。用PCR法扩增删除标记基因后的重组序列并测序显示,筛选标记基因在大豆基因组中已经被完全删除,重组序列中目的基因序...
作者:郭超婧; 朱琼; 张新; 李磊; 张令强 期刊:《中国生物工程》 2019年第05期
目的:建立OTUB1肝脏特异性基因敲除小鼠模型,初步分析其表型并研究OTUB1基因与肝脏代谢的关系。方法:利用Cre/Loxp系统构建条件性基因敲除小鼠模型,即将OTUB1fl/fl转基因小鼠与Alb-Cre小鼠杂交,子代自交,得到OTUB1肝特异性基因敲除小鼠并进行鉴定。取同窝对照小鼠(control,NC)和肝特异型基因敲除(hepatic-specific OTUB1 knockout,HCKO)小鼠,通过PCR和免疫印迹(Western blot),确证OTUB1肝脏特异性基因敲除小鼠模型是否成功构建。通...
作者:邓其明; 张红宇; 李平 期刊:《中国生物工程》 2005年第B04期
自上世纪80年代转基因植物诞生以来,世界各国专家在转基因作物对健康和环境的影响问题上就一直争论不休,并严重地影响了转基因作物的商业化。解决的方法就是在转基因植株筛选后将选择标记和其它一些辅助序列剔除。综述了近年来国内外在植物无选择标记转基因技术方面的发展和研究成果,详细地论述了这些转化系统的基本原理和操作方法,并进一步比较了它们彼此间的优缺点,结合实际预测了该技术在生物技术和商品化农业上的巨大潜力...
作者:栗楠; 郭红梅; 王明玉; 令文慧; 邱小燕; 李跃民; 刘旭蕾; 邓雅楠; 肖雄 期刊:《中国细胞生物学学报》 2017年第11期
诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs)因其具有类似胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)的"自我更新"和分化潜能而成为生物学和医学等领域的研究热点之一。但是,目前i PSCs的生成主要以逆转录病毒或慢病毒为载体,而病毒载体和外源性重编程因子在受体细胞基因组中的整合,使得i PSCs存在致瘤性的安全隐患。同时,采用无载体介导的方法如重组蛋白、小分子物质的重编程效率较低。为此,目前已成功开发一些...
作者:徐旋; 曲芬 期刊:《生物工程学报》 2018年第08期
碳青霉烯耐药的肠杆菌科细菌(Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)在全球快速上升,已出现了不同的基因型,为临床诊治提出新的挑战。CRE分为具有不同特点和耐药基因的三大类五大家族;诊断方法包括Kirby-Bauer法初筛试验,碳青霉烯类药物的协同试验(EDTA与美罗培南、苯硼酸与美罗培南的双纸片抑制法)、改良的Hodge试验、显色培养基检测等CRE筛选试验,而Carba NP比色微管试验、PCR及测序等为CRE确认试验。上述方法均各有...
作者:姚晓倩; 方媛; 吴继红; 李倩; 牛亮亮; 孙兴怀; 陈君毅 期刊:《中国眼耳鼻喉科》 2019年第05期
目的通过基因鉴定方法检测出可表达视网膜Müller细胞的Sox2-Cre和Rosa26转基因小鼠杂交的后代。方法采用传统提取DNA、聚合酶链反应(PCR)扩增、电泳及免疫荧光方法检测。结果 PCR方法检测野生型小鼠是长度为324 bp的条带;杂合子小鼠是长度为250 bp和324 bp的双条带,且免疫荧光发现转基因小鼠的自发红色荧光可以和Müller细胞标记物谷氨酰胺合酶(GS)绿色荧光共标。结论建立了可表达视网膜Müller细胞的转基因小鼠模型,为今后研究视网...
作者:应沁心; 陶一昕; 杨青春; 凌学剑; 马钢 期刊:《中国组织工程研究》 2019年第25期
背景:Hedgehog信号通路对于多种组织的发育、动态平衡以及修复起了重要的作用,前人的研究强调了Hedgehog信号对于毛发模式形成是至关重要的。目的:探究Hedgehog信号在成年后的毛囊上皮动态平衡中发挥的作用。方法:Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2小鼠、Smofl/fl小鼠与K14-CreER小鼠均来自TheJacksonLaboratory,实验经上海交通大学实验动物伦理与使用委员会批准,批准号为1602028。①首先利用Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2小鼠特异地标记Lgr5+细...
作者:王肖; 赖舒畅; 叶艳诗; 许雪娟; 白晓春; 沈洁 期刊:《中国组织工程研究》 2019年第31期
背景:研究表明,2型糖尿病啮齿类动物模型及人体的丙酮酸脱氢酶复合体表达量降低,PDHA1基因缺陷也是导致丙酮酸脱氢酶复合体酶活性改变最常见的原因。目的:构建并鉴定胰岛β细胞特异性敲除PDHA1基因小鼠,为后续探究PDHA1基因在糖尿病发病机制方面作用提供模型基础。方法:实验方案经南方医科大学伦理委员会批准。利用Cre/lox P系统理论,将PDHA1^loxp/loxp小鼠与胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶的小鼠进行数代杂交,3-4周龄小鼠通过PCR法...
作者:郑欣洵; 张智静; 黄宝艺; 廖子君; 刘建军; 罗涛 期刊:《实验动物与比较医学》 2018年第03期
目的构建和鉴定单核细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)条件性基因敲除小鼠。方法将引进的纯合子PPARγ~(-loxp)小鼠和单核细胞特异性表达cre重组酶的Cx3cr1~(cre)小鼠进行杂交,得到F1代,用RT-PCR方法鉴定其基因型。将F1代进行自交产生F2代,鉴定基因型,筛选实验所需的PPARγ条件性基因敲除小鼠(实验组,PPARγ-ko)及对照组小鼠(对照组,PPARγ-wt),利用免疫荧光及Western blotting方法鉴定敲除效果。结果筛选出基因型为PP...
作者:刘天喜; 宋琼; 许国双; 刘永鑫 期刊:《中华肾病研究电子》 2019年第01期
目的建立可进行条件性敲除X-盒结合蛋白1(Xbp1)基因的flox杂合子小鼠。方法通过ET-clone的方法构建基于cre-loxp系统和FLP-frt系统的条件性基因打靶载体。载体线性化后电转JM8A3 ES细胞,经G418和Ganc筛选获得抗性ES细胞克隆。经长片段PCR鉴定获得正确同源重组的阳性克隆。阳性ES细胞经克隆扩增后,注射入C57BL/6J小鼠的囊胚中,获得嵌合鼠,筛选出高比例嵌合小鼠与野生型C57BL/6J小鼠交配后获得阳性F1代小鼠,并分别进行PCR和测序鉴定...
作者:王婷婷; 卜歆; 李金奎; 王娜; 邱意开; 岳振生; 苏金; 张淑雅 期刊:《中国现代医学》 2019年第21期
目的应用Cre/LoxP系统复制盘状结构域受体2(DDR2)在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型DDR2i EC(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2),并分析其在肝脏中的表型。方法复制DDR2打靶载体,通过电转入小鼠胚胎干细胞(ES细胞)打靶,通过聚合酶链反应(PCR)+脱氧核糖核酸(DNA)印迹法鉴定筛选阳性ES细胞,将阳性的ES细胞注射到C57BL/6N小鼠囊胚,移植入受体小鼠子宫以获得嵌合体小鼠。将得到的嵌合体小鼠与C57BL/6N小鼠回交得到F0杂合子,F0...
作者:赵安竹; 付辉蓉; 李昀; 陈坚娣; 鲁红云 期刊:《中华肝脏外科手术学电子》 2019年第03期