作者:刘占悝; 刘泽余; 李智杰; 孙飞雁; 郭利 期刊:《中国兽医科学》 2020年第01期
牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是牛的主要病原之一,对全球养牛业造成了巨大的经济损失。本文根据GenBank中BVDV基因组中5′-UTR序列合成引物,建立了同时检测BVDV两个基因型的RT-PCR方法。结果显示,所建方法具有较强特异性和敏感性,可扩增出长约300 bp的特异性片段,最低检测限量为6.8×10~3copies/μL。用该方法对30份临床样品进行病原检测,结果显示,BVDV阳性样品4份,阳性率为13.33%。对阳性PCR产物测序及序列分析的结果表明,该牛病毒性腹泻...
作者:樊平; 颜邦斌; 王怀禹 期刊:《黑龙江畜牧兽医》 2019年第17期
为了获得具有良好活性的猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)流行毒株重组蛋白,试验采用PCR扩增、克隆、诱导表达、Western-blot检测、间接ELISA等方法对PEDV流行毒株S1蛋白的主要抗原区域进行了原核表达、鉴定与初步应用研究。结果表明:经PCR扩增得到大小为1 095 bp的S1蛋白主要抗原区域基因;将目的片段定向克隆至pET-30a原核表达载体中,经IPTG诱导获得大小为48. 0 ku的重组蛋白;Western-blot检测显示,重组蛋...
作者:罗丹; 周花; 杨秀木; 孙伟伟; 王辅之 期刊:《包头医学院学报》 2019年第09期
作者:韩丽; 张文举; 王自良; 李月涛; 姜金庆; 李任峰; 范国英; 张海棠; 牛琳琳; 吕俊美; 周叶 期刊:《动物营养学报》 2019年第11期
本试验旨在研制一种自主组装的间接竞争酶联免疫吸附测定(icELISA)试剂盒,用于饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的检测。在制备抗DON单克隆抗体的基础上,建立icELISA标准曲线,并对其检测方法进行优化,然后用于测定试剂盒各项性能,将测定结果与高效液相色谱(HPLC)法测定结果进行比较分析。结果显示:本试验研制的icELISA试剂盒对DON的最低检测浓度为1.147 ng/mL,检测范围为1.50~130.31 ng/mL,半抑制浓度(IC 50)为9.84 ng/mL。对小麦、...
作者:杨光; 陈姝; 崔金环; 司建华; 谭家驹 期刊:《中华流行病学》 2005年第06期
目的利用逆向点杂交技术建立丙型肝炎病毒(HCV)基因分型新方法.方法在HCV 5'端非编码区(5'UTR)设计引物与分型探针,将活性氨基标记的分型探针依次固定在尼龙膜上,制成HCV基因分型逆向点杂交检测膜条.分离纯化血清中的HCV RNA,经逆转录反应和生物素标记引物聚合酶链反应(PCR)巢式扩增后,将扩增产物与检测膜条杂交,过氧化物酶和四甲基联苯胺显色,判断基因分型结果.最后,通过与基因测序结果比较确定新方法的有效性.从佛山地区丙型肝炎...
作者:郭喆; 张锦明; 田嘉禾; 尹大一; 姚树林 期刊:《中国医学影像学》 2005年第03期
目的: 初步探讨11C-胆碱PET显像诊断体内占位病变的良恶性价值.材料和方法: 对3例脑内、14例肺内占位病变患者同时行N-甲基-11C胆碱(11C-胆碱)和18F-FDG PET显像,ROI方法测定最大标准摄取值(SUVmax).结果: 13处恶性占位病灶11C-胆碱PET显像均为阳性;但病灶大小与SUVmax间无明显相关性.8处良性占位病灶,18F-FDG均为假阳性,11C-胆碱PET显像仅有1例为假阳性.11C -胆碱显像漏检1处肺癌肾上腺转移病灶.结论: 11C-胆碱PET显像可能成为肿...
在21世纪,科技发展迅速,文化和教育支持着人类的发展。教育是我们现今主要发展的领域。以教育兴国是现今发展的大体趋势。PBL教学法应运而生,PBL的全称是Problem-Based Learning,是一整套设计学习情境的教学方法,我们也可以称之为问题式学习,最早起源并应用于20世纪50年代的医学教育,在现代已经广泛的运用于各个教学领域,在生物化学的学习当中,以点切入,不断学习探索,才能在生物化学上有所建树,不断的遇到问题并将之解决,愿以此为...
作者:彭江; 汪爱媛; 孙明学; 许文静; 黄靖香; 赵斌; 张莉; 田杰谟; 董利民; 卢世璧 期刊:《中华外科》 2005年第12期
目的利用三维凝胶叠层成型法(3D Gel-lamination)制备出取向性仿生双相磷酸钙生物陶瓷支架,并在体外对支架的结构进行三维重建和相关评价.方法 2003年11月至2005年3月,以犬股骨头的松质骨样本显微CT(Micro-CT)图像为基础,提取其中的图像信息,利用三维凝胶叠层成型法制备出具有仿骨小梁结构的双相磷酸钙(BCP)仿生生物陶瓷支架.随后对支架进行Micro-CT扫描,用三维结构参数对支架和松质骨样本进行三维评价和比较.并利用体外细胞培养技...
作者:马永; 李楠; 钟业聪; 陆照甫; 林鉴钊; 蒋明; 林平义; 罗斌 期刊:《亚热带植物科学》 2005年第01期
利用ISSR技术对叉孢苏铁(Cycassegmentifida)遗传多样性进行研究,对影响PCR反应的DNA模板浓度、dNTP浓度、Taq酶含量、引物浓度、Mg2+浓度和退火温度等进行了条件优化.叉孢苏铁的ISSR最佳反应扩增体系为:20μl反应体积2μ110×PCRbuffer,模板DNA20g,1UTaq酶,1.5~2.75mmol/LMgCl2,0.1mmol/L 4×dNTP,0.22μmol/L引物,2%甲酰胺.适宜的退火温度为50~52℃.从103条引物中筛选出12条用于所有样品的扩增,共扩增出122条带,其中多态性条带为86...
作者:牛维; 刘海全 期刊:《中医正骨》 2005年第07期
随着骨折内固定理论和技术研究的日益深入,骨折的治疗原则由传统的单纯机械稳定向生物学固定转变.锁定加压钢板(Locking Compression Plate LCP)是在动力加压钢板和点接触钢板的基础上发展起来的一种新型骨折内固定技术.作者自2004年4月~10月,选用LCP治疗胫腓骨骨折16例,获得良好的效果.现总结报告如下.
作者:修占伍; 刘晋宇; 李远超; 孟媛; 鲁承; 高旭 期刊:《黑龙江畜牧兽医》 2019年第03期
为了建立一种能同时检测犬细小病毒(CPV)和犬瘟热病毒(CDV)的快速鉴别PCR方法,试验根据GenBank中登录的CPVNS1基因和CDVF基因序列设计2对特异性引物,通过综合CPV单项PCR方法与CDV单项RT-PCR方法的扩增程序,最后确定出联合PCR/RT-PCR方法的最佳退火温度、延伸时间和循环次数等反应程序,并对扩增产物进行克隆鉴定,同时进行特异性试验、敏感性试验和临床病料的检测。结果表明:建立的联合PCR/RT-PCR方法可以在一个扩增体系内同时检测两...
作者:郝敏; 李美才; 刘安庆; 李伟 期刊:《中国骨与关节损伤》 2005年第08期
目的研制一种全新的、不依赖术中X线透视导航的股骨颈导针定位方法及装置.方法通过微创的手术方法,在股骨头颈的前方切一小口,打开前方关节囊,垂直插入一斯氏针于头颈交界的中点,作为一个真实的"靶",再于股骨大转子下作一纵行小切口,将已同"靶"连接的定位装置的导向套筒插入其骨皮质表面,引导导针通过股骨颈纵轴进入股骨头内.结果笔者在人体标本上进行了大量的模拟操作的基础上,临床验证38例(GardenⅡ~Ⅳ型),证明只要摆正患者体位...
作者: 期刊:《中国畜牧兽医文摘》 2004年第04期
20041395 应用巢式 PCR-杂交技术检出人血样及动物排泄物中弓形虫 DNA/骆红梅(杭州师范学院医学院 310012),楼兰花//中国兽医杂志.-2003,39(9).-12~14弓形虫是一种专性细胞内寄生的原虫,引起人兽共患疾病弓形虫病。本文报道了一种基于 PCR 技术检测宠物弓形虫的方法,该方法的特点是通过检测宠物排泄物中是否存在弓形虫包囊,从而诊断宠物是否为真实的传染源。由于宠物的排泄物容易采集,避免了复杂的采样程度,方便于检测。图2参6200...
"军字一号"医院信息管理系统是医院由经验管理模式向科学管理模式转变的标志.随着现代检验医学的发展,临床及科研部门对临床实验室的要求进一步提高,许多以往靠人工进行检验的项目逐渐被自动仪器代替,人工方法进行检验结果的登录、计算及报告已不能适应实验的正常运作.目前,我科使用"军字一号"工程检验信息管理系统,实现了检验报告的规范化、检验数据的存档、检验结果的查询以及检验收费的统一管理,收益颇多.
作者:李静东; 郝立波; 王岩; 周勇刚; 唐佩福; 王继芳 期刊:《中国矫形外科》 2005年第14期
[目的]报告本院近年来采用LinkR感染治疗型临时假体治疗人工髋关节置换术后感染的初步经验,探讨感染二期翻修中占位器的选择.[方法]采用Link R感染治疗型临时假体治疗的8例9髋感染病例,术后每隔3个月随访1次,进行Harris评分.[结果]所有病人均获得随访,平均随访时间为13(3~22)个月,髋关节翻修重建病人的Harris评分平均为82.4(65~98)分,较治疗前平均改善48.8分,感染控制率为87.5%.术后功能优良率为60%.[结论]Link R感染治疗型临时...
作者:丁忠祥; 梁碧玲; 沈君; 黄穗乔; 钟镜联; 叶瑞心 期刊:《临床放射学》 2005年第08期
目的了解正常、鼻咽癌(NPC)侵犯及放疗后纤维化的斜坡动态增强MRI特点,为进一步鉴别斜坡部位NPC放疗后复发与纤维化奠定基础.资料与方法 47例斜坡分为3组:正常斜坡(正常组)、NPC侵犯斜坡(NPC组)及斜坡放疗后纤维化(RF组).常规鼻咽部MRI平扫后,行动态增强MRI检查.动态增强后,行常规增强T1WI扫描.测量动态早期斜坡、原发肿瘤、髁突、鼻甲的相对信号强度并作出动态曲线.结果正常斜坡骨皮质呈完整的低信号,骨髓则呈低、混杂或高信号;动...
作者:刘卫滨; 付士红; 宋宏; 王环宇; 曹玉玺; 何英; 王俊文; 王力华; 梁国栋 期刊:《中华微生物学和免疫学》 2005年第08期
目的利用TaqMan PCR技术,建立乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)实时荧光PCR检测方法,初步应用于蚊虫媒介的JEV监测. 方法根据GenBank发表的JEV全基因组序列资料分析结果,在其NS5基因区段设计JEV特异的引物与探针;优化Mg2+浓度和引物浓度比例,并利用11株JEV和7株相关病毒株考核检测体系的保守性、特异性、灵敏性和稳定性;利用体外转录的病毒RNA和定量的病毒样品,建立相应的定量分析模型;初步应用于蚊虫媒介的监测与...
作者:张吉红; 黄素文; 闻伟刚; 李如松; Ji-hong; Su-wen; Wei-gang; Ru-song 期刊:《畜牧与兽医》 2010年第06期
根据GenBank中已发表的赤羽病病毒(AKAV)的S基因序列,设计了3条特异性引物,建立了检测AKAV的套式RT-PCR方法.特异性试验表明,该方法可以特异扩增出AKAV的S基因片段,但从牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、传染性牛鼻气管炎病毒(IBRV)等13种对照病毒中均不能扩增出目的条带.敏感性试验表明,套式RT-PCR能够扩增10-5稀释度的病毒RNA(核酸含量约1.18 ng/μL),比普通RT-PCR高出1 000倍.用此方法检测130份奶牛血清样品与1份流产胎儿病料,均未检测到...
作者:谢海燕; 蔡奕琪; 张端秀; 徐振娜; 洪伟彬 期刊:《中国兽医》 2017年第03期
根据大肠杆菌O157的rfbE基因、志贺肠杆菌ipaH基因、单增李斯特杆菌hlyA基因的保守序列,设计引物和探针,通过优化反应体系,测定其灵敏度、特异性和重复性,建立了可同时检测上述3种食源性致病菌的多重实时荧光PCR方法。试验结果显示,该方法对大肠杆菌O157、志贺肠杆菌、单增李斯特杆菌进行3联扩增的相对灵敏度检测限分别为5×10^2、5×10^2和5×10^3CFU/mL;对10株标准/参考菌株的检测结果,只有目的菌株呈阳性反应;用该方法检测26份冻肉...
作者:何卫兰 期刊: 2016年第17期
化学肥料的合理施用,对于有效保障和提升我国蔬菜种植者的经济收益获取水平具备深刻影响,而配方施肥技术方法在蔬菜种植过程中的应用,给实际经济收益的获取水平带来了深刻影响,本文围绕蔬菜配方施肥的初步应用选取三个具体方面展开了简要分析。