作者:费霞佩 期刊:《中国医学文摘·耳鼻咽喉科学》 2019年第02期
Objective To analyze the pathological characteristicsand prognostic factors of antineutrophil cytoplasmicantibody (ANCA)-associated vasculitis (AAV). MethodsA retrospective analysis of AAV patients with renalbiopsy results admitted to Kidney Disease Center of theFirst Affiliated Hospital from January 2004 to February2017 was performed. The patients were divided into 4types according to Berden cl...
作者:张法标; 方哲平 期刊:《中国现代医生》 2015年第26期
目的分析肝细胞癌Adv-p53、AAV-HGFK1联合转基因治疗的临床疗效和预后。方法选取我科2009年1月~2012年1月进展期肝癌患者共50例,随机分为重组腺相关病毒-肝细胞生长因子第l螺旋区(recombinant adeno-associated virus-kringle 1 domain of hepatocyte growth factor)AAV-HGFK1+Adv-p53组和AAV-HGFKI组。比较两组患者治疗后肝穿刺活检标本新生微血管和凋亡细胞率、临床疗效、复发率、生存率。结果 AAV-HGFK1+Adv-p53组治疗后第1...
1月23日,中国民航局航空器适航审定司印发《基于运行风险的无人机适航审定的指导意见》,明确将在2019年底初步建成基于运行风险的无人机适航管理体系,公布已在国内5家无人机企业设立适航审定试点,重点探索货运无人机、巡线无人机、载人无人机的适航标准和审定办法。
作者:杨民; 马庆军; 郭均; 党耕町 期刊:《中国骨与关节损伤》 2005年第07期
目的构建重组人骨形态发生蛋白7(hBMP7)的腺相关病毒(AAV)载体.方法通过RT-PCR方法,从HEK293细胞中扩增hBMP7全长cDNA并亚克隆入通用型AAV载体质粒pSNAV.将pSNAV-hBMP7质粒DNA转染BHK-21细胞,筛选出携带hBMP7的AAV载体细胞株-BHK-21细胞.用能表达Rap和Cap的重组1型单纯疱疹病毒HSV1-rc/ΔUL2按MOI=0.1感染BHK-21载体细胞株后收获病毒液,通过氯仿-PEG/NaCl沉淀-氯仿抽提纯化病毒.结果所克隆的hBMP7全长cDNA经测序证实和已知hBMP7序列...
作者:于水澜; 姜颖; 张淑香; 韩松洋; 葛圆圆; 宋高臣 期刊:《现代生物医学进展》 2018年第13期
目的:采用前期成功构建的靶向沉寂CDK2基因的重组腺相关病毒r AAV-sh RNA-CDK2转染人肝癌Hep G2细胞,研究其对人肝癌细胞增殖的抑制作用。方法:取人肝癌Hep G2细胞于裸鼠前肢腋下接种,构建裸鼠皮下移植瘤模型,将成瘤裸鼠随机分为三组:肿瘤组、NC对照组、r AAV-sh RNA-CDK2给药组。各试验组均通过尾静脉注射给药,每隔五天用游标卡尺测量肿瘤的长径(a)、短径(b),计算肿瘤体积。根据每组裸鼠移植瘤体积的平均值,绘制移植瘤生长...
作者:张立娟; 游奕菲 期刊:《实验科学与技术》 2017年第05期
白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)是免疫系统最重要的抗炎症细胞因子之一,具有神经保护作用。为了探究IL-10发挥神经免疫的抗炎作用,该文首先采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从小鼠脾脏组织总RNA中扩增出该基因的全序列cDNA;再以腺相关病毒(AAV)为载体,构建了带有高亮度增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体AAV-IL10-EGFP,观察了其在小胶质细胞系N9细胞中的表达状况;最后采用实时荧光定量(QT-PCR)...
作者:朱余军; 饶丹; 丛锋; 伍妙梨; 袁文; 王静; 练月晓; 黄碧洪; 徐凤娇; 刘助红; 尹雪琴; 黄韧; 张钰; 陈梅丽; 郭鹏举 期刊:《中国兽医》 2017年第06期
为了建立一种快速、特异、灵敏的检测I群禽腺病毒的液相基因芯片方法。根据Hexon基因序列设计特异引物,上游引物5'端加TAG序列,下游引物5'端加生物素,进行PCR扩增,将扩增产物与链霉素亲和蛋白、磁珠37℃孵育30 min,通过Luminex200仪器分析。用所建立的液相基因芯片方法进行特异性、灵敏度、重复性及病料样品的检测。结果该方法的特异性强;检测的敏感性可达1×102copies/μL;批内批间的变异系数都在5%以下;检测结果与SYBR Green I荧...
目的:探讨ANCA相关性血管炎(AAV)采取激素+环磷酰胺+腹膜透析治疗的疗效情况。方法:选取60例于2009年3月至2011年3月期间我院接收的AAV患者,将入选患者平分为对照组与实验组,两组分别给予激素和激素+环磷酰胺+腹膜透析治疗,观察两组临床治疗疗效。结果:治疗1个月后,实验组在24h尿蛋白定量、BVAS、CRP、Scr的改善较对照组明显(P〈0.05);且治疗1个月后,实验组ANCA转阴率较对照组明显要高。结论:ANCA相关性血管炎患者采取...
作者:陈志宏; 牛嗣云; 岳凤鸣; 高福禄 期刊:《承德医学院学报》 2007年第04期
目的:构建pAAV/hIGF—1载体,并测定pAAV例GF—1病毒粒子包装盒病毒滴度。方法:将hIGF-l基因克隆入pAAV腺病毒相关病毒载体,以HEK293包装细胞包装病毒颗粒,HT1080细胞检测病毒滴度。结果:获得插入方向正确的hIGF—1腺相关病毒载体,HEK293细胞包装得到了1012滴度的病毒上清。结论:成功构建yhIGF-1腺相关病毒载体,并且获得了较高滴度包装病毒颗粒。
作者:李泰明; 许麒麟; 潘俊杰; 刘晓玫; 张春 期刊:《生物技术通报》 2016年第05期
旨在比较AAV-ITR基因表达微载体及其单体在小鼠不同部位的表达差异,将相同拷贝数的AAV-ITR基因表达微载体和p UC57-minivector-EGFP分别转入小鼠脑组织,另外将相同拷贝数的AAV-ITR基因表达微载体单体,AAV-ITR基因表达微载体和p UC57-minivector-EGFP转入小鼠骨骼肌中,比较不同时期组织中的残余分子数量。荧光定量PCR、显微荧光观察以及荧光平均光密度和荧光灰度值分析表明,相同拷贝数的AAV-ITR基因表达微载体单体比AAV-ITR基因表达...
作者:连文昌; 许佳佳; 李招发 期刊:《生物技术通报》 2011年第12期
腺相关病毒(AAV)作为载体进行基因治疗已经越来越受人们的青睐,其安全性在帕金森病、囊性纤维病和视网膜疾病等单基因突变疾病临床治疗中得到证明。利用AAV载体进行临床治疗的应用在逐渐增多,提高AAV靶向性和转染效率是人们期盼解决的一道难题。而目前对AAV衣壳蛋白基因工程的修饰,可以明显提高其转导效率和靶向性,一定程度上扫除了其广泛应用AAV的障碍。阐述重组AAV(rAAV)衣壳蛋白在基因工程修饰方面的研究进展及其对基因治疗...
作者:周子玉; 姚婷; 张晨光; 丁卫 期刊:《中国生物化学与分子生物学报》 2014年第09期
核心蛋白聚糖(decorin,DCN)是广泛存在于细胞基质中的一种富含亮氨酸的蛋白多糖,属于蛋白聚糖家族中的小分子类.DCN可作为多种细胞因子的配体,发挥多种生物学功能.DCN在一些肿瘤组织中高水平表达,调控恶性肿瘤的生长和迁移.腺相关病毒(AAV)是肿瘤基因治疗中常用的基因工程载体,利用重组技术可以实现对病毒衣壳蛋白的改造,使其感染具有靶向性.而针对DCN高表达细胞的转导可能成为肿瘤基因治疗应用中定向导入治疗基因的有效策略....
作者:赵霏 慈彩虹 白静雅 期刊:《西北民族大学学报·哲学社会科学版》 2011年第04期
目的:通过构建重组腺相关病毒载体(rAAV)包装质粒pAAV-MAGEA3,制备以MAGE-A3基因片段为免疫原的重组AAV病毒载体,为基因疫苗的研究及其进一步肿瘤免疫治疗提供实验基础.方法:提取人胎盘组织总RNA,采用RT-PCR法从中制备出含EcoR I酶切位点的MAGE-A3基因,并将其克隆至同种酶酶切过的pAAV-IRES-hrGFP包装在质粒上.根据酶切鉴定、MAGE-A3特异引物PCR扩增、DNA测序等方法对插入的序列进行鉴定.结果:成功克隆出950 bp的目的基因,并...
作者:袁亚丽 曹以诚 高强 杨磊 期刊:《安徽农业科学》 2011年第23期
[目的]通过构建靶向14-3-3ζ的siRNA及其报告基因EGFP的重组腺相关病毒载体,包装出含有目标基因的腺相关病毒。[方法]设计靶向14-3-3ζ的siRNA,插入到psiRNA质粒H1启动子下游,Western-Blot检测siRNA的抑制效果。从psiRNA质粒上扩增H1-si-ζ基因表达单位亚克隆到AAV表达质粒AAV-MCS-EGFP的Mlu1酶切位点,构建重组质粒pAAV-14-3-3ζ-EGFP。重组质粒与包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper用磷酸钙法共转染AAV-293细胞制备重组病毒rAAV-14-3-3...
作者:赵丽琴 席斌 彭华松 期刊:《生物技术进展》 2012年第02期
基因治疗的载体在基因治疗过程中起着至关重要的作用,其中腺相关病毒(AAV)载体具有低致病性、对宿主免疫原性弱、长期稳定表达、广泛的细胞和组织亲嗜性等优点,是目前发展最热,也是最有希望的载体之一,已被广泛应用于临床研究。本文综述了腺相关病毒载体的研究进展,包括AAV的血清型、新型载体的开发、生产工艺及其放大及临床研究及讨论了AAV载体还存在的问题及可能的解决方案。随着腺相关病毒载体研究的进展,新的载体系统...
作者:朱欣瑶 周庆璋 田文洪 刘春国 董小岩 吴小兵 喻长远 期刊:《生物工程学报》 2015年第12期
近年来,用8型腺相关病毒携带1.3拷贝HBV(Hepatitis B virus)基因组建立的HBV持续感染小鼠模型受到越来越多的关注。本研究比较了除AAV8之外的其他4种血清型重组腺相关病毒(Recombinant adeno-associated virus,rAAV)建立乙肝小鼠模型效果。首先,将携带1.3拷贝ayw亚型HBV基因组的1型、2型、5型、8型、9型腺相关病毒分别以1×10-(11) vg/只(Viral genome,vg)的剂量尾静脉注射C57BL/6J小鼠;利用ELISA方法监测小鼠血清中HBeAg和...