首页 期刊 临床肾脏病 辛伐他汀对肿瘤坏死因子α诱导的人腹膜间皮细胞组织型纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活物抑制因子1表达的影响 【正文】

辛伐他汀对肿瘤坏死因子α诱导的人腹膜间皮细胞组织型纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活物抑制因子1表达的影响

作者:田功何劲松
辛伐他汀   肿瘤坏死因子a   人腹膜间皮细胞   组织型纤溶酶原激活物   纤溶酶原激活物抑制因子1  

摘要:目的探讨辛伐他汀对体外培养的人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)在肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导后组织型纤溶酶原激活物(tis-sue-type plasminogen activator,t-PA)和纤溶酶原激活物抑制因子1(plasminogen activator inhibitor-1,PAId)表达的影响。方法应用胰蛋白酶消化法分离HPMCs进行原代培养并传代,将第三代分为5组(每组设3个样本):①正常对照组:将HPMCs置于完全培养液中,置于37℃、5%CO2培养箱培养24h;②单纯TNF-α(1μg/L)诱导组:将HPMCs置于浓度为1μg/L的TNF-α诱导缓冲液中,环境温度及处理时间如前;③TNF-α诱导+辛伐他汀(2.5μmol/L)组:将HPMCs置于含有TNF-α(1μg/L)诱导液+辛伐他汀(2.5μmol/L)缓冲液中,余同前;④TNF-α诱导+辛伐他汀(5.0μmol/L)组:将HPMCs置于含有TNF-α(1μg/L)诱导液+辛伐他汀(5.0μmol/L)缓冲液中,余同前;⑤TND-α诱导+辛伐他汀(10.0μmol/L)组:将HPMCs置于含有TNF-α(1μg/L)诱导液+辛伐他汀(10.0μmol/L)缓冲液中,余同前。采用半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测细胞内t-PA和PAI-1 mRNA表达;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清液中t-PA和PAI-1的蛋白质水平,用二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)蛋白检测法测定细胞中蛋白质含量,用以校正ELISA结果。结果与正常对照组比较,TNF-α诱导能抑制HPMCS中t-PA表达,增加PAI-1的表达(P〈0.01);与单纯TNF-α诱导组比较,辛伐他汀(2.5μmol/L)能显著增加TNF-α诱导HPMCs中t-PA表达,抑制PAI-1的表达(P〈0.05),t-PAmRNA表达水平显著上升和PAI-1mRNA表达水平显著降低(P〈0.01);辛伐他汀(5.0μmol/L及10.0μmol/L)亦能明显增加TNF-α诱

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