首页 期刊 临床耳鼻咽喉头颈外科 短发夹RNA抑制hTERT基因对鼻咽癌细胞端粒酶活性及PCNA和Caspase-3蛋白表达的影响 【正文】

短发夹RNA抑制hTERT基因对鼻咽癌细胞端粒酶活性及PCNA和Caspase-3蛋白表达的影响

作者:沈永忠 王燕 陈始明 肖伯奎 苏俊 陶泽璋 蕲春县人民医院耳鼻咽喉科 湖北蕲春 435000 武汉大学人民医院耳鼻咽喉一头颈外科
鼻咽肿瘤   rna干扰   端粒酶   pcna蛋白  

摘要:目的:研究靶向人端粒酶逆转录酶(hTERT)的短发夹RNA(shRNA)对鼻咽癌细胞系(CNE)端粒酶活性及PCNA、Caspase-3蛋白表达的影响。方法:构建表达靶向hTERTmRNA特异的shRNA的质粒pEG—FP—shTERT。将pEGFP—shTERT转染CNE细胞,TRAPPCR—ELISA法检测端粒酶活性,MTT法测定细胞增殖活性,TUNEL法检测细胞凋亡,Westernblotting检测蛋白表达。结果:pEGFP—shTERT成功转染人CNE细胞后,端粒酶活性显著下降;细胞增殖活性明显受抑制;大量细胞凋亡;处理后24及48h,PCNA蛋白下调至64.41%、58.67%(P〈0.05),Caspase-3上调到1.55、1.60倍(P〈0.05)。结论:shRNA靶向抑制hTERT基因在鼻咽癌CNE细胞系中的表达,能显著地抑制细胞的端粒酶活性,调节PCNA和Caspase-3蛋白表达,从而抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡。端粒酶、PCNA和Caspase-3共同参与了鼻咽癌的发生、发展过程。

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