摘要：为获得一种新的基因工程工具酶,通过基因合成的方法获得3C蛋白酶基因并将其克隆入表达载体pGEX-4T-1中构建表达载体pGEX-4T-3C,转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。表达产物经GST柱纯化后获得目的蛋白,于4℃条件下对融合蛋白TY50进行切割以鉴定活性。结果表明3C蛋白酶在大肠杆菌中获得了稳定高效的表达,经过GST柱纯化纯度达95%以上。酶切结果表明,获得的3C蛋白酶能够切割含有3C酶切位点的融合蛋白,因此成功开发出一种新的基因工程工具酶。

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