摘要:为了研究人新基因nelin及其心肌表达产物Nelin蛋白的生物特性,并寻找能够与其发生相互作用的蛋白质,对Nelin蛋白的全长及其部分结构域进行了肌动蛋白结合共沉淀实验,并在真核细胞内进行了免疫荧光共定位实验.结果发现,在体外共沉淀和细胞内共定位实验中Nelin均表现出同肌动蛋白相结合的能力.进一步采用酵母双杂交的方法将Nelin与人心脏cDNA文库进行杂交筛选,得到了3个阳性克隆分别为细丝蛋白(Filamin)C亚型、肌联蛋白(Titin)N2B亚型和α胰蛋白酶抑制物重链前体(ITIH).通过免疫共沉淀实验,验证了Nelin能够同Filamin的羧基末端免疫球蛋白样结构发生相互作用.通过上述实验证明了Nelin为一个新的肌动蛋白结合蛋白,并且能够同Filamin相结合.由此推论新基因nelin的心肌表达产物Nelin是一个细胞骨架相关蛋白并且很可能作为一个膜一细胞骨架连接蛋白,起到了参与细胞黏着斑形成的过程.
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