首页 期刊 菌物学报 捕食性真菌Duddingtonia flagrans原生质体获得与再生的荧光标记评价 【正文】

捕食性真菌Duddingtonia flagrans原生质体获得与再生的荧光标记评价

作者:张伟; 杨晓野; 王瑞; 祝晓蕊; 王新芳; 梁萌 内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室; 内蒙古呼和浩特010018
荧光标记   标记浓度   标记时间   孵育温度   原生质体再生  

摘要:为了更准确快捷地评价利用酶解法酶解捕食性真菌Duddingtonia flagrans菌丝产生的原生质体数量及菌丝细胞壁降解情况,采用活体荧光染料羧基荧光素乙酰乙酸(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE),对该捕食性真菌菌丝酶解后产生的原生质体进行荧光标记,分别考察了标记浓度、标记时间、孵育温度对原生质体标记效果的影响,并观察CFSE标记后的原生质体再生情况。结果表明CFSE终浓度为10μmol/L,标记时间为15min,孵育温度为36℃,是CFSE标记捕食性真菌原生质体的理想条件,该试验同时表明CFSE不影响原生质体的再生率。CFSE作为一种活细胞示踪荧光探针,可以快速高效地标记捕食性真菌原生质体,该方法为捕食性真菌原生质体制备质量的快速评价提供了新的思路。

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