首页 期刊 江苏农业科学 马铃薯EcoRⅠ/MseⅠ内切酶组合AFLP反应体系的优化与引物筛选 【正文】

马铃薯EcoRⅠ/MseⅠ内切酶组合AFLP反应体系的优化与引物筛选

作者:李建武; 李灏德; 文国宏; 李高峰; 马胜; 张荣; 贾小霞; 齐恩芳 甘肃省农业科学院马铃薯研究所; 甘肃兰州730070; 农业部西北旱作马铃薯科学观测实验站; 甘肃渭源748201; 甘肃农业大学生命科学技术学院; 甘肃兰州730070
马铃薯   aflp   体系建立与优化   引物筛选  

摘要:以2个马铃薯品种为材料,对AFLP反应过程中的关键因素(DNA浓度、酶切体系、扩增体系等)进行了优化,旨在建立适合马铃薯的EcoRⅠ/MseⅠ内切酶组合的AFLP反应体系和筛选扩增条带丰富的引物。结果发现,优化的马铃薯AFLP反应体系为37℃酶切4 h,37℃连接4 h,连接产物稀释10倍用于预扩增,预扩增产物稀释30倍用于选择性扩增。利用建立的优化反应体系,以10个甘肃省主栽马铃薯品种为材料,从256对引物组合中筛选出24对扩增条带多、条带清晰、多态性好的引物组合。

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