摘要：目的通过在体灌注TritonX-100、SDS溶液法制备大鼠全肾去细胞生物支架，并对支架制备过程中的关键步骤进行程序性检测、分析，为制备科学合理的实验用大鼠全肾去细胞生物支架提供基础。方法SD大鼠40只，随机分为4组，每组10只。肝素化后直接切取肾脏作为对照组（control组）；肝素PBS灌注组（H组）；肝素PBS、TritonX-100灌注组（HT组）；肝素PBS、TritonX-100、十二烷基硫酸钠（SDS）溶液灌注组（HTS组）。HE、Masson、PAS染色及透射电镜观察各组肾组织病理及超微结构改变，免疫荧光结合4，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）观察各组胶原蛋白Ⅳ（collagenⅣ）、层黏连蛋白（LN）、纤维连接蛋白（FN）、硫酸乙酰肝素蛋白多糖2（HSPG2）、弹性蛋白（elastin）及细胞核的表达情况，总DNA测定各组DNA残留浓度。结果TritonX-100、SDS灌注6h左右制备大鼠肾脏去细胞生物支架。在灌注过程中，肾内细胞和细胞碎片逐渐被清洗，最终变成半透明状。HE、Masson、PAS染色及透射电镜显示连续分布、形态排列类似肾小球、肾小管轮廓结构的网状结构，基膜连续完整。免疫荧光结合DAPI染色结果表明，去细胞过程中细胞外基质中的重要蛋白collagenIV、LN、FN、HSPG2、elastin都较好的得到了保存，细胞核在灌注过程中逐渐减少，直至完全消失；最终残留组织的DNA为4．90μg／g。结论通过合适浓度和灌注比例的TritonX-100、SDS制备大鼠肾脏去细胞生物支架，并对其进行程序性分析，发现能有效清除大鼠’肾内所有细胞成分，较完整的保留网络状肾及肾血管细胞外基质结构和成分，是-种简单易行且较为理想的制备实验用全肾生物支架的方法。

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