首页 期刊 解放军医学 大鼠肝卵圆细胞体外分离培养和诱导分化为肝细胞的初步研究 【正文】

大鼠肝卵圆细胞体外分离培养和诱导分化为肝细胞的初步研究

作者:周高速; 张振书; 刘思德; 苏磊; 王亚东; 何敬东; 张明军; 李旭 南方医科大学南方医院消化研究所; 广州510515
肝卵圆细胞   细胞分离   细胞培养   细胞分化  

摘要:目的探索体外诱导成年Wistar大鼠肝卵圆细胞(HOCs)分化为肝细胞的可行性。方法雄性Wistar大鼠36只,建立肝卵圆细胞增殖模型,采用两步法灌注和Percoll密度梯度离心法分离纯化HOCs,行体外培养并添加HGF、OSM和FGF4诱导其分化。结果每只模型大鼠肝脏体外分离可获得约1.34×10^5/mlHOCs,细胞为圆形、椭圆形或多角形,大小为正常肝细胞1/6~1/3,核质比例大,2周后可呈克隆样增殖生长。所获HOCs胞浆和胞膜表达干细胞标志Thy-1及C-kit,其原始细胞标志AFP呈阳性表达;能稳定传代,在HGF、OSM和FGF4刺激下形态逐渐发生改变,细胞伸展且体积渐增大,贴壁能力减弱,诱导14天后分化细胞Alb表达明显阳性,且随着诱导时间延长阳性率逐渐升高;诱导分化的细胞胞浆G-6-P及PAS染色均呈阳性。结论HOCs在体外一定条件刺激下可诱导分化为肝细胞。

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