摘要:为提高性控犏牛胚胎体外发育率,从性控精液的精子密度、受精时间、卵丘细胞的脱除程度、胚胎培养体系和胚胎培养环境各个环节进行优化。结果表明:(1)受精24h的卵裂率和囊胚率显著高于受精6h、18h(P〈0.05);(2)性控精液的精子密度0.4×10^6~0.6×10^6个/mL时的卵裂率显著低于4×10^6~6×10^6个/mL组(P〈0.05),但囊胚率差异不显著(P〉0.05),均显著高于性控精液0.04×10^6~0.06×10^6个/mL的卵裂率和囊胚率(P〈0.05);(3)卵丘细胞不脱除组的囊胚率(23.42%)显著高于半脱除组(13.77%)和完全脱除组的囊胚率(15.61%)(P〈0.05);(4)输卵管上皮细胞共培养的囊胚率(24.63%)和卵丘细胞共培养的囊胚率(23.42%)差异不显著(P〉0.05),但均显著高于FBS CR1aa培养液的囊胚率(P〈0.05);(5)性控犏牛早期胚胎在低氧培养环境下囊胚率(23.42%)显著高于高氧培养环境(11.83%)(P〈0.05),而孵化囊胚率差异不显著(P〉0.05)。结果说明,生产性控犏牛胚胎最佳的条件是性控精液的浓度0.4×10^6~0.6×10^6个/mL,受精时间为24h,采取卵丘细胞不脱除的方法,胚胎培养方式采用输卵管上皮细胞共培养的方式,胚胎培养环境采用低氧环境。
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