首页 期刊 家畜生态学报 抑制牛整合素β5基因表达的shRNA的筛选 【正文】

抑制牛整合素β5基因表达的shRNA的筛选

作者:王浩然; 王洪梅; 朱其军; 武建明; 刘晓; 宋玲玲; 何洪彬; 王立群 东北农业大学生命学院; 黑龙江哈尔滨150030; 山东省农业科学院奶牛研究中心; 山东济南250100; 山东省泰安市畜牧兽医局; 山东泰安271000
真核表达   shrna   western   blot  

摘要:根据牛整合素β5(Integrin Bata5,ITGB5)的基因序列,设计并构建了真核表达载体pcDNA3.1-flag-β5和shRNA重组慢病毒载体H1-shRNA145、H1-shRNA726,利用脂质体介导法,将pcDNA3.1-flag-β5分别和H1-shRNA145、H1-shRNA726共转染293T细胞,并以针对LacZ基因的H1-shRNA-LacZ与pcDNA3.1-flag-β5共转染293T细胞作为对照,以持家基因β-actin为蛋白内参,通过Western blot检测ITGB5的表达,结果表明,H1-shR-NA145、H1-shRNA726均可抑制ITGB5的表达,并有剂量效应,为进一步研究ITGB5的基因功能奠定基础。

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