首页 期刊 家畜生态学报 串联抑制素重组质粒的构建 【正文】

串联抑制素重组质粒的构建

作者:曹学亮; 焦硕; 苏从成 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所畜牧研究室; 甘肃兰州730050; 山东德州学院农学系畜牧研究室; 山东德州253015
串联   抑制素   基因克隆   重组质粒  

摘要:根据GenBank中报道的猪抑制素基因序列设计两对引物,克隆含有抑制素抗原决定簇基因片段α(1~32)的p1INH和p2INH,在这两个片段中都设有限制性内切酶XbaⅠ的酶切位点,通过XbaⅠ把plINH与p2INH串联起来。串联抑制素基因片段与pcDNA3.1载体通过EcoRⅠ、HindⅢ酶切位点连接后经过转化DH5a感受态细菌构建重组载体。以重组载体作为模板,以含有EcoRⅠ、HindⅢ酶切位点的引物进行PCR,产物经验证为含串联的抑制素基因。串联的抑制素基因产生的融合蛋白具有抑制素的免疫原性,且不会与体内其他蛋白发生免疫交叉反应。串联后的基因片段在单位体积内的抗原位点数增多,免疫效果也会加强。可以反馈性地抑制FSH的分泌,提高母畜的排卵数,提高产仔数。

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