摘要：用大西洋条鳕(Macrozoarces americanus)抗冻蛋白启动子opAFP promoter和牙鲆(Paralichthys olivaceus)c型溶菌酶基因构建"全鱼"溶菌酶基因元件opAFP-ly,首次应用电脉冲精子介导法将该基因片段导入到大菱鲆(Scophthalmus maximus)受精卵内,获得原代转基因大菱鲆.先后采用单因子方法和正交实验方法,重复实验确定了最适导入条件:脉冲电压为400V/em,脉冲次数为5,脉冲宽度为25ms,外源DNA浓度为50mg/L.利用最适导入条件,实现基因元件大规模转移.采用PCR技术对1月龄的原代转基因大菱鲆仔鱼的染色体DNA进行分析,结果表明外源基因的整合率可达28%.

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