首页 期刊 海峡药学 膜型MHC-i类分子高表达的GBMU251细胞疫苗的研制及其体外抗瘤作用 【正文】

膜型MHC-i类分子高表达的GBMU251细胞疫苗的研制及其体外抗瘤作用

作者:谢雪玲 福建医科大学附属第一医院神经外科; 福州350004
u251细胞   多形性胶质母细胞瘤   细胞疫苗   免疫治疗  

摘要:目的探索膜型MHC—I类分子高表达人多形性胶质母细胞瘤(GBM)U251细胞疫苗的制备方法及其体外诱导的抗瘤作用机制。方法U251胶质瘤细胞加入0~2000U·mL-1不同浓度梯度的重组人IFN-γ干预48h;流式细胞仪(FCM)检测不同浓度梯度的重组人IFN.1诱导后的U251细胞胞膜MHC.I类分子表迭变化情况;取诱导MHC—I类分子高表达最高的IFN-γ干预方案作为疫苗的制备方法;体外刺激健康捐献者PBMCs作为效应细胞,MTT比色法检测其对野生型及IFN-γ诱导48h后靶细胞的特异性杀伤活性,同时以抗人HLA—A,B,C行特异性杀伤试验的阻断试验;ELISA法检测效应细胞攻击靶细胞后的IFN一扎IL-2的分泌情况;FCM检测疫苗刺激前后PBMCsCD4+、CD8+T淋巴细胞比例变化。结果500U·mL-1 IFN-1诱导48hU251细胞胞膜的MHC-I类分子表迭率最高,达89.9%;高表达膜型MHC.I类分子U25l细胞疫苗9在体外具有明显特异性的杀瘤活性的诱导能力(P〈0.05);体外可分泌大量的IFN-1和L-2(P〈0.05);CD4+、CD8+明显增高(P〈0.05)。结论500U·mL-1 IFN-1诱导48h是U251细胞胞膜MHC—I类分子体外诱导表达的最佳方案;膜型MHC—I类分子高表达的U251细胞疫苗休外具有特异性的抗瘤作用,其杀瘤活性与膜型MHC—I类分子表达上调有关。

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