首页 期刊 湖南农业大学学报·自然科学版 松材线虫磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1基因的克隆及表达 【正文】

松材线虫磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1基因的克隆及表达

作者:王步勇; 问荣荣; 马玲; 周天华; 张萌 菏泽学院农业与生物工程学院; 山东菏泽274015; 东北林业大学林学院; 黑龙江哈尔滨150040
松材线虫   磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1基因   基因克隆   原位杂交   表达分析  

摘要:应用BLAST比对技术,在松材线虫基因组数据中鉴定得到模式线虫pdk–1的同源基因Bxpdk–1。结合RT–PCR技术进行Bxpdk–1基因完整蛋白编码区(CDS)扩增,得到CDS区全长2 298 bp。BxPDK–1蛋白含有“STKc_PDK1”“PH_PDK1”2个保守结构域,属于磷酸肌醇激酶超家族。序列比对及进化树分析显示,松材线虫BxPDK–1蛋白与捻转血矛线虫PDK–1蛋白(CDJ88126.1)同源性为50%,进化树聚在同一小分支上,亲缘关系较近。原位杂交试验表明,Bxpdk–1基因主要在线虫的头部神经元及咽部神经处表达。qPCR结果分析显示,Bxpdk–1基因表达响应鱼藤酮药剂胁迫处理。RNAi试验显示,Bxpdk–1在dsRNA处理12 h时,基因表达量显著下降,基因被沉默。

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