摘要:目的 观测Fibulin-5基因沉默对人膀胱癌细胞株的生长和迁移能力的影响及其可能的机制。方法采用Fibulin-5 RNA干扰慢病毒感染人膀胱癌细胞5637(F5组),并设置阴性对照病毒感染的细胞组(NC组)。采用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测Fibulin-5基因m RNA表达水平;M3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法检测Fibulin-5基因沉默后5637细胞的增殖活性;细胞划痕法测定比较Fibulin-5基因沉默对细胞的迁移率的影响;并利用Path Scan抗体芯片试剂盒检测Fibulin-5基因沉默对细胞受体酪氨酸激酶通路蛋白的表达的影响。结果 成功建立了Fibulin-5沉默细胞株,F5组的Fibulin-5 m RNA表达水平显著低于NC组(0.067±0.013 vs.1.001±0.000),Fibulin-5基因的敲减效率达到93.3%;与NC组相比,F5组的细胞增殖活力显著下降,增殖速度明显减缓,同时细胞迁移率均显著下降,差异均有统计学意义(P〈0.01);另外,F5组较NC组间变性淋巴瘤激酶、Axl、p44/42丝裂原活化蛋白激酶、Src蛋白的表达水平均显著上调(P〈0.05)。结论 Fibulin-5可能在膀胱癌细胞的增殖与转移过程中发挥作用,同时可能对胞外信号调节激酶及其信号通路蛋白具有抑制作用。
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