首页 期刊 河南农业大学学报 银加强金标免疫技术在鸡传染性支气管炎病毒检测中的应用 【正文】

银加强金标免疫技术在鸡传染性支气管炎病毒检测中的应用

作者:王泽霖; 王新卫; 刘守川; 陈少渠; 杨卫华 河南农业大学禽病研究所; 河南; 郑州; 450002; 郑州市原种场; 河南; 郑州; 450007
免疫技术   病毒检测   鸡传染性支气管炎病毒   硝酸纤维素膜   胶体金标记  

摘要:采用胶体金标记纯化的羊抗鼠IgG,建立了一种对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)进行检测的银加强金标免疫技术(SECGA).先将抗原点样于硝酸纤维素膜(NCM)中央,封闭后浸于40×稀释的 IBV单抗中作用10 min,洗涤后再浸于体积比为1:4稀释的金标羊抗鼠IgG溶液中作用1 h,银染10 min后观察,在膜上出现灰黑斑点的为阳性结果,反之,不出现斑点为阴性结果.SECGA对IB抗原最低测量值为0.703 ng·点-1(约2 μL),对含毒尿囊液的最低检测为102..9 EID50.结果表明,IBVM41毒株在鸡胚中繁殖时以36~54 h检测含毒量最高;SPF鸡感染3 d后可从气管粘液中检出病毒.SECGA检测抗原可用于IBV早期检测,具有群特异性,快速、敏感、简便,不需特殊设备,结果易判定等优点,尤适于基层实验室或现场应用.

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