首页 期刊 河南农业科学 塞尼卡谷病毒3ABC蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备 【正文】

塞尼卡谷病毒3ABC蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备

作者:连凯琪; 周玲玲; 张明亮; 张慢; 王英杰; 林正丹; 宋玉伟 安阳工学院生物与食品工程学院/河南省动物疫病防控与营养免疫院士工作站/河南省兽用生物制品研发与应用国际联合实验室; 河南安阳455000
塞尼卡谷病毒   3abc蛋白   原核表达   蛋白质纯化   多克隆抗体  

摘要:为了开发塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SVV)的检测试剂盒,克隆3 ABC基因进行原核表达和纯化,并将纯化的3ABC蛋白免疫大鼠,制备抗3ABC蛋白的多克隆抗体。通过Western blot鉴定制备的多克隆抗体与表达的3ABC蛋白的特异性识别能力,通过ELISA测定多克隆抗体的效价。结果显示,3 ABC基因在大肠杆菌中大量表达,且主要以包涵体形式表达,重组蛋白分子质量约为55 ku,经纯化后得到单一条带。免疫大鼠制备的多克隆抗体效价大于1∶64000,且与表达的3ABC重组蛋白发生特异性反应。综上,在大肠杆菌中成功表达了SVV 3ABC蛋白,且表达的重组蛋白具有免疫原性。

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