摘要:目的 采用悬滴法和传统细胞爬片法对胚胎干细胞等呈集落样生长的细胞进行检测。方法 取3.5天昆明小鼠胚胎放在KSOM培养液中,体外培养24h后,将孵出的ICM放在铺有饲养层的胚胎干细胞培养液中,4-5d待ICM呈柱状生长时,消化传代,并应用悬滴法和普通爬片法检测小鼠胚胎干细胞AKP表达。结果 分离、培养的小鼠胚胎干细胞体积小,细胞核大,细胞界限不清,呈集落样生长。应用悬滴法和普通爬片法对其进行AKP染色后,小鼠胚胎干细胞呈蓝紫着色。结论 悬滴法与传统的细胞爬片法相比,可以减少细胞丢失,利用较少的细胞即可成功的检测,明显提高了小鼠胚胎干细胞检测成功率。
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