首页 期刊 华北农学报 马铃薯A病毒重组CP多克隆抗体的制备及其在DAS-ELISA检测中的应用 【正文】

马铃薯A病毒重组CP多克隆抗体的制备及其在DAS-ELISA检测中的应用

作者:宋志成; 费新敏; 杨煜; 乔利仙; 王晶珊; 李广存; 郭宝太 青岛农业大学生命科学学院; 山东省植物生物技术高校重点实验室; 山东青岛266109; 山东省农业科学院蔬菜花卉研究所; 山东济南250100; 中国农业科学院蔬菜花卉研究所; 北京100081
马铃薯a病毒   重组cp   多克隆抗体   酶标记抗体  

摘要:利用重组CP作抗原制备出马铃薯A病毒的多克隆抗体,并将其用于DAS-ELISA检测。以p ET22b(+)为起始载体,构建了PVA-CP基因的原核表达载体p ET22b-ACP,重组菌BL21(p ET22b-ACP)经IPTG诱导表达出了分子量为30 k Da的特异性重组CP。利用高纯度重组CP为抗原免疫家兔,制备出了效价为1∶512 k的抗血清。以PVA重组CP为抗原,用间接ELISA与直接ELISA分别测定重组CP纯化抗体(Ig G)及其碱性磷酸酶标记物(Ig G-AP)的活性,用DAS-ELISA测定2种抗体的活性,目测及OD值测定结果表明3种ELISA测定反应都呈阳性。以PVA病毒阳性标准物为抗原,在上述3种ELISA测定中也呈阳性反应,重组CP多克隆抗体及其酶标抗体与PVA有较强的反应信号。利用重组CP制备的多克隆抗体及其酶标抗体达到了马铃薯A病毒DAS-ELISA检测的要求。

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华北农学报

影响因子:1.07

期刊级别:北大期刊

发行周期:双月刊