摘要:为研究卵寄生真菌在寄生并破坏卵的过程中几丁质酶的作用,本研究从烟草南方根结线虫卵上分离得到虫草棒束孢 HNE3,采用 RT-PCR 及 RACE 技术,首次克隆得到一个几丁质酶基因 IFCHI1。该基因 DNA 序列全长1417 bp,具有1个内含子,长度为61 bp,包含1个1185 bp的开放阅读框( ORF),编码1个由394个氨基酸组成的蛋白。通过在线软件分析,该蛋白理论分子量为44.1 kDa,等电点为4.88。通过 GenBank 比对,几丁质酶 IFCHI1属于第18家族糖基水解酶,比对分析不同来源真菌几丁质酶,发现该几丁质酶具有典型的催化区保守序列 SIGGW 和FDGIDIDWE及结合区保守序列 GTWEQGVYDY和 GLGGAMWWESS。同源性比对发现,该几丁质酶同昆虫寄生真菌几丁质酶同源关系近。结果表明,从虫草棒束孢 HNE3克隆得到几丁质酶基因 IFCHI1,为进一步明确该菌产生的几丁质酶对南方根结线虫卵壳降解及降低孵化率的作用机理提供理论依据。
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