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ENR基因在高油和普通玉米自交系中的克隆和表达分析

作者：柳展基; 唐桂英; 单雷; 毕玉平 刊期：2007年第04期

利用高油玉米自交系By804和普通玉米自交系B73为材料，克隆Enoyl—ACPreductase（ENR）基因，同时比较ENR基因的序列和表达差异。结果表明，ENR基因编码蛋白在高油和普通玉米中氨基酸序列完全一致；在授粉后15，25和35d的胚中，ENR基因呈下调表达，在同一发育时期，ENR基因在高油玉米By804中较高表达。

水稻粳型亲籼系S-c座位基因型分析

作者：丁效华; 张泽民; 曾瑞珍; 张桂权 刊期：2007年第04期

S-c是控制水稻籼粳亚种间杂种F1花粉不育性的基因座位之一。在该座位，台中65的基因型为S^j/S^j，广陆矮4号的基因型为S^i／S^i。以台中65和广陆矮4号为遗传测验种，分别与4个粳型亲籼系配组，根据部分F2群体中植株花粉育性表型及与S-c紧密连锁分子标记基因型的偏态分离程度，测定了这4个粳型亲籼系在S-c座位的基因型，结果表明，G2416—3的基因...

谷子DnaJ蛋白基因的克隆

作者：崔润丽; 智慧; 王永芳; 李伟; 李海权; 黄占景; 刁现民 刊期：2007年第04期

DnaJ蛋白是近年研究较多的同热激等胁迫反应相关的基因。本研究用0．8％NaCI胁迫下的谷子幼苗提取RNA，用反转录酶M-MLV扩增得到第一链cDNA，再以第一链cDNA为模板进行PCR扩增，克隆获得了完整的谷子DnaJ蛋白基因，该基因cDNA全长1260bp，编码419个氨基酸，具有DnaJ蛋白分子伴侣系统的3个保守结构域。将谷子DnaJ蛋白基因构建入表达载体pGFP，获...

大豆尿黑酸叶绿基转移酶基因的克隆与进化分析

作者：孟宪萍; 李晓晓; 李雅轩; 蔡民华; 胡英考 刊期：2007年第04期

采用基于EST的电子克隆方法，以拟南芥（Arabidopsis thaliana）的尿黑酸叶绿基转移酶基因（Homogentisate phytyltransferase，HPT）cDNA序列为信息探针，对大豆的EST数据库进行同源检索筛选，获得了1777bp长大豆HPT基因的cDNA序列（GenBank登录号为：AY956421），经RT-PCR扩增、分子克隆和序列分析验证，表明与电子克隆序列一致；该基因具有完...

夹竹桃苯丙氨酸解氨酶的基因克隆与序列分析

作者：王燕; 许锋; 杜何为; 蔡荣; 陈柳吉; 程水源 刊期：2007年第04期

首次从夹竹桃中克隆得到苯丙氨酸解氨酶（PAL）基因cDN段，并命名为NoPAL1，GenBank登录号为AY747677，这也是首次从夹竹桃花青苷代谢途径中克隆得到的基因。NoPAL1长866个bp，编码289个氨基酸。通过核苷酸和蛋白质序列多重比较发现NoPAL1与其他植物的PAL基因高度同源。NoPAL1编码的蛋白质序列包含与水稻、玉米PAL蛋白质相同的脱氨基位点和催化...

上西早生柿ETR5基因片段的克隆与植物表达载体的构建

作者：陈佳; 马俊莲; 张子德; 唐霞 刊期：2007年第04期

从上西早生（Uenishiwase）柿叶片中，提取了基因组DNA。以基因组DNA为模板，经PCR扩增，克隆到一个549bp的ETR5的DN段。序列分析表明，上西早生柿基因与洋梨ETR5的核苷酸同源性为79．0％，氨基酸同源性为81．0％；并且含有其他植物ETR5的保守氨基酸区和不变氨基酸残基，表明克隆到的序列是上西早生柿ETR5的基因片段。设计了2对带限制性内切酶位...

传染性喉气管炎病毒河南株ILTV-CG GX基因的克隆与序列分析

作者：陈红英; 崔保安; 李新生; 杨明凡; 赵丽; 方剑玉 刊期：2007年第04期

根据GenBank中收录的鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）GX基因核苷酸序列，设计并合成了1对引物，应用PCR技术扩增ILTV河南株（ILTV—CG）GX基因。将ILTV—CG接种10日龄鸡胚，提取ILTV基因组DNA进行PCR扩增。将回收的PCR产物与pGEM-T Easy载体进行连接，转化JM109感受态细胞，经蓝白斑筛选，对菌液PCR和酶切鉴定为阳性的菌株进行测序。测序结果表明...

p5CS基因在蒙农杂种冰草植株中的表达及耐盐性研究

作者：王桂花; 米福贵; 刘娟; 董淑君; 霍秀文; 杨宏雁 刊期：2007年第04期

为尽快培育出适宜我国干旱荒漠地区大面积推广的耐盐冰草新品种，试验以经PCR和Southern blot杂交检测的含有p5cs基因的蒙农杂种冰草植株为材料，用Northern blot检测目的基因在转化植株中的表达；并用1．5％NaCl盐溶液进行胁迫处理确定转化植株的耐盐性。结果表明：转基因冰草植株与DIG标记探针杂交呈现明显的杂交带；盐胁迫下，游离脯氨酸含量...

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刊期：2007年第04期

沙冬青cDNA文库的构建和EST分析

作者：内蒙古通辽市植保植检站; 内蒙古通辽028000; 郭九峰; 孙国琴; 沈传进; 乔惠蕾; 贾利敏; 郭志杰 刊期：2007年第04期

为研究沙冬青抗逆的分子机理，分离克隆其抗逆基因，以pBluescrlpt Ⅱ SK为载体构建了沙冬青（Ammopiptanthus mongolicus）越冬叶片cDNA文库，并对文库的部分克隆进行了5端随机测序，结果表明，该文库容量为2．16×10^5cfu，重组率为89．6％；插入片段的平均长度大于1kb。随机测序得到542个EST，拼接成360个uniEST，经网上BlastN及BlastX分析，...

农杆菌介导的半夏GUS基因瞬时表达

作者：贾永芳; 马玉坤; 郭余龙; 李名扬 刊期：2007年第04期

采用根癌农杆菌感染半夏无菌叶片、叶柄和愈伤组织，对GUS基因的瞬间表达进行研究，并分析了不同转化受体、感染时间、菌液浓度、共培养、预培养时间、菌种对GUS基因的瞬间表达的影响。结果显示，以半夏的无菌苗叶柄和愈伤组织，在OD值为0．2的EHA101或EHA105农杆菌液中感染15min，叶柄暗处共培养3d，愈伤组织2d，能够得到较高的GUS基因瞬间表达...

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刊期：2007年第04期

K^＋通道基因MIRK在网纹甜瓜植株中的表达分析

作者：张屹东; 黄丹枫; 牛庆良; 左开井 刊期：2007年第04期

在网纹甜瓜（Cucumis melo var ．retictdatus Naud．）叶片中克隆了一个cDN段，片段长1330bp。这段cDNA序列及由此推测的氨基酸序列分析和多序列比对表明扩增的片段是编码K^＋通道MIRK（Melon Inward Rectifying K^＋ Channel）基因的5’端。由此cDN段推测的氨基酸序列包含了6个跨膜片段S1到S6，其间有一个对离子选择性有重要作用的特征序列结...

猪IgGⅡ类Fc受体基因真核表达重组质粒的构建及表达

作者：张玉杨; 张改平; 乔松林; 郭成留 刊期：2007年第04期

利用本研究小组克隆的猪IgGⅡ类Fc受体cDNA（swFcγRⅡ）基因序列（DQ026064）设计引物，应用RT-PCR技术，从猪外周血白细胞cDNA中扩增了完整的960 bp swFcγRⅡ ORF序列，利用基因重组技术将swFcγRⅡ ORF基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3，经PCR及双酶切鉴定：扩增出901bp的PCR产物；Kpn I／Eco R I双酶切，切出5376和901bpDN段，表明重组质粒pcDN...

鸡Muslin cDNA克隆与序列分析

作者：王伟杰; 郭豫杰; 王月影; 乔新安; 杨森; 王艳玲; 杨国宇 刊期：2007年第04期

基于电子延伸序列，本试验克隆并分析了鸡Muslin基因。肌肉组织提取总RNA，利用设计的引物进行RT-PCR，PCR产物与pMD19-T连接后转化E．coli DH5α，检测阳性克隆并测序；克隆的Musclin基因与人、大鼠、小鼠同源性分别为74％，73％，70％，推测的氨基酸序列同源性分别为58％，54％，50％，氨基酸序列含有“KKKR”结构和与小鼠ANP，BNP，CNP蛋白的...