摘要：【目的】探讨异钩藤碱通过血管紧张素1型受体（AT1R）对血管平滑肌细胞（A7r5细胞）时钟基因昼夜节律改变的调控作用。【方法】采用血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导A7r5细胞构建时钟基因节律改变模型。实验分为正常对照组、模型组（AngⅡ剂量为0.1μmol/L）、异钩藤碱组（异钩藤碱剂量为31μmol/L）和异钩藤碱联用缬沙坦（AT1R阻滞剂）组（异钩藤碱31μmol/L、缬沙坦10μmol/L）。采用实时定量聚合酶链反应（q PCR）法检测各个时间点不同组A7r5细胞中AT1R、Per2、Bmal1、Clock基因的表达水平,建立数学模型计算不同参数间的差别。采用蛋白免疫印迹（Western blot）法检测各个时间点不同组A7r5细胞中Src和p-Src蛋白表达情况。【结果】A7r5细胞经AngⅡ（0.1μmol/L）作用后,AT1R、Per2、Bmal1、Clock基因出现昼夜节律改变,呈现反杓型波动;Src蛋白磷酸化表达增加。异钩藤碱（31μmol/L）作用后,上述时钟基因表达恢复正常的杓型波动。异钩藤碱（31μmol/L）与缬沙坦（10μmol/L）联用后,上述时钟基因的昼夜节律受到一定程度的抑制,各组细胞的中值、振幅和峰相位发生不同程度的改变,Src蛋白磷酸化水平下调。【结论】异钩藤碱通过AT1R-Src信号途径可调控AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞时钟基因表达的昼夜节律改变。

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