摘要:重组大肠杆菌Escherichaia coli能高效表达NMN转移酶,以此为出发菌株,以菌体生长量DD600和NMN转移酶的活力为响应值,对重组大肠杆菌产NMN转移酶的发酵条件进行优化。首先以Plackett—Burman实验设计优化筛选出3个主要影响因子:胰蛋白胨、甘油、MgSO4;随后以Box Behnken中心组合设计建立上述3个因子对OD600和NMN转移酶活力水平的数学模型;最后通过满意度函数获得最佳发酵条件为:酵母粉30g/L,胰蛋白胨10.5g/L,甘油3.49mL/L,MgS040.45g/L,K2HPO4 40.5g/L,KH2PO4 6.0g/L,NH4Cl1.5g/L,NaCl0.6g/L,接种量1.5%,诱导时间12h。在该优化条件下,菌体生长和产酶水平均获得了显著的提升。重组NMN转移酶的活力水平从8.85U/mg提高到15.48U/mg,菌体生长量0D600从4.85提高到6.01,提高幅度分别为74.92%和23.92%。
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