首页 期刊 广西医科大学学报 幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22克隆、表达和鉴定 【正文】

幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22克隆、表达和鉴定

作者:黄学勇 李永红 段广才 范清堂 郗园林 河南省疾病预防控制中心 郑州 450016 广西壮族自治区疾病预防控制中心 南宁 530028 郑州大学公共卫生学院流行病学教研室 郑州 450001
幽门螺杆菌   外膜蛋白基因   克隆   融合表达载体   酶切鉴定  

摘要:目的:克隆幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22,构建幽门螺杆菌omp22基因与麦芽糖结合蛋白基因融合表达载体,并进行诱导表达,鉴定融合蛋白免疫原性,为幽门螺杆菌疫苗研究提供依据.方法:利用 PCR 技术从Helicobacter pylori郑州分离株MEL-Hp27染色体DNA上扩增omp22基因,并将其克隆到表达载体pMAL-c2X中,转化大肠杆菌(E.coli TB1),用IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,Western blot鉴定其免疫原性.结果:PCR方法扩增的omp22基因长度约为540 bp.经酶切鉴定,插入到表达载体的基因片段与预期目的DN段相一致;SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为22 ku,融合蛋白的表达量约占全菌总蛋白的26%.结论:成功克隆并构建了omp22基因高效原核表达系统,为幽门螺杆菌基因工程组分疫苗的研究奠定基础.

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