摘要：目的：克隆人黑色素瘤相关抗原MAGE—A3基因，构建真核表达载体，检测、鉴定其在细胞中的表达。方法：MAGE-A3基因进行PCR扩增，凝胶回收PCR产物片段并连接至pMDl8一T载体。测序后将MAGE—A3基因片段亚克隆至真核表达载体，构建成plRES2-EGFP／MAGE—A3重组质粒。经脂质体转染至293T细胞株后，荧光定量PCR、Western-blotting法鉴定MAGE—A3基因的表达。结果：MAGE-A3基因正确克隆在plRES2-EGFP／MAGE-A3，测序结果与GenBank公布的MAGE—A3序列一致。转染293T细胞后能检测到MAGE-A3基因和蛋白的表达。结论：成功构建plRES2-EGFP／MAGE—A3真核表达质粒，并能在293T细胞中有效表达MAGE—A3蛋白，奠定了其作为DNA疫苗应用的基础。

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