首页 期刊 广东药科大学学报 人乙酰肝素酶稳定表达CHO细胞株的建立 【正文】

人乙酰肝素酶稳定表达CHO细胞株的建立

作者:林月霞; 陈咏娴; 董斌; 田素娟 广东药学院生命科学与生物制药学院; 广东广州510006
乙酰肝素酶   基因转染   稳定表达   绿色荧光  

摘要:目的 在CHO细胞中表达人乙酰肝素酶(HPA)并建立该酶的稳定表达细胞株.方法 在脂质体的介导下,用本实验室构建的pEGFP-N1-HPA重组质粒转染CHO细胞,经G418筛选稳定表达的细胞.通过荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白的表达情况,同时通过RT-PCR检测HPA基因转录水平、免疫细胞化学法检测HPA蛋白表达、MTT方法测定外源基因对CHO细胞增殖的影响.结果 荧光显微镜下可见转染的CHO细胞有绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR证实转染细胞中存在HPA基因mRNA的表达,成功获得HPA的稳定表达细胞株.结论 成功建立人HPA稳定表达CHO细胞株,为该酶的功能研究奠定了基础.

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